Effects Of Cistanche Glycosides On The Immune Function of D-galactose-induced Aging Model Miševi
Mar 08, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
〔Abstract〕 Cilj:
Za proučavanje imunološkog mehanizma anti-starenja efekt Cistanche glycosides na D-galaktoze izazvan starenje miševe.Metode: Metoda inkorporacije 3 H-TdR korištena je za određivanje sposobnosti transformacije limfocita, Neutralni crveni test je korišten za određivanje fagocitske funkcije mišje peritonealnih makrofaga, metoda imunofluorescencije je korišćena za otkrivanje podskupa limfocita, a radioimunoaseja je korišćena za određivanje nivoa IL-2 u perifernoj krvi. , Trace NAG metoda oslobađanja enzima za mjerenje aktivnosti NK ćelija.Rezultate: Imunološku funkciju starenja miševe izazvane D-galaktoze značajno je snižena, što se manifestiralo u sposobnosti transformacije limfocita, sadržaja IL-2 periferne krvi, CD4+ T ćelije i sadržaja CD8+ T ćelija, fagocitnoj funkciji peritonealnih makrofaga i aktivnosti NK ćelija. Snizenje (P<>cistanche glikosidemože poboljšati sposobnost transformacije limfocita, sadržaj PERIFERNE KRVI IL-2, fagocitsku funkciju peritonealnih makrofaga, aktivnost NK ćelija, CD4 + T i CD8 + T sadržaj ćelija (P<0.05). 0.="" 05).="">Zaključak: cistanche glycosidea moze znacajno pojacati imunolosku funkciju starenja miša izazvanih D-galaktoze, vratiti ili pristupiti stanju mladih miševe, i imati učinak odgađanja starenja.
[Ključne reci]:Cistanche total glycosides; D-galaktozu; model starenja; Imunitet
Cistanche od glycosidea:protiv starenja
Cistancheje najčešće korišten lijek u formulama protiv starenja i dugovječnosti. Cistanche total glycosides (GCS) je opći izraz za klasu feniletanoidnih glycosides u cistanche i je glavna biološka aktivnost ekstrahiran iz cistanche koji proizvodi soli u sjevernom Xinjiang Komponenta [1], GCS je dokazano da imaju anti-lipidni peroksidacij efekt [2], ali postoji malo istraživačkih izvještaja o njegovomimunološki mehanizam protiv starenja.
1. Materijali i metode
1. 1 Grupisanje životinja i medicina
60 Kunming miševi, muški i ženski, star 3 mjeseca, težak 18-21 g, obezbjeđen od strane Životinjske sobe Instituta za biološke proizvode, Ministarstvo zdravlja. Miševi u svakoj grupi su bili u istoj prostoriji u odvojenim kavezima, i bili su slobodni da jedu i piju. Životinje su bile nasumično podijeljene u tri grupe: grupu za kontrolu mladih, grupu modela starenja i grupu za model administracije, sa 20 životinja u svakoj grupi. GCS je izvađen i identificiran od strane Odjela za fitohemiju, Škola farmaceuta, Jiamusi University prema literaturi [1].
Poboljšaj imunitetCistanche dodatak
1.2 Metoda
Mladoj grupi je u vrat ubrizgana normalna otopina supkutano 30 dana svaki dan te joj je dana topla voda 15 dana od 15. dana. Miševi iz grupe modela starenja ubrizgali su D-galaktozu (autoklaviranu) 100 mg/kg subkutano na vratu svaki dan. Tjelesna težina 30 uzastopnih dana. U grupi za administraciju modela D-galaktoze 100 mg/kg tjelesne težine ubrizgana je supkutano na zadnji dio vrata svaki dan, a GCS 125 mg·kg-1·d-1 je dano u isto vrijeme od 15. dana, a administracija se kontinuirano primjenjivati 15 dana. Sve životinje su žrtvovane u isto vrijeme 30. dana, a utvrđeni su i razni indeksi promatranja.
1. 2. 1 eksperiment transformacije limfocita
Suspenzija ćelija slezene miša je prilagođena koncentraciji ćelija od 2×106, a Con A je korišten kao stimulans za kulturu in vitro 5 dana, a sposobnost transformacije testirana je metodom 3 H-Td R inkorporacije. Rezultati su izraženi kao stimulans indeks SI (SI=ConA stimulaciona grupa/kontrolna grupa).
1. 2. 2 Mišja peritonealna makrofaga fagocitska funkcija (neutralni crveni test [3])
Prikupite peritonealnu tekućinu mišamakrofagsuspenzija aseptično. Nakon centrifugacije, lebdite padavine u mediju kulture ćelija. Koristite hemocitometar za brojanje i podešavanje koncentracije ćelije otopine na 2×106. 2 sata ga ukubaj u inkubator od 37°C. , Odbacite supernatantne i ne-pridržavajuće ćelije. Uzmi zidne makrofage i dodaj 0,1% neutralne crvene fiziološke fiziološke otopine na 37°C i nastavi u kulturu 30 min, Odbacite neutralnu crvenu i više puta perite makrofage sa 37°C PBS, razrijedite sa 50% ocetske kiseline i 50% etanola, postavite 722 spektrofotometarske colorimetrije na 540 nm talasne dužine, izmerenu apsorpciju A vrednost.
1. 2. 3 Otkrivanje podskupa limfocita
Uzmite 0,1 ml od 1×107/mlsuspenzija limfocita, dodati 10 μl miša protiv miša CD3, CD4, odnosno CD8 monoklonska antitijela, dobro miješati, inkubirati na 4°C 30 min, 1% FC S u PBS (0. 2M, pH7.4) Oprati 3 puta, detekcija cistometrije protoka: laserski protokni cistometar (FACScan, USA BD company), argon laser, uzbuđena valna dužina 488 nm, FITC detekcioni spektar 480~630 nm, broj 800/ s ćelija, Ukupno 200.000 ćelija. Rezultati su analizirani i snimljeni računarom HP340 i profesionalnim softverom LYSI SII..
1. 2. 4 Određivanje IL-2 u perifernoj krvi radioimunoasijom
Uzmi 1 ml krvi iz mišje očne jabučice u epruveti. Nakon koagulacije, serum je odvojen. Prema operaciji kita, BROJ CPM-a se mjeri na pultu.
1. 2. 5 AKTIVNOST NK ćelija
Uzmite krv miša za oči aseptično i dodajte heparin za antikoagulaciju. Za detalje se obratite literaturi [4]. 1.3 Statistička obrada Eksperimentalni podaci su izraženi kao x±s, obrađeni od strane softvera S AS, i analizirani analizom varijance, F testom i t-testom.
korist cistanchea: Poboljšanje imuniteta
2. rezultati
2.1 Efekti GCS-a na sposobnost transformacije limfocita i podskupa T ćelija u svakoj grupi miševa prikazani su u Tabeli 1.
Tabela 1. Učinak GCS na sposobnost transformacije limfocita i T ćelija podskupa u svakoj grupi miševa (n= 16,x±s)
| Grupa | CD4+ | CD8+ | CD4+ /CD8+ | DA |
| Grupa za kontrolu mladih (I.) | 38.7±4.1 | 33.5±3.1 | 1.16±0.12 | 70.0±7.2 |
| Grupa modela starenja (II.) | 29.5±3.71) | 27.0±2.31) | 1.09±0.11 | 58.2±2.41) |
| Grupa za administraciju modela (III.) | 37.6±4.02) | 32.8±2.92) | 1.15±0.12 | 68.2±6.42) |
U odnosu na I.: 1) P<0.05, 2)="" p.="" 05;="" compared="" with="" ⅱ:="" 2)="" p=""><0.05; the="" same="" as="" the="" table="">
2.2 Učinci GC-ova na fagocitsku funkciju, sadržaj IL-2 i AKTIVNOST NK ćelija peritoneanih makrofaga u svakoj grupi miša prikazani su u Tabeli 2.
Sto 2. Učinak GCS-a na fagocitsku funkciju, aktivnost NK ćelija i IL-2 sadržaj peritonealnih makrofaga u svakoj grupi miša (n= 16,x±s)
| Grupa | Mф guta neutralnu crvenu A540nm vrijednost | IL-2 sadržaj (ng /ml) | Aktivnost NK ćelija (%) |
| Grupa za kontrolu mladih (I.) | 0. 143± 0. 031 | 10. 68± 2. 12 | 26. 3± 3. 8 |
| Grupa modela starenja (II.) | 0. 089± 0. 0121) | 6. 87± 1. 451) | 15. 9± 4. 11) |
| Grupa za administraciju modela (III.) | 0. 141± 0. 0272) | 9. 98± 1. 562) | 24. 1± 3. 72) |
3. Diskusija
U ovom eksperimentu smanjena je fagocitska funkcija peritonealnih makrofaga i aktivnost NK ćelija starenja modela miša (P<0.05). gcs="" can="" increase="" the="" phagocytic="" function="" and="" nk="" cell="" activity="" of="" peritoneal="" macrophages="" in="" aging="" model="" mice=""><0.05), which="" is="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" from="" this,="" it="" can="" be="" inferred="" that="" gcs="" can="">poboljšati nespecifičnih ćelijskih imuniteta tijela i funkcije imunoloske regulacijeipoboljšati Anti-tumor i anti-infekcijaod starenja tijela je jedan od načina da se odgodi starenje [4]. IL-2 je nezaobitan citokin za proliferaciju i differentiaciju T limfocita, i može regulirati funkcije limfocita, monocita-makrofaga i NK ćelija. IL-2 može promicati proliferaciju i differentiaciju limfocita T, reguliratiimunološki odgovor, inducirat Tc aktivnost, i promovirati proizvodnju antitijela i interferon-α.Ima važnu ulogu u imunološkom sistemu.. U ovom eksperimentu, il-2 sadržaj starenja modela miša se sniћao (P<0.05). after="" gcs="" were="" given,="" the="" il-2="" content="" increased=""><0.05), which="" was="" close="" to="" the="" youth="" model="" group,="" indicating="" that="" gcs="" produced="" il="" by="" increasing="" t="" lymphocytes.="" -2,="" enhance="" the="" immune="" function="" of="" elderly="" mice="" and="" achieve="" the="" effect="" of="" delaying="" immune="" aging.="" the="" content="" of="" cd4+="" t="" cells="" and="" cd8+="" t="" cells="" decreased="" significantly="" with="" increasing="" age.="" the="" low="" t="" cell="" function="" was="" also="" manifested="" by="" the="" decline="" of="" specific="" antigen="" and="" mitogen="" con="" a,="" and="" the="" decline="" of="" the="" ability="" of="" t="" cells="" to="" divide="" repeatedly.="" in="" this="" experimental="" model,="" the="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4+="" t="" cell="" and="" cd8+="" t="" cell="" content="" of="" the="" mouse="" was="" reduced="" (p=""><0.05), and="" gcs="" increased="" the="" mouse="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4="" +="" t="" cell="" and="" cd8="" +="" t="" cell="" content="" (p=""><0.05). 05),="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" it="" shows="" that="" gcs="" can="" make="" the="" body="" resist="" aging="" and="" tend="" to="" be="" younger="" by="" promoting="" the="" proliferation="" of="" lymphocytes="" and="">poboljšanje specifične ćelijske imunoloske funkcije miša.
Poboljšati imunitet cistanche dodatak
4. Reference
1. Du Niansheng, Wang Hong. Izolacija i identifikacija fenoksietanol glycosides iz Cistanche [J]. Natural Products Research and Development, 1993; 5(4): 7-8.
2. Li Linlin, Wang Xiaowen, Wang Xuefei, et al. Anti-lipid peroksidacija i anti-zračenje efekti ukupnog glycosides cistanche 〔J〕. Chinese Journal of Chinese Materia Medica, 1997; 22(6): 364-367.
3. Xu Shuyun, Bian Rulian. Experimental Methodology of Pharmacology [M]. 2. izdanje. Beijing: People's Health Publishing House, 1994: 1221.
4. Liu Xiongbo, Liu Caiyu, Yang Xiuyun, et al. Detekcija aktivnosti NK ćelija metodom oslobađanja micro-NAG [J]. Journal of Clinical Laboratory Science, 1996; 14(2): 66-67.
