Karakterizacija sedamnaest komponenti u kultivisanim cistancima Herba iz pustinje Tarim putem HPLC-MS

［Sažetak］Cilj: Identificirati hromatografske komponente 60% metanolnog ekstrakta uCistanches deserticola Herbakultivisan u pustinji Tarim pomoću HPLC-MS.

Metoda: HPLC-MS analiza je izvedena na Agilent ZOＲBAX Eclipse Plus C18 koloni (6 mm × 250 mm, 5 μm). Mobilna faza je bila acetonitril-0. 1% vodeni rastvor mravlje kiseline gradijentnim eluiranjem pri brzini protoka od 1 mL·min-1, a talasna dužina detekcije bila je 254 nm. Temperatura kolone je postavljena na 25 stepeni, a zapremina injekcije je bila 10 μL. Ｒrezultat: Šesnaest hromatografskih pikova / sedamnaest komponenti je tačno identifikovano poređenjem vremena zadržavanja, molekulske težine i fragmentiranih jona jedinjenja koja smo izolovali i identifikovali. Ove hromatografske komponente određene su kao koniferin, demetil siringin, siringin, ehinakozid, cistanozid A, verbaskozid (tubulozid A), cistanozid B, izoverbaskozid, 2'-acetilcistanozid A, cistanozid C, izocistanozid C,2'-acetilbulozidskozid B, acetilbulodiskozid B. K i cistanozid J.

Zaključak: HPLC-MS metoda je pogodna za identifikaciju hromatografskih komponenti 60% metanolnog ekstrakta u Cistanches Herba. Ova studija će pružiti naučne dokaze za sveobuhvatnu analizu hemijskih sastojaka ove lekovite biljke.

［Ključne riječi］ Cistanches deserticolaHerba; Cistanche; HPLC-MS; metanolni ekstrakt

Cistanche deserticola YCMa

Cistanche deserticola, također poznat kao "pustinjski ginseng",je poznati tonik kineske medicine, koji je distribuiran u Unutrašnjoj Mongoliji, Ningxia, Gansu i Xinjiang u Kini [1].Ima efekat toniziranja bubrežnog janga, blagotvornog djelovanja na esenciju krvi, vlaže crijeva i vrši defekaciju. Obično se koristi u klinikama za liječenje muške impotencije, ženske neplodnosti, hladnoće u struku i kolenu, zastoja krvi, zatvoraitd. [2-3].Cistanche deserticola, što jeuključena u prvi dio Kineske farmakopeje (izdanje 2015.), je osušena mesnata stabljika Cistanche deserticola i Cistanche tubulosa (4). Naš istraživački tim već dugi niz godina provodi sistematsko i dubinsko istraživanje biljaka Cistanche.Hemijske komponente biljaka Cistanche su uglavnom feniletanoidni glikozidi, pored iridoida i njihovih glikozida, lignana i njihovih glikozida, glikozida benzil alkohola itd.[5]. Savremena farmakološka istraživanja pokazuju da fenil etanol glikozidi, glavne komponente roda, imaju neuroprotektivna, antioksidativna, zaštitna jetrena, antibakterijska, antivirusna, antitumorska, protuupalna i druga dejstva [6-11].

Pustinjski ginseng

U Kini, Cistanche deserticola je rasprostranjena u zapadnoj Unutrašnjoj Mongoliji, sjevernom Xinjiangu i Qaidam basenu u Qinghaiu, ali ne i u Tarimskom basenu u južnom Xinjiangu.. Krajem 1990-ih, kako bi zaštitili naftno polje Tazhong i kontrolirali pustinju, sjedište naftnog polja uvelo je veliki broj Haloxylon ammodendrona oko naftnog polja Tazhong i na obje strane pustinjskog autoputa i inokuliralo Haloxylon ammodendron sa cistanche, koji je postojao više od 10 godina. Zbog tople klime u južnom Xinjiangu i dobrih uslova za navodnjavanje kap po kap u bazi ulja, prinos cistanche deserticola je vrlo visok, a prinos svježe cistanche deserticola po mu dostiže više od 500 kg [8]. Mnoge kemijske komponente u Cistanche deserticola proizvele su veliki broj izomera zbog različitih položaja veza supstituenata. To donosi velike poteškoće u identifikaciji hromatografskog vrha ovog ljekovitog materijala. Teško je precizno identificirati komponente hromatografskog pika ako se oslanja samo na LC-MS bez monomernih spojeva kao kontrole. Stoga, postoji nekoliko literaturnih izvještaja o ovom radu u ranoj fazi. Autor je izolovao mnoge monomerne spojeve [9-11] iz Cistanche deserticola uzgajane u pustinji Tazhong u ranoj fazi. Kroz ova monomerna jedinjenja dobijena u ranoj fazi, HPLC parcijalni hromatografski pikovi 60% metanolnog ekstrakta Cistanche deserticola su tačno identifikovani. Ovo ne samo da će izbjeći ponovnu identifikaciju nekih poznatih spojeva u hemijskim sastojcima Cistanche deserticola, već će također pružiti neke reference za dalja istraživanja o kontroli kvaliteta medicinskog materijala. U ovom radu, HPLC-MS je identificiralo 17 komponenti 6% metanolnog ekstrakta Cistanche deserticola.

Cistanche deserticola kriška

Kliknite ovdje da pogledate Cistanche proizvode

【Zatražite više】 Email: xue122522@foxmail.com / WhatsApp: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1.Materijal

Instrument za nuklearnu magnetnu rezonancu Inova-500 (Varian, SAD); 6320IonTrap LC-MS maseni spektrometar, EclipseXDB-C18 kolona (4,6 mm × 250 mm, 5 μm) (Agilent, SAD); QUINTIX313-1CN elektronska vaga tipa 1/10000 (Sedaris Division); KQ-500DV ultrazvučni čistač (Jiangsu Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); KMUP - Ⅰ Trace Analytical Ultra Pure Water Generation System (Chengdu Haochun Instrument Equipment Co., Ltd.).

Svih 39 kontrolnih supstanci korištenih u ovom eksperimentu su izolovane iz pustinjski uzgojenih Cistanche deserticola u Tazhongu od strane autora u ranoj fazi, a njihove strukture su određene NMR i drugim tehnikama spektroskopije. Strukture 39 kontrolnih uzoraka su identificirane kao Cistanche deserticoside J, Cistanche deserticoside K, Cistanche deserticoside L, Cistanche deserticoside M, Cistanche deserticoside N, epimeridinosideA, Isocistancheside C, angiocyanin B, Cistanche heterophyllin, Isocornicin, Cistanche deserticoside D, Cistanche deserticoside2, Cistanche deserticoside D, acetil Cistanche deserticoside A, 2' - acetil Cistanche deserticoside A, Cistanche deserticola B, Cistanche deserticola A, Echinoside A, Cistanche deserticola glicoside E, Salidroside, 6'- acetyl salidroside, saliside B, syringin, demetil siringin, Echinoside A, Cistanche deserticola glikozid E, Salidroside, 6 '- acetyl salidroside, saliside B, syringin, demetil siringin, {2E, juniperin, {2E, 1} 7-dimetil-8-hidroksiktadien-1-O- - D-glukozid, (+) - siringin, (+) - siringin-4 '- O- - D-glukopiranozid, (+) - izoeukominA, eukomminA, {+) - lukozid D, (+) 0} - rozin larvicid-4 '- O- - D-glukozid, larvicid-4-O- - D-glukozid- - D glukopiranozid, hesperidin A, područje sa strane A, 6-deoksikatapol. Čistoća svih gore navedenih referentnih supstanci je veća od 98,0%. Acetonitril je hromatografski čist (DikmaPure, SAD), voda je ultra čista voda, a ostali reagensi koji se koriste u procesu testiranja su analitički čisti reagensi, proizvedeni u Pekinškoj hemijskoj fabrici.

Medicinski materijal korišten u ovom eksperimentu, Cistanche deserticola, sakupljen je iz pustinjske oblasti Tazhong, Xinjiang, u novembru 2010. godine. Identifikovao ga je profesor Tu Pengfei sa Farmaceutskog fakulteta Univerziteta u Pekingu kao osušenu mesnatu stabljiku biljke Leobaceae Cistanche deserticola. Uzorak je pohranjen u Modernom istraživačkom centru tradicionalne kineske medicine Univerziteta u Pekingu (broj uzorka: CD201011).

Cistanche deserticola kriška

2.Metode i rezultati

2.1 Priprema referentnog rastvora

Uzmite oko 1 mg od svakog od 39 kontrolnih uzoraka dobijenih od Cistanche deserticola u ranoj fazi, precizno ih izmjerite, stavite u volumetrijsku tikvicu od 5 mL, otopite ih u metanolu i dodijelite vagu, a zatim uzmite jednu kontrolnu otopinu.

2.2 Priprema rastvora za ispitivanje

Pozivajući se na Kinesku farmakopeju, izdanje 2015, uzmite oko 1g praha proizvoda (kroz četvrto sito), precizno izvažite, stavite u smeđu bocu od 100mL, precizno dodajte 50mL 60% metanola, nabijete, dobro promućkajte, izvažite masu, potopite u ultrasoničnu obradu, potopite u ultrasoničnu obradu. ponovo masu, dodati 50% metanola da se dobije redukovanu masu, dobro promućkati, odstoji, uzmi supernatant i upotrijebi 0,45 μM mikroporoznu membransku filtraciju, uzmi kontinuirani filtrat da dobiješ testnu otopinu.

2.3 Kromatografski uslovi

AgilentEclipse XDB-C18 hromatografska kolona (4,6 mm × 250 mm, 5 μm), talasna dužina detekcije 254 nm, temperatura kolone 25 stepeni; Korištenje acetonitrila (A) - 0.1% vodenog rastvora mravlje kiseline (B) kao mobilne faze, gradijent elucije (0 - 20min, 5% - 15% A; 20 - 50min, 15% - 30% A; 50 - 60min, 30% - 501}% A; A); Brzina protoka: 1,0 mL · min-1, zapremina ubrizgavanja: 10 μ L.

2.4 Uslovi masenog spektra

Kapilarna temperatura 350 stepeni; Kapilarski napon 3500V; Protok plina u omotaču (azota) 12.0L · min-1; Pritisak pomoćnog gasa (azota) 206,8kPa; Puni opseg skeniranja masene spektrometrije je m/z 50~1000; Udarni plin helijum, energija sudara se automatski bira tokom testa; Sakupite 1 iglu za svaki mod pozitivnih i negativnih jona.

2.5 Ispitivanje referentne supstance

39 referentnih rastvora pripremljenih prema 2.1 ispitano je pod 2,3 hromatografskim uslovima i 2,4 masenim spektrometrijskim uslovima, a zabeleženo je njihovo retencijsko vreme i relativna molekulska težina (Tabela 1).

2.6 Određivanje test rastvora

Uzmite medicinski materijal Cistanche deserticola sakupljen iz pustinjskog područja Tazhong, Xinjiang, i pripremite otopinu za ispitivanje prema metodi opisanoj u 2.2. Zatim izvršite određivanje prema hromatografskim uslovima opisanim u 2.3 i uslovima masene spektrometrije opisanim u 2.4, i odredite njegov HPLC hromatogram i masenu spektrometriju u modovima pozitivnih i negativnih jona (Slike 1-3).

smokva. 1 HPLC hromatogram 60% metanolnog ekstrakta Cistanches Herba

smokva. 2 Pozitivan TIC MS hromatogram 60% metanolnog ekstrakta Cistanches Herba

smokva. 3 Negativan TIC MS hromatogram 60% metanolnog ekstrakta Cistanches Herba

2.7 Identifikacija HPLC hromatograma medicinskih materijala

Pod istim uslovima (2,3 hromatografski uslovi i 2,4 uslovi masene spektrometrije), komponente su identifikovane upoređivanjem vremena zadržavanja i relativne molekulske težine testnog uzorka i kontrolnog uzorka. Specifičan proces identifikacije vrha hromatograma testnog uzorka (slika 1) je sljedeći.

2.7.1 Identifikacija hromatografskog pika 1

Vrijeme retencije hromatografskog pika 1 je 16,67 minuta. U režimu pozitivnog jona, pik eksimer jona m/z365 je dat kao [M+Na]+, dok je u režimu negativnih jona dat pik eksimer jona m/z387 [M+COOH] -. Relativna molekulska težina pika 1 je određena na 342. Također je dat fragment jona m/z179, koji potiče od gubitka 1 molekula glukoze, 163 D, zbog cijepanja glikozidne veze. Prema vremenu zadržavanja i relativnoj molekularnoj težini referentne supstance, hromatografski pik 1 je identifikovan kao koniferin.

2.7.2 Identifikacija hromatografskog pika 2

Vrijeme retencije hromatografskog pika 2 je 17,36 min. U režimu negativnih jona, dati su pikovi eksimer iona m/z357 [M – H] -, 393 [M+Cl] -, a relativna molekulska težina pika 2 je određena na 358. U isto vrijeme, fragment jona m/z195 je izveden iz gubitka 1 molekula Daco na strani glucosa na 163 molekulu. razbijanje. Kromatografski pik 2 identificiran je kao demetilsiringin prema vremenu zadržavanja i relativnoj molekulskoj težini referentne supstance.

2.7.3 Identifikacija hromatografskog pika 3

Vrijeme retencije hromatografskog pika 3 je 19,04 min, pik ekscimer iona m/z395 [M+Na] je dat u modu pozitivnih jona, a pik ekscimer iona m/z417 [M+HCOO] - je dat u režimu negativnih jona, a relativna molekulska masa u trenutku kada je dio 37 određen za pik 37 je isto. m/z209 je izvedeno iz gubitka 1 molekula glukoze, 163 Da, zbog prekida glikozidne veze. Kromatografski pik 3 identificiran je kao siringin prema vremenu zadržavanja i relativnoj molekulskoj težini referentne supstance.

2.7.4 Identifikacija hromatografskog pika 4

Vrijeme retencije hromatografskog pika 4 je 27,66 min. Pik eksimer jona m/z804 [M+NH4] dat je u modu pozitivnih jona, a pik eksimer jona m/z785 [M–H] - u modu negativnih jona. Relativna molekulska težina pika 4 je određena na 786. U isto vrijeme, fragment jona m/z623 je izveden iz gubitka estarske veze 1 molekula kofeina, 163 Da. U kombinaciji sa vremenom zadržavanja i relativnom molekulskom težinom referentne supstance, hromatografski pik 4 identifikovan je kao ehinacea.

2.7.5 Identifikacija hromatografskog pika 5

Vrijeme retencije hromatografskog pika 5 je 31,48 min, pik ekscimer iona m/z818 [M+NH4 je dat u modu pozitivnih jona, a pik ekscimer iona m/z799 [M–H] - je dat u režimu negativnih jona, a relativna molekulska masa u trenutku pika 80 određena je za isto vrijeme fragmenta 80. m/z637 je izveden iz gubitka esterske veze 1 molekula kofeina, 163Da. Kombinacijom vremena retencije i relativne molekularne težine referentne supstance, potvrđeno je da je kromatografski pik 5 cistanche glikozid A.

Tabela 1 Molekularna težina i vrijeme retencije (tＲ) 39 standardnih jedinjenja

2.7.6 Identifikacija hromatografskog pika 6

Vrijeme retencije hromatografskog pika 6 je 34,17 min. Dva pika eksimer jona m/z846642 [M+NH4] + data su u modu pozitivnih jona, a dva pika eksimer jona m/z827623 [M–H] - su takođe data u modu negativnih jona. Nagađa se da vrh 6 može sadržavati dva spoja s relativnom molekulskom težinom od 828624. U isto vrijeme, fragment jona m/z665461 je izveden iz gubitka esterske veze 1 molekula kofeina, 163 Da, a ion fragmenta je de m/zvedster raspadanjem bod. Ova dva jedinjenja su izolovana i kombinovana sa vremenom zadržavanja i relativnom molekulskom težinom referentne supstance; kromatografski pik 6 bio je mješavina cimicifugarina i antocijanina A.

2.7.7 Identifikacija hromatografskog pika 7

Vrijeme retencije hromatografskog pika 7 je 35,34 min. Pik eksimer iona m/z832 [M+NH4]+, 837 [M+Na]+ dat je u modu pozitivnih jona, a pik ekscimer iona m/z813 [M–H] - je dat u modu negativnih jona, a relativna molekulska težina pika 7 je 814. gubitak 1 molekula ferulinske kiseline, 177Da. U kombinaciji s vremenom zadržavanja i relativnom molekulskom težinom referentne supstance, kromatografski pik 7 identificiran je kao cistanche glikozid B.

2.7.8 Identifikacija hromatografskog pika 8

Vrijeme retencije hromatografskog pika 8 je 36,17 min, pik ekscimer iona m/z647 [M+Na] je dat u modu pozitivnih jona, a pik ekscimer iona m/z623 [M–H] - je dat u režimu negativnih jona, a relativna molekulska težina pika 62 je određena za isto vrijeme fragmenta 62. dat je m/z461, koji potiče od kidanja estarske veze i gubitka 1 molekula kofeinske grupe, 163 Da. U kombinaciji sa vremenom zadržavanja i relativnom molekulskom težinom referentne supstance, hromatografski pik 8 je identifikovan kao heterocenozid.

2.7.9 Identifikacija hromatografskog pika 9

Vrijeme retencije hromatografskog pika 9 je 38,20 minuta. Pikovi eksimer jona m/z860 [M+NH4]+, 865 [M+Na] dati su u modu pozitivnih jona, a pikovi eksimer jona m/z841 [M–H] -, 877 [M+Cl] - dati su u modu negativnih jona. Relativna molekulska težina pika 9 je određena na 842. U isto vrijeme, fragment jona m/z679636 je izveden iz gubitka estarske veze 1 molekula kofeina, 163 Da, i 1 molekula acetila, 43 Da. Vrijeme zadržavanja i relativna molekulska težina referentne supstance su konzistentni, a identifikacijski pik 9 je 2- 2'-acetil cistanche glikozid A.

2.7.10 Identifikacija bojetographic strak 10

Vrijeme retencije hromatografskog pika 10 je 39,04 min. Pik eksimer jona m/z656 [M+NH4]+, 661 [M+Na] dat je u modu pozitivnih jona, a pik eksimer jona m/z637 [M–H] -, 673 [M+Cl] - u režimu negativnih jona. Relativna molekulska težina pika 10 je određena na 638. U isto vrijeme, fragment jona m/z475 je izveden iz gubitka estarske veze 1 molekula kofeina, 163 Da. Vrijeme zadržavanja i relativna molekulska težina referentne supstance su konzistentni, a identifikacijski pik 10 je Cistanche C.

2.7.11 Identifikacija hromatografskog pika 11

Vrijeme retencije hromatografskog pika 11 je 40,82 min. Pik eksimer jona m/z661 [M+Na]+, 677 [M+K + je dat u modu pozitivnih jona, a pik eksimer jona m/z637 [M–H] -, 673 [M+Cl] - u režimu negativnih jona. Može se utvrditi da je relativna molekulska težina pika 11 638. U isto vrijeme, fragment jona m/z475 je izveden iz gubitka estarske veze 1 molekula kofeina, 163 Da. Kombinacijom vremena zadržavanja i relativne molekulske težine referentne supstance, hromatografski pik 11 identifikovan je kao izocistanche glikozid C.

2.7.12 Identifikacija hromatografskog pika 12

Vrijeme retencije hromatografskog pika 12 je 41,48 min. Pik eksimer jona m/z684 [M+NH4]+, 689 [M+Na + je dat u modu pozitivnih jona, a pik eksimer jona m/z665 [M–H] - u režimu negativnih jona. Može se utvrditi da je relativna molekulska težina pika 12 666. Istovremeno je pokazano da fragment jona m/z503460 dolazi od gubitka estarske veze 1 molekula kofeina, 163 Da, i 1 molekula acetila, 43 Da. Prema vremenu zadržavanja i relativnoj molekularnoj težini referentne supstance, hromatografski pik 12 je identifikovan kao a2'-acetilil celiaozid.

Eksperiment s cistanche deserticola

2.7.13 Identifikacija hromatografskog pika 13

Vrijeme zadržavanja kromatografskog pika 13 je 44,29 min, pik eksimer iona m/z689 [M+Na] je dat u modu pozitivnih jona, a pik eksimer iona m/z665 [M–H] - je dat u režimu negativnih jona, a relativna molekulska težina tog iona u istom vremenu je prikazana u tom fragmentu 6616. m/z503460 dolazi od gubitka esterske veze od gubitka 1 molekula kofeina, 163 Da, i 1 molekula acetila, 43 Da. U kombinaciji s vremenom zadržavanja i relativnom molekulskom težinom referentne supstance, kromatografski pik 13 identificiran je kao antocijanin B.

2.7.14 Identifikacija hromatografskog pika 14

Vrijeme retencije hromatografskog pika 14 je 46,67 min. Pik eksimer jona m/z675 [M+Na] dat je u modu pozitivnih jona, a pik eksimer jona m/z651 [M–H] - u modu negativnih jona. Relativna molekulska težina pika 14 je 652. U isto vrijeme, fragment jona m/z475 je izveden iz gubitka estarske veze 1 molekula grupe ferulinske kiseline, 177Da. U kombinaciji s vremenom zadržavanja i relativnom molekulskom težinom referentne supstance, kromatografski pik 14 identificiran je kao epimeridinozid A.

2.7.15 Identifikacija hromatografskog pika 15

Vrijeme retencije hromatografskog pika 15 je 49,90 min. Pik eksimer jona m/z698 [M+NH4]+, 703 [M+Na + je dat u modu pozitivnih jona, a pik eksimer jona m/z679 [M–H] -, 715 [M+Cl] - u režimu negativnih jona. Relativna molekulska težina pika 15 je 680. U isto vrijeme, fragment jona m/z517474 je izveden iz gubitka estarske veze 1 molekula kofeina, 163 Da, i 1 molekula acetila, 43 Da. Kromatografski pik 15 identificiran je kao cistanche glikozid K na osnovu vremena zadržavanja i relativne molekularne težine referentne supstance.

2.7.16 Identifikacija hromatografskog pika 16

Vrijeme retencije hromatografskog pika 16 je 55,36 minuta. U režimu pozitivnih jona dat je pik eksimer jona m/z717 [M+N, dok je u režimu negativnog jona dat pikovi eksimer jona m/z693 [M–H] -, 729 [M+Cl] -, što rezultira relativnom molekulskom težinom od 694 za pik 16, u istom vremenskom trenutku je prikazan taj fragment 16. m/z517474 dolazi od gubitka esterske veze 1 molekula grupe ferulne kiseline, 177 Da, i 1 molekula acetil grupe, 43 Da. U kombinaciji sa vremenom zadržavanja i relativnom molekulskom težinom referentne supstance, kromatografski pik 16 je identificiran kao cistanche glikozid J. Kromatografski pikovi 60% metanolnog ekstrakta Cistanche deserticola identificirani su HPLC-MS u kombinaciji s relativnom molekulskom masom, vremenom zadržavanja i odvojenim referentnim ionom odvojene supstance. Rezultati su pokazali da je 17 komponenti od 16 hromatografskih pikova tačno identifikovano (tabela 2).

Tabela 2: Identifikovani hromatografski pikovi Cistanches Herba i referentnih standardnih jedinjenja

3  . Diskusija

3.1 Izbor metode pripreme ispitnog artikla

Glavna svrha ove studije je da se identifikuju HPLC vrhovi Cistanche deserticola. Stoga se izbor rastvarača za ekstrakciju i metode ekstrakcije zasniva na sposobnosti da se dobije više HPLC pikova. Istraživački tim je proveo dugoročna istraživanja o cistanche deserticola i uradio mnogo na kvalitetnoj analizi. U ovom radu otapalo za ekstrakciju i metoda ekstrakcije Cistanche deserticola također su odabrani na osnovu prethodnog analitičkog rada istraživačke grupe i Kineske farmakopeje (izdanje 2015.). Konačno, kao metoda ekstrakcije odabrana je ultrazvučna ekstrakcija rastvaračem 60% metanola u trajanju od 40 minuta.

3.2 HPLC-MS izbor uslova

Odabir hromatografske kolone u ovom radu zasniva se na analizi kvaliteta Cistanche deserticola u ranoj fazi istraživačke grupe i ispitivanju AgilentZORBAXEclipsePlusC18 (4,6mm × 250mm,5 μm), DionexC18(4,6mm × 250mm,5 μmoC1mm,5 μmo60mm,5 μmo60mm), The m) Kromatografska kolona, na kraju odaberite AgilentZORBAXEclipsePlusC18 hromatografska kolona (4,6mm × 250mm,5 μm) Ima dobar efekat razdvajanja na Cistanche deserticola; 39 referentnih supstanci uključuju feniletanoid, lignane i fenilpropanoid, tako da je talasna dužina detekcije 254 nm; Istovremeno, istraženi su efekti mobilne faze kao što su metanol-voda, acetonitril-voda, metanol-0,1% vode fosforne kiseline, acetonitril-0,1% vode mravlje kiseline na hromatografsko odvajanje i detekciju masenom spektrometrijom, a kao mobilnu fazu mravlje kiseline konačno je odabran acetonitril-0,1% vode.

3.3 Sažetak

Metoda uspostavljena u ovoj studiji precizno je identificirala 17 komponenti iz 16 kromatografskih pikova 60% metanolaekstraktofCistanche deserticola.

Rezultati istraživanja ne samo da imaju određenu referentnu vrijednost za dalju analizu kvaliteta medicinskog materijala, već i mogu izbjeći neke ponavljajuće radove na identifikaciji strukture poznatih spojeva medicinskog materijala. Međutim, općenito, postoji relativno malo identificiranih kromatografskih pikova, a mnogi kromatografski vrhovi nisu identificirani jer nisu pripisani referentnoj tvari. Većina identificiranih komponenti su feniletanoidni glikozidi, dok su lignani rijetki. To može biti zato što je metoda ekstrakcije koja se spominje u izdanju Kineske farmakopeje iz 2015. uglavnom usmjerena na feniletanoidne glikozide, ili zato što je sadržaj ehinakozida i spojeva sličnih koliformima u ekstraktu ovog ljekovitog materijala previsok, što otežava otkrivanje drugih spojeva s malim sadržajem. Konkretne razloge treba dodatno razjasniti.

[Reference]

[1] Redakcija Flora of China. Flora Kine [M]. Peking: Science Press, 1990: 86

[2] Yang Junshan. Pustinjski ginseng -- Cistanche deserticola [J]. Kineski časopis za farmaciju, 2011, 46( 12) : 881．

[3] Tu Pengfei, Jiang Yong, Guo Yuhai, et al. Istraživanje Cistanche deserticola i njenog industrijskog razvoja[J]. Kineski časopis za farmaciju, 2011, 46 (12): 882-887

[4]Nacionalna farmakopejska komisija. Farmakopeja Narodne Republike Kine. Dio I [M]Peking: China Pharmaceutical Science and Technology Press, 2015: 135

[5] JIANG Y, TU PF. Analiza hemijskih sastojaka u vrstama Cistanche ［J］． J Chromatogr A, 2009, 1216 (11) : 1970-1979.

[6] PAN J,YUAN CS,LIN CJ,et al. Farmakološke aktivnosti i mehanizmi prirodnih fenilpropanoidnih glikozida［J］． Pharmazie, 2003, 58(11): 767-775.

[7] FU GM, PANG HH, Wong Y. Prirodni feniletanoidni glikozidi: potencijalni vodi za nove terapeutike［J］． Curr Med Chem, 2008, 15 ( 25 ) : 2592-2613.

[8] Rhode Mei, Long Mei, Du Wenjing, et al. Mehanizam anti-osteoporoznog efekta ekstrakta Cistanche deserticola na miševe M KOOPG ［ J ］. Kineski eksperiment Journal of Prescriptions, 2016, 22 (10): 138-142

[9] Ma Hui, Yin Ruoxi, Guo Min, et al. Utjecaj polisaharida Cistanche deserticola na starenje izazvano D-galaktozom. Učinak ekspresije CREB kod miševa starog modela ［ J］. Chinese Experimental Prescriptions Journal, 2014, 20 (20): 137-141

[10] Tao Yicun, Li Jianying, Xu Yonghua, et al. Efekti feniletanozida Cistanche deserticola na pacove: Prevencija i liječenje plućnog edema na velikim visinama ［ J ］. Kineski časopis za eksperimentalne recepte, 2014, 20(15): 134-138.

[11] Zhou Haitao, Cao Jianmin, Lin Qiang. Cistanche deserticola o iscrpljenoj plivačkoj sposobnosti pacova i antioksidativnom kapacitetu miokarda mitohondrija ［ J］. Kineska eksperimentalna formula Journal of Science, 2012, 18 (6): 229-233

[12] NAN ZD,ZHAO MB,ZENG KW,et al. Protuupalni iridoidi iz stabljika Cistanche deserticola uzgajanih u pustinji Tarim ［J］． Chin J Nat Med, 2016, 14(1): 61-65.

[13] NAN ZD,ZENG KW,SHI SP,et al. Feniletanoidni glikozidi s protuupalnim djelovanjem iz stabljika Cistanche deserticola uzgojenih u pustinji Tarim［J］． Fitoterapia, 2013, 89: 167-174.

[14] Nan Zedong, Zhao Mingbo, Jiang Yong, et al. Hemija pustinjske cistanche uzgajane u Tazhongu: Studija sastava ［ J ］. Kineski časopis tradicionalne kineske medicine, 2013, 38 (16):2665-2670.

[15] Nan Zedong, Zhao Mingbo, Jiang Yong, et al.Lignans [J]. Kineski časopis tradicionalne kineske medicine, 2015, 40 (3):463-468.