Efekti Cistanchea na promjene ATPaze u jetrenim mitohondrijama pacova septikemije

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Wang Zhiqiang Yin Gang

Sažetak: Cilj:Proučiti promjenuATPazna aktivnost mitohondrija jetre u sepsii efekatCistanchena njemu.Metode:40 SD pacova nasumično je podijeljeno u lažnu operacijsku grupu, 12-satni kontrolnu grupu, 12-satni administracijsku grupu, 16-satnu kontrolnu grupu i 16-satnu administrativnu grupu. Thesepsamodel je repliciran ligacijom i perforacijom cekuma (C LP) i upoređen. Grupna stopa preživljavanja, srednji arterijski pritisak (MAP), jetramitohondrijski ATPasepromjene aktivnosti.Rezultati:Nakon što su pacovi replicirali model sepse,ATPaseaktivnost jetremitohondrijesmanjio, a 24-stopa preživljavanja se značajno smanjila. TheATPaseaktivnost mitohondrija jetre nakon primjeneCistancheje značajno poboljšana u odnosu na kontrolnu grupu (P<0.05), which="" was="" significantly="" positively="" correlated="" with="" the="" reduction="" of="" rat="" mortality.="">zaključak:Smanjen mitohondrijskiAktivnost ATPaze u sepsi, preopterećenje ćelija kalcijem, te edem i nekroza su direktni uzroci smrti useptičkih pacova. Cistanche pojačava aktivnost ATPazeje važan mehanizam za liječenjesepsa.

Ključne riječi: Cistanche, cistanche sepsa mitohondrija ATP enzim

Sepsaje klinički kritična bolest. Iako su antibiotici ažurirani u posljednjih 30 godina, stopa mortaliteta od sepse nije značajno smanjena i još uvijek iznosi čak 50 posto [1]. Zapadni antibakterijski tretman "eliminacije zla" sam po sebi ne poboljšava prognozusepsa.U patogenezi TKM, sepsa spada u „pravednost manjka i zla“, lečenje se mora zasnivati ​​na principu „jačanja organizma“ i „eliminisanja zla“. Tradicionalna kineska medicina pokazala je veliki potencijal u liječenju sepse.Sepsakomplikovano zatajenjem više organa je osnovni uzrok visoke stope mortaliteta, a oštećenje ćelijske strukture je mikroskopska patološka osnova zatajenja više organa [2]. Cistanche je tradicionalna kineska medicina za tonik, što su pokazala moderna farmakološka istraživanjaCistancheima učinak otpora peroksidaciji membranskog estera i štiti funkciju stanica [3]. Funkcija odmitohondrijalnu energijumetabolizam je jedna od osnovnih funkcija stanica, a aktivnost jeATPaseje važan pokazatelj za mjerenje funkcijemitohondrijalnu energijumetabolizam. U ovom eksperimentu smo uočili promjene naATPaseaktivnost ćelija jetre useptičkih pacovai odnos između efekataCistancheo tome i mortalitetu pacova i imao je za cilj da pruži teorijsku osnovu i efikasno istraživanje za kliničko "jačanje" lečenjasepsa.

Cistanche

1. Materijali i metode

1.1 Reagensi

Cistanchekupljena je iz Xinjianga (identifikovao ga je profesor Tan Defu sa Medicinskog fakulteta Univerziteta Three Gorges). Uzelo se 200 g osušene cistanche i dva puta prevarilo u destilovanoj vodi. Filtrat je uparen i koncentriran do koncentracije od 1 g/ml. Natrijum pentobarbital (001104), China National Pharmaceutical Group Shanghai ChemicalReagensKompanija;ATPase Reagent(20030108), Nanjing Jiancheng Institut za istraživanje bioinženjeringa.

1.2 Eksperimentalni životinjski model i grupiranje

40 mužjaka SD štakora (kupljenih od Centra za eksperimentalne životinje Medicinskog fakulteta Tongji, Univerzitet nauke i tehnologije Huazhong), nasumično je podijeljeno u 5 grupa: grupa lažnih operacija (n=8), 12-satna kontrola grupa (n=8), 12-satna administrativna grupa (n=8), 16-satna kontrolna grupa (n=8), 16-sat administracijska grupa (n=8). Grupi lažne operacije i kontrolnoj grupi davan je normalan fiziološki rastvor putem sonde, a grupi koja je primala 1 g/ml Cistanche, dva puta dnevno, do 15 dana. Themodel sepseje repliciran ligacijom i perforacijom cekuma [4]. Prije operacije životinje su mogle slobodno piti vodu i postile su 12 sati.

1.3 Određivanje srednjeg arterijskog pritiska

Jugularna vena je umetnuta iglom za skalp, heparin je korišćen za antikoagulaciju, lijeva zajednička karotidna arterija kanulirana je u luk aorte, a kateter koji je sam izradio spojen je na biološki višekanalni instrument, a prosječniarterijski pritisak(MAP) je snimljen. Eksperimentirajte nakon što se MAP stabilizira.

1.4 Određivanje aktivnosti mitohondrijske ATPaze

Uzmite 6g jetre pacova i brzo stavite u medijum za odvajanje 0 stepena [250mmol saharoze, 2 mmol etoksi-etil piperazina 2-etilsulfonske kiseline, 0,1 mmol etilendiamintetrasirćetne kiseline, pH7,4], otvorite i isperite nečistoće, odvojite suspenziju medijuma (1:10), homogenizujte teflonskim električnim homogenizatorom (1200r/min), centrifugirajte na 2000r/min 10 minuta, zadržite supernatant, centrifugirajte na 10000r /min u trajanju od 15 minuta, bacite supernatant, uzmite talog i suspendirajte ga u 2ml medija za odvajanje da se dobijemitohondrijalna suspenzija. Cijeli proces se izvodi na 0 do 4 stepena. Za mjerenje je korištena metoda određivanja fosfora [5].Aktivnost ATPaze(komplet je kupljen od Nanjing Jiancheng instituta za biološki inženjering).

1.5 Statistička obrada

Eksperimentalni podaci su svi izraženi kao srednja ± standardna devijacija (X±S), a SPSS softver vrši jednosmjernu analizu varijanse i korelacijske analize.

Ekstrakt Cistanche

2. rezultati

2.1 Efekat Cistanchea na srednji arterijski pritisak i 24-satnu smrtnost pacova

Krvni pritisak kontrolne grupe značajno se smanjio 12 sati nakon ligacije cekalnog crijeva i perforacije, a postao je očigledniji nakon 16 sati. U poređenju sa grupom lažne operacije, postojala je značajna razlika. Krvni pritisakCistanche tretmangrupa je poboljšana. Stopa smrtnosti u kontrolnoj grupi bila je značajno viša od one u grupi lažne operacije, a stopa smrtnosti u grupi koja je primala je bila značajno niža od one u odgovarajućoj kontrolnoj grupi.

2.2 Efekat Cistanchea na aktivnost mitohondrijalne ATPaze

Aktivnostinatrijum-kalijum ATPaza, kalcijum ATPaza, magnezijum ATPaza i kalcijum-magnezijum ATPazau grupi sa administracijom bili su značajno veći od onih u odgovarajućoj kontrolnoj grupi, dostižući nivo lažne operativne grupe, što je značajno pozitivno koreliralo sa smanjenjemsmrtnost pacova (r=0.834) ).

Cistanche

3. Diskusija

Na plus -K plus -ATPaza, takođe poznat kao natrijum-kalijum pumpa, igra važnu fiziološku ulogu u održavanju fizioloških aktivnosti ćelije, telesne temperature i normalnog metabolizma, i reguliše ravnotežu jona unutar i izvan ćelije.U sepsi, postoji teška disfunkcija natrijum pumpe u unutrašnjoj mitohondrijalnoj membrani, što uzrokujemitohondrijskiedem. TheNa plus -K plus -ATPenzim je oštećen, neravnotežamitohondrijskiKoncentracija jona se povećava, aktivnost enzima energetskog metabolizma je inhibirana, opskrba ćelijske energije je iscrpljena i nastaje citotoksični edem. Istovremeno se povećava propusnost membrane, što na kraju dovodi do smrti ćelije. U eksperimentu smo otkrili da mitohondrijskiNa plus -K plus -ATPazaaktivnost septičkih hepatocita je značajno smanjena (P<0.01), indicating="" that="" the="" liver="" tissue="" is="" seriously="" damaged.="" after="" administration="" of="" cistanche,="" the="">Na plus -K plus -ATPazaaktivnost odmitohondrije jetreje značajno povećan (P<0.05), and="" the="" mortality="" of="">septičkih pacovaje značajno smanjena. Eksperimentalni rezultati sugeriraju da smanjenje odAktivnost Na plus -K plus -ATPazeznačajno pozitivno korelira sa razvojemsepsa kod pacova. InhibicijaAktivnost Na plus -K plus -ATPaze, ćelijski edem i smrt koja dovodi do zatajenja više organa mogu biti brzi razvoj sepse. Jedan od važnih mehanizama. Posljednjih godina bilo je mnogo izvještaja o tomeNa plus -K plus -ATPazai mnoge bolesti, koje su privukle pažnju kliničkih i osnovnih radnika. Od velikog je značaja proučavanje zakona promjena u djelatnostiNa plus -K plus -ATPazai njegovu regulaciju [6]. Malo se zna o specifičnom mehanizmuNa plus -K plus -ATPazau razvoju i ishodusepsa,i potrebna su dalja istraživanja.

Stabilnost intracelularnog kalcija i magnezija je neophodna materijalna osnova za održavanje intracelularnog odgovora oslobađanja i prijenosa informacija [7]. U eksperimentu, smanjenje odAktivnost Ca2 plus -ATPazeu kontrolnoj grupi direktno utiče na aktivnost kalcijeve pumpe, a smanjenje aktivnosti kalcijeve pumpe slabi ulogumitohondrijskikalcijum pumpa za izlučivanje Ca2 plus iz ćelije i Ca2 plus preopterećenje unutramitohondrije. Preopterećenje kalcijumom u mitohondrijima je važan uzrokmitohondrijskiporemećaj oksidativne fosforilacije, strukturna oštećenja i ćelijska nekroza [8, 9]. Preopterećenje Ca2 plus smanjuje potencijal mitohondrijalne membrane i sadržaj ATP-a u tkivu [10], a iskorištavanje energije ćelija tkiva je poremećeno. Ca2 plus može aktivirati fosfolipazu na mitohondrijima, uzrokovati oštećenjemitohondrijalnu membranu, uništavaju normalnu funkciju sinteze ATP mitohondrija i ometaju proizvodnju energije mitohondrija [11]. Poremećaji odmitohondrijski metabolizam kalcijumamože direktno uticatimitohondrijalna respiratorna funkcija, uzrokujućimitohondrijalnog kiseonikaporemećaji unosa i oksidacije protona u lancu transporta elektrona [12]. Istovremeno, povećanje Ca2 plus može pogoršati oštećenje mitohondrija esterskom peroksidacijom [13]. Sve to direktno ili indirektno dovodi do zastoja u opskrbi ćelijske energije i odumiranja tkiva i organa i ubrzava razvoj patoloških promjena u sepsi. U eksperimentu smo također utvrdili da aktivnosti odM g2 plus -ATPaza i Ca2 plus -M g2 plus -ATPaza kod septičkih pacovatakođe su značajno smanjene.Mg2 plus -ATPaza i Ca2 plus -M g2 plus -ATPazavažne su tvari za održavanje unutarćelijske ravnoteže kalcija i magnezija. Widner je izvijestio da je smanjenje intracelularnih jona magnezija inducirajući faktor ireverzibilnog oštećenja stanica, a omjer Mg 2 plus /Ca2 plus je važan indikator koji odražava ireverzibilno oštećenje stanica [14]. TheMg2 plus -ATPaza i Ca2 plus -M g2 plus -ATPazaaktivnostiCistanche-primijenjene grupe su pojačane, A TPaza je sulfhidrilaza, iCistancheima anti-membranski efekat peroksidacije estera, što može biti posljedica pojačanjaATPaseaktivnost Cistanchea Osnove hemije i Osnove farmakologije [15].

kod sepse, mitohondrijskiporemećaj energetskog metabolizma, smanjenAktivnost enzima ATP, mitohondrijski edem, intracelularno preopterećenje kalcijem i poremećaj ravnoteže kalcija i magnezija direktni su uzroci smrti stanica sepse i zatajenja više organa.Cistancheantagonizira peroksidaciju membranskog estera, pojačava aktivnost ATPaze, održava intracelularnu homeostazu kalcija i magnezija i štiti normalan rad ćelijskih funkcija.Cistancheje važan mehanizam za smanjenje smrtnosti odseptičkih pacova. To pokazuje dobre izglede zaCistanche u liječenju sepse