Hemijski sastojci listova Cistanche Ⅱ

3. Diskusija

Fitokemijska istraživanja za identifikaciju biološki aktivnih spojeva u listovima hurmaša su široko provedena. Do sada je prijavljen značajan broj triterpenoida i flavonoida, uključujući derivate kempferola i kvercetina.D. kaki[1]. U ovoj studiji dobili smo 27 spojeva, uključujući šesnaestflavonoidi, jedan jonon, dva kumarina, sedam triterpenoida i jedan acetofenon. Od ovih, složena1 otkriveno je da je novi fllavonoid i jedinjenje2 je prvo bio izolovan odD. kaki. Osim toga, kaempferol-3-O- -200 -feruloil glukozid (3) je samo prijavljen kao hidrolizirani proizvod 3-O- -(2-O-feruloil)-glukozil-7,40 -di-O- -glukozil kempferol (3), izolovan odAllium tuberosum[35]. Compound3 ne samo da je po prvi put dobijen direktno iz prirodnog izvora, već i nije prijavljen uD. kakiprethodno. Nadalje, kaempferol-3-O- -200 -galoil galaktozid (11) je ranije objavljeno u mnogim izvorima, uključujućiD. kaki, ali samo1H NMR i MS su prijavljeni zbog nedostatka detaljnih istraživanja. Dakle, the13C NMR podaci su prvi put objavljeni ovdje.

Do sada je bilo nekoliko studija koje su pokazale antioksidativne sposobnosti ekstrakata ili frakcija listova dragulja [37,38]. Većina studija koristila je brze metode analize kao što su DPPH ili ABTS testovi. Konkretno, u prethodnom radu, 200µg/mL frakcije bogate flavonoidima pokazao je 68,73 posto inhibiciju DPPH radikala. Međutim, osim ovog rezultata, ova frakcija je pokazala i superoksid anionradikalno čišćenje, uklanjanje hidroksilnih radikala i aktivnosti keliranja metala [38]. Iako nismo procijenili ove testove, provedena je izolacija vođena biotestom jer su etanolni ekstrakt i etil acetatna frakcija u ovoj studiji pokazali uporedivu aktivnost uklanjanja DPPH radikala. Osim toga, uprkos prethodnim rezultatima, provedeno je samo nekoliko studija za identifikaciju biološki aktivnih spojeva. Nekoliko sekoiridoida i lignana pokazalo je radikalne aktivnosti čišćenja [39]. U slučaju flavonoida, bilo je nekoliko izvještaja da kvercetin, kempferol i njihovi glikozidi imaju antioksidativna svojstva [40]. Prijavljena su antioksidativna svojstva dodijeljenog glikozida kempferola i alociranog kvercetin glikozida dobivenog iz drugih izvora [41]. Do sada nije bilo izvještaja da svako od ovih jedinjenjadobijen od listova persimmon ima antioksidativno djelovanje, osim što je mješavina ovih spojeva pokazala antioksidativno djelovanje [21]. 

Dodatno, do sada je vršeno istovremeno određivanje samo nekoliko triterpenoida ili flavonoida za kvantitativnu analizu ovih jedinjenja [42,43]. Međutim, ova studija predlaže metodu za istovremeno određivanje većine komponenti u listovima dragulja.

Kliknite ovdje da biste dobili više znanja o tome kako Cistanche protiv starenja

4.1. Biljni materijal

ListoviDiospyros kakiThunb. (Ebenaceae) kupljene su kod domaćeg Korejcabiljna pijaca u Yeongcheonu u martu 2018. Lišće je ubrano na području sliva okruženog planinama na nadmorskoj visini od 800–1200 m u Gyeongsangbuk-dou u avgustu 2017. Prosječna količina godišnjih padavina na ovom području bila je 1050 mm,od čega je polovina pala između juna i avgusta. Prosječna godišnja temperatura bila je oko12.5 ◦C i prosječna relativna vlažnost zraka bila je 69 posto. Temperatura u vrijeme žetve je bilaotprilike 37–40◦C. Dobijeni listovi su osušeni na približno 45◦C u biljcisušilica. Uzorak vaučera (DIKA1-2018) je deponovan u Laboratoriju za prirodneMedicina proizvoda, Farmaceutski fakultet, Univerzitet Kyung Hee, Republika Koreja.

4.2. Opće eksperimentalne procedure

silika gel (ODS-A 12 nm S-150µm, YMC, Tokio, Japan). Flash hromatografija je bila performiran pomoću CombiFlash-a (Teledyne Isco, Lincoln, NE, SAD) sa prethodno upakovanim kertridžima,RediSep-silika (12 g, 24 g i 40 g) i RediSep-C18 (13 g, 26 g, 43 g i 130 g). Preparativna HPLC je izvedena korišćenjem Gilsonovog sistema za prečišćavanje (Gilson, Middleton, WI,SAD) sa kolonom YMC Pack ODS-A (250× 20.0 mm, 5.0µm, YMC, Tokio, Japan), sferaODS-M80 kolona (250× 20.0 mm, 4.0µm, YMC, Tokio, Japan) i Luna C18(2)stupac (250× 21,2 mm, 10.0µm, Phenomenex, Torrance, Kalifornija, SAD). HPLC analiza je bilaizvedeno na Youngin YL9100 HPLC sistemu koji se sastoji od evaporativnog raspršenja svjetlostidetektor (Youngin, Anyang, Koreja) sa Luna C18(2) kolonom (150× 4,6 mm, 5.0µm, Phenomenex, Torrance, Kalifornija, SAD). Online HPLC-ABTS skrining je izveden naAgilent 1200 HPLC sistem sa YMC Pack ODS-A kolonom (150× 4,6 mm, 5.0µm). Sva otapala korištena za kromatografsko razdvajanje su destilirana.

4.3. Ekstrakcija i izolacija

Osušeni biljni materijal (15.0 kg) ekstrahiran je sa 216 L etanola (EtOH) uvodeno kupatilo na 60◦C tokom 4 h, a rastvarač je uparen da se dobije EtOH ekstrakt (1,2 kg,prinos od 8 posto). Ekstrakt je suspendovan u H2O (2,1 L) i podijeljen s etil acetatom(EtOAc, 4,9 L× 3) da se dobije EtOAc- (321,9 g, prinos 2,15 posto) i H2O-topivi slojevi (748.0 g,prinos od 4,99 posto), respektivno. Sloj rastvorljiv u EtOAc (321,9 g) je podvrgnut silika gelukolona (φ 10.5 × 35.0 cm) san- smjese eksan:EtOAc:metanol (MeOH) (od 8:1,8:0.2do {{0}}:0:1v/v/v) da se dobije devet frakcija (E1~E9).

Frakcija E5 (14,2 g) je kromatografirana preko Diaion HP-20 kolone (φ 5.0 × 29.0 cm) sa acetonom: H2O gradijent (7:3 do 1:0) da se dobije sedam frakcija (E5-1~E5-7). Razlomak E5-1 je biopodvrgnuti silika gel koloni san-heksan:EtOAc: MeOH=7:2.7:0.3 do 0:0:1 da se dobije 4 frakcije(E{{0}}~E5-1-4). E5-1-1 (13,2 mg) i E5-1-2 (7,0 mg) su kombinovani i prečišćeni preparativnom(prep)-HPLC koristeći YMC Pack ODS-A kolonu (H2O: MeOH=27:23,7 mL/min) dobitispojeva19 (8,3 mg, tR 26.0 min) i20 (2,5 mg, tR 24.0 min).

Frakcija E8 (75,19 g) je frakcionisana na rastvorljivu u acetonu (AS) i nerastvorljivu u acetonu(AIS) frakcije. Frakcija AS (44,07 g) je kromatografirana preko Diaion HP-20 kolone(φ 6.5 × 12,5 cm) sa acetonom: H2O mješavine (3:7 do 1:0) da se dobije 12 frakcija (AS1~AS12).Frakcija AS2 (2,5 g) odvojena je kolonom Sephadex LH-20 (φ 4.7 × 51.0 cm) saMeOH daje devet frakcija (AS2-1~AS2-9). Frakcija AS2-2 (196,3 mg) je odvojena safleš hromatografija (FC) korišćenjem RediSep-C18 uloška (26 g, acetonitril: H2O, 0:1 do7:1) da bi se dobilo jedinjenje17 (28,6 mg). Frakcija AS3 (3,1 g) je razdvojena na 11 frakcijakoristeći Sephadex LH-20 kolonu (φ 4.7 × 51.0 cm) sa MeOH (AS3-1~AS3-11).

RazlomakAS{{0}} (0,7 g) je razdvojen FC sa RediSep-C18 (130 g, MeOH:H2O, 1:9 do 3:2) datispojeva4 (51,8 mg),5 (21,7 mg, tR 42,5 min) i6 (20,2 mg, tR 47.0 min). Frakcija AS4 (8,8 g) je podvrgnuta koloni silika gela (φ 5.2 × 21.0 cm) sa MC:MeOH:H2O mješavine (od 8:1.8:0.2 do 7:2.7:0.3) za izolaciju jedinjenja7 (5.0 mg),8 (5,1 mg),9 (20.0 mg), 10 (306.6 mg), i12 (20,1 mg). Frakcija AS5 je podvrgnuta koloni silika gela (φ 5.2 × 24,5 cm)sa CH2Cl2:MeOH:H2O mješavine (8:1.8:0.2 do 7:2.7:0.3) za generiranje šest frakcija (AS5-1~AS5-6) da bi se dobila jedinjenja11 (3.0 mg) i13 (7,4 mg). Frakcija AS10 je odvojenana sedam frakcija koristeći Sephadex LH-20 kolonu (φ 3.5 × 50,5 cm) sa MeOH (AS10-1~AS10-7). Frakciju AS10-4 je odvojio FC sa RediSep-C18 (43 g, MeOH:H2O,

0:1 do 3:2) kertridž za pročišćavanje jedinjenja1 (5,3 mg),2 (21,4 mg),14 (15,9 mg), i15 (40.4 mg). Frakcija AS12 je razdvojena na pet frakcija pomoću Sephadex LH-20 kolone (φ 3.5 × 50,5 cm) sa MeOH (AS12-1~AS12-5). Compound16 (20,1 mg) je dobijeno odrekristalizacija sa MeOH iz frakcije AS12-5.

Frakcija Als (31,1 g) je hromatografisana na koloni silika gela sa h heksanom EtOAc: MeOH smešama (8:1,8:0.2 do 0:0:1) kao mobilnom fazom za daju 20 frakcije (AIS1-AIS2{{20}}) Frakcija AlS5 je podvrgnuta silika gel koloni sa smjesama n-heksan:EtOAc:MeOH (8:1,8: {{30}}.2 do 0:0:1) da se dobije jedinjenje 23 (224,7 g). Frakcija AIS6 je odvojena FC sa RediSep-C18 (43 g, MeOH:HO, 0:1 do 9:1) kartridžom da se dobije jedinjenje 25 (25,6 mg) Frakcija AIS7 je podvrgnuta koloni silika gela sa n -heksan:EtOAc: MeOH mješavine (8:1.8:0.2 do {{60}}:0:1) da bi se dobila jedinjenja 24 (10 0.0 mg) i 27 (214,1 mg). Frakcija AIS10 je podvrgnuta koloni silika gela sa smešama n-heksan:EtOAc:MeOH (7:2,7:0,3 do 0:0:1) da bi se izolovala jedinjenja 18 (5,0 mg) i 23 (16,7 mg). Frakcija AIS11 je razdvojena na 11 podfrakcija (AIS11-1-AIS11-11) pomoću FC sa RediSep-C18 (130 g, MeOH:HO, 1:1 do 4:1) kartridžom. Jedinjenje 22 (37,8 mg) je dobijeno iz frakcije AS11-4 prep-HPLC sa sfernom kolonom. Frakcija AIS12 je podvrgnuta koloni silika gela (o 5,2 x 28,0 cm) sa smešama HCl: aceton (od 4:1 do 3:2) da bi se dobilo jedinjenje 21 (188,0 mg). Konačno, frakcija AIS16 je odvojena pomoću Lichroprep RP-18 kolone (1,99 g, MeOH: H2O, 3:2 do 13:7) da bi se dobilo jedinjenje 3 (2,3 mg).

4.3.1. kaempferol-3-O- -D-200 -kumaroilgalaktozid (1

) Žućkasti prah; mp 244,5◦C; [ ] 22 D -59.1◦ (c 0.1, MeOH); UV (MeOH)λmax(logε) 207 nm (3,98), 315 nm (3,92); IR (ATR)νmax3458, 2922, 1650, 1588, 1364, 1260, 1175, 1076, 834 cm−1 ; 1H i13C NMR podaci, vidi tabelu1; HRMS (pozitivan način rada)m/z 595,1447 [M plus H]plus(izračunato za C30H27O13, 595.1452). 

4.3.2. kaempferol-3-O- -D-200 -feruloilglukozid (3) 

Žućkasti prah; mp 225.2◦C; [ ] 22 D -119.6◦ (c 0.1, MeOH); UV (MeOH)λmax(logε) 210 nm (4,17), 327 nm (3,94); IR (ATR)νmax3369, 1652, 1599, 1512, 1360, 1264, 1177, 1076, 841 cm−1 ; 1H i13C NMR podaci, vidi tabelu1; HRMS (negativni način rada)m/z 623.1375 [M − H]− (izračunato za C31H27O14, 623.1401).

4.3.3. kaempferol-3-0--D-2-galoilgalaktozid (11)

Žuti prah; HNMR (500 MHZ, DMSO-) 6 H NMR 8.06 (2H, d,J= 9.0 Hz, H{ {8}}H-6'), 7.02 (2H, S, H-3, H-'), 6.87 (2H, d, I=9 .5 H, H-, H-5, 6,39 (1H, S, H-8), 6,16 (1H s, H-6), 5,78 (1H, d, {{33 }}.0 Hz, H-1 posto ),5.27 (1H, t, =9.5 Hz H-2" 13C NMR (125 MHzDMSO-6) {{45 }}.1 (C-4), 165.4 (C-7), 165.4 (C-1), 161.2 (C-5), 160.1 (C{{59} }, 156.3 (C-2), 156.3(C-9), 145.5 (C-4"), 145.5 (C-6), 138.4 (C{{74} }/), 132,5 (C-3), 131,0 (C-2'), 131,0 (C-6), 120,7 (C1), 119,8 (C-2') , 115.2 (C-3'), 115.2 (C-5, 108.9 (C-3), 108.9 (C-7), 103.8 (C-10) , 98,8 (C-6)98,8 (C-1 posto), 93,7 (C-8), 76,0 (C-5), 72,7 (C-3) , 71,1 (C-2 posto), 68,2 (C-4"), 60,1 (C-6").

4.4. Ouantitativna analiza devet spojeva u sočivi hurma

HPLC analiza je izvedena na Waters HPLC sistemu koji se sastoji od 1525 pumpi i 2996 fotodiodnih niz detektora (Waters, Milford, MA, USA). UV talasna dužina je postavljena na 260 nm. Korištena je kolona PhenomenexLuna C18(2) (150 x 4,6 mm,5{15} um, Phenomenex, Torrance, SAD), a zapremina injekcije je bila 10 uL. Temperatura kolone je postavljena na 25 stepeni. Mobilna faza se sastojala od 0,02 posto trifluorosirćetne kiseline (TFA, Sigma-Aldrich St. Louis, MO, SAD) u vodi (A) i acetonitrila (B) sa brzinom protoka od 0,7 mL/min. Uslovi gradijenta su bili sljedeći: 0-30 min, 15-20 posto B; 30-45 min, 20-35 procenat B: 45-70 min35-100 procenat ; 70-80 min, 100 posto . Ekstrakt EtOH (10 mg) je rastvoren u rastvoru internog standarda od 10 ug/mL (1 mL). Provedena je validacija jednostavne metode kako bi se osigurala relevantnost razvijene metode i kvalitativni rezultati. Pet različitih rastvora svakog jedinjenja je analizirano da bi se napravila svaka kalibraciona kriva. Preciznost i tačnost unutar i između dana potvrđene su kroz tri ponavljanja u toku jednog dana i tri uzastopna dana. Svi uzorci su filtrirani kroz membranske filtere od 0,2 um.

4.5. DPPH i online HPLC-ABTS analiza

Sposobnost uzoraka da uklone DPPH radikale procijenjena je na osnovu prethodnog rada. Ukratko, DPPH ({{0}}.1 mM) u metanolu (100 uL) je miješan sa različitim koncentracijama uzoraka (100 uL) 1 h u mraku. Apsorbanca je zabeležena na 517 nm. Online HPLC-ABTS analiza je izvršena na osnovu prethodnog izveštaja sa modifikacijama. Mješoviti rastvor koji sadrži ABTS (0,08 mM) sa kalijum persulfatom (0,12 mM) je napravljen u ABTS reagens. Reagens je pohranjen na 4°C 12 h radi stabilizacije radikala. Svi uzorci su analizirani pomoću Agilent HPLC sistema. Uvjeti gradijenta bili su isti kao oni korišteni za kvantitativnu analizu. Eluat je poslat na a-funkciju i reagovao je sa ABTS reagensom u reakcionom kolutu na 40 stepeni. Kromatogram je vizualiziran na 254 nm (pozitivni pik), kao i na 734 nm (negativni pik), da bi se zabilježio pad aBIS radikala

5. Zaključci U zaključku, ova studija predstavlja fitokemijsko istraživanje zasnovano na izolaciji vođenoj biološkim testovima. Kao rezultat, novi flavonoid, kaempferol-3-0-BD-2"-kumaroilgalaktozid(1), i novo prirodno jedinjenje, kaempferol-3-0--D-2"-feruloilglukozid (2 ), izolovani su zajedno sa 25 ranije poznatih jedinjenja, uključujući četrnaest flavonoida, jedan jonon, dva kumarina, sedam triterpenoida i jedan acetofenon. Procijenjeni su antioksidativni efekti svih spojeva, a od njih je utvrđeno da devet flavonoida posjeduje aktivnosti. Urađena je simultana kvantitativna analiza kako bi se potvrdilo da listovi dragulja imaju antioksidativno djelovanje zbog ovih spojeva.

Dodatni materijali:Sljedeće su dostupne online na adresihttps://www.mdpi.com/article/10 .3390/plants10102032/s1, Slike S1–S9: 1H, 13C, COSY, HSQC, HMBC i ROESY NMR, UV, IR i HRMS spektri jedinjenja 1, Slike S10–S18: 1H, 13C, COSY, HSQC, HMBC, ROESY NMR , UV, IR i HRMS spektri jedinjenja 3, Slike S19–S20: 1H i 13C NMR spektri jedinjenja 11, Tabela S1: Kvantitativna analiza ostalih 18 jedinjenja.

Doprinosi autora:JK i J.-EP dali su jednak doprinos ovoj studiji; konceptualizacija, H.-CK i D.-SJ; metodologija i validacija, JK, J.-EP, J.-SL, J.-HL i HH; softver,JK i J.-SL; validacija, JK i HH; formalna analiza, JK i J.-EP; istraga, JK, J.-EP,J.-SL, J.-HL, HH, S.-HJ, H.-CK i D.-SJ; resursi, H.-CK i D.-SJ; kustos podataka, JK, J.-EP i J.-SL; pisanje – priprema originalnog nacrta, JK, J.-EP i J.-SL; pisanje—pregled i uređivanje, H.-CK i D.-SJ; vizualizacija, JK i J.-SL; nadzor, H.-CK i D.-SJ; projekatadministracija, H.-CK i D.-SJ; pribavljanje sredstava, S.-HJ, H.-CK i D.-SJ Svi autori imajupročitao i pristao na objavljenu verziju rukopisa.

Sukob interesa:Autori izjavljuju da nema sukoba interesa.

Reference

1. Xie, C.; Xie, Z.; Xu, X.; Yang, D. Persimmon (Diospyros kakiL.) listovi: Pregled tradicionalne upotrebe, fitohemije i farmakoloških svojstava.J. Ethnopharmacol.2015, 163, 229–240. [CrossRef]

2. Bei, W.; Zang, L.; Guo, J.; Peng, W.; Xu, A.; Dobro, DA; Hu, Y.; Wu, W.; Hu, D.; Zhu, X. Neuroprotektivni efekti standardizovanog ekstrakta fllavonoida izDiospyros kakilistovi.J. Ethnopharmacol.2009, 126, 134–142. [CrossRef] [PubMed]

3. Sakanaka, S.; Tachibana, Y.; Okada, Y. Priprema i antioksidativna svojstva ekstrakta čaja od listova japanskog persimona (kakinoha-cha).Food Chem.2005, 89, 569–575. [CrossRef] 4. Sa, YS; Kim, S.-J.; Choi, H.-S. Antikoagulantna frakcija iz listovaDiospyros kakiL. ima antitrombotičku aktivnost.Arch. Pharmacal Res.2005, 28, 667–67

4. [CrossRef] [PubMed] 

5. Zhang, K.; Zhang, Y.; Zhang, M.; Gu, L.; Liu, Z.; Jia, J.; Chen, X. Efekti fosfolipidnih kompleksa ukupnih flavonoida iz persimmona (Diospyros kakiL.) listova na eksperimentalnim pacovima s aterosklerozom.J. Ethnopharmacol.2016, 191, 245–253. [CrossRef] 

6. Kotani, M.; Matsumoto, M.; Fujita, A.; Higa, S.; Wang, W.; Suemura, M.; Kishimoto, T.; Tanaka, T. Ekstrakt lista persimmon i astragalin inhibiraju razvoj dermatitisa i povećanje IgE kod NC/Nga miševa.J. Allergy Clin. Immunol.2000, 106, 159–166. [CrossRef] 7. Thuong, PT; Lee, CH; Dao, TT; Nguyen, PH; Kim, WG; Lee, SJ; Oh, WK Triterpenoidi iz listovaDiospyros kaki(persimmon) i njihov inhibitorni učinak na protein tirozin fosfatazu 1B.J. Nat. Prod.2008, 71, 1775–1778. [CrossRef] 8. Matsuo, T.; Ito, S. Hemijska struktura kaki-tanina iz nezrelog ploda kakija (Diospyros kakiL.). Agric. Biol. Chem.1978, 42, 1637–1643. [CrossRef] 9. Bawazeer, S.; Rauf, A. In vivo antiinflamatorne, analgetske i sedativne studije ekstrakta i naftokinona izolovanog izDiospyros kaki(persimmon).ACS Omega2021, 6, 9852–9856. [CrossRef] 10. Yoshimura, M.; Mochizuki, A.; Amakura, Y. Identifikacija fenolnih sastojaka i inhibitorna aktivnost čaške persimmon i shiteita protiv proliferacije tumorskih ćelija.Chem. Pharm. Bik.2021, 69, 32–39. [CrossRef] 11. Wang, L.; Xu, ML; Rasmussen, SK; Wang, M.-H. Vomifoliol 9-O- -arabinofuranozil (1→ 6)- -D-glukopiranozid iz listovaDiospyros Kakistimuliše unos glukoze u HepG2 i 3T3-L1 ćelije.Ugljikohidrati. Res.2011, 346, 1212–1216. [CrossRef] [PubMed] 12. Hitaka, Y.; Nakano, A.; Tsukigawa, K.; Manabe, H.; Nakamura, H.; Nakano, D.; Kinjo, J.; Nohara, T.; Maeda, H. Karakterizacija estera karotenoidnih masnih kiselina iz kore draguljaDiospyros kaki. Chem. Pharm. Bik.2013, 61, 666–669. [CrossRef] 13. Simpson, DS; Oliver, PL ROS generacija u mikrogliji: Razumijevanje oksidativnog stresa i inflamacije u neurodegenerativnim bolestima.Antioksidansi2020, 9, 743. [CrossRef] [PubMed] 14. Liu, Z.; Ren, Z.; Zhang, J.; Chuang, C.-C.; Kandaswamy, E.; Zhou, T.; Zuo, L. Uloga ROS i nutritivnih antioksidansa u ljudskim bolestima.Front. Physiol.2018, 9, 477. [CrossRef] [PubMed] 15. Kwon, J.; Hwang, H.; Selvaraj, B.; Lee, JH; Park, W.; Ryu, SM; Lee, D.; Park, J.-S.; Kim, HS; Lee, JW Fenolni sastojci izolirani izSenna toraklice i njihov neuroprotektivni učinak protiv oksidativnog stresa izazvanog glutamatom u HT22 i R28 stanicama.Bioorganic Chem.2021, 114, 105112. [CrossRef] [PubMed] 16. Romussi, G.; Bignardi, G.; Pizza, C.; De Tommasi, N. Sastojci cupuliferae, XIII: Nove i revidirane strukture aciliranih flflavonoida izQuercus SuberL. Arch. Der Pharm.1991, 324, 519–524. [CrossRef] 17. Li, H.-Z.; Song, H.-J.; Li, H.-M.; Pan, Y.-Y.; Li, R.-T. Karakterizacija fenolnih jedinjenja izRhododendron alutaceum. Arch. Pharmacal Res.2012, 35, 1887–1893. [CrossRef] [PubMed] 18. Jung, M.; Choi, J.; Chae, H.-S.; Cho, JY; Kim, Y.-D.; Htwe, KM; Lee, W.-S.; Chin, Y.-W.; Kim, J.; Yoon, KD Flavonoidi izSymplocos racemosa. Molekule2015, 20, 358–365. [CrossRef] 19. Xu, J.; Wang, X.; Yue, J.; Sun, Y.; Zhang, X.; Zhao, Y. Polifenoli iz listova žira (Quercus liaotungensis) štite beta ćelije pankreasa i njihovu inhibitornu aktivnost -glukozidaza i protein tirozin fosfataza 1B.Molekule2018, 23, 2167. [CrossRef]