Procjena karakteristika različitih formulacija kreme protiv starenja iz ekstrakta karotenoida bakterijskog simbionta Virgibacillus Salarius soja

Ključne riječi:krema;cistanche;antioksidansi; krema za sunčanje; bakterijski simbiont

Kliknite ovdje da saznate više o Cistancheu protiv starenja

1. Uvod

Prerano starenjeje degenerativna bolest koju karakteriše suva, naborana, gruba kožai crne mrlje [1]. Dva faktora pokreću prerano starenje, odnosno unutrašnji faktori kao što sukao što su stres, izdržljivost, hormonalne promjene i zdravlje, kao i vanjski faktori, uključujućiultraljubičastih zraka i slobodnih radikala. Slobodni radikali su molekuli koji sadrže kisikatomski raspored je nestabilan i stoga prolazi kroz lančane reakcije koje se mogu dogoditi utijela i dovode do kontinuiranog oštećenja [2]. 

Slobodni radikali su vrlo reaktivne i opasne tvari koje uzrokuju oštećenjatkiva tijela što može dovesti do razvoja raznih bolesti u starosti [3]. Međutim, slobodne radikale je moguće pobijediti upotrebom antioksidansa [4] koji se zaustavljajulančane reakcije koje pokreću slobodni radikali doniranjem elektrona nestabilnim molekulima.Primjeri antioksidativnih spojeva uključuju cistanche, vitamin C i vitamin E [5].

cistanche su spojevi za koje je dokazano da su potencijalni antioksidansi [6–10] kako sadržedugolančano jedinjenje izoprena s konjugiranom dvostrukom vezom [5,7,11]. Konjugiranidvostruka veza uklanja singletni kisik i deaktivira druge slobodne radikale koji se javljaju kroz njihproces prijenosa elektrona [12,13]. Nakon toga, spojevi koji su konjugirani dvostrukoveze se mogu naći u kopnenim i morskim organizmima. Jedinjenja iz moraorganizmi imaju jedinstvene karakteristike i nekoliko otkrića o novim bioaktivnim spojevimaza antibiotike, protiv raka, farmaceutske proizvode, kozmetiku, enzime i pigmentedobiveni su iz mnogih ekosistema koralja, posebno mekih koralja.

Masovno korištenje mekih koralja ne bi trebalo koristiti, jer će uzrokovati štetuekosistema. Bakterijski simbiont povezan s mekim koraljima mogao bi postati moćanalternativa koja proizvodi cistanche kao izvor antioksidansa [14,15]. CosmeticPrilikom upotrebe potrebne su formulacije koje se mogu primijeniti bez napora i udobnokarotenoidna jedinjenja. Dakle, kozmetička formulacija koja je poželjna je u oblikukreme. Krema je odabrani polučvrsti preparat koji se lako ravnomjerno razmazuje po koži,nije ljepljiv i lako se čisti tako da je ugodan za upotrebu od strane potrošača. Upotrebasymbiont bakterije kao izvor kozmetičkih sirovina najnovije je otkrićetreba razviti.

2.1. Materijali i alati

Bakterijski simbiontV. platesoj 19.PP.Sc1.6 izolovan izSinularijasp. origiporeklom sa ostrva Panjang, Jepara, Centralna Java, Indonezija; specifična tačka je na koordinatamaod „6◦340 37.3500 S", "110◦370 52.0100 E". Potrebni materijali uključuju metanol (analitičkirazred) kupljen od Mercka (Darmstadt, Njemačka);

2,2-difenil-1-pikrilhidrazil

(DPPH) iz Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, SAD). Ostali sastojci koji se koriste u formulacijama kremakao što su stearinska kiselina, glicerin, Na tetraborat, trietanolamin (TEA), lanolin,suncokretovo ulje, pčelinji vosak, cetil alkohol, span 80, glicerol monostearat i Tween 80 sukupljen od Mercka (Darmstadt, Njemačka). Korišteni instrumenti su UV-visShimadzu 1240 spektrofotometar (Kjoto, Japan), Brookfield LVDV-I Prime viskozimetar(Toronto, ON, Kanada), pH metar digitalni USB Phs 3c 3d Rohs, centrifuga IEC Centra MP4R(Thermo Electron, Waltham, MA, SAD) i orbitalni šejker Daihan SHO 2D ​​(Wonju, Koreja).

2.2. Izolacija bakterijskog simbionta Sinularia sp.

TheSilunariasp. tkiva su stavljena u sterilne petrijeve posude koje su djelimično napunjenesterilisana morska voda. Odrezane su površine mekih koraljnih tkiva, i to samo iznutrauzorak je korišten za izolaciju mikroba. Za izolaciju bakterija, serija razblaženjasprovedena je za sve uzorke. Iz svake petrijeve posude sakupljeno je 10 mL uzorkasterilnu pipetu i staviti u tikvicu koja sadrži 90 mL sterilisane morske vode da se dobije10−1 razblaživanje. Od 10−1 razrjeđenja, 1 mL je premješten u epruvetu koja sadrži 9 mL sterilnogmorske vode za dobijanje 10−2 razblaživanje. Ovaj proces razblaživanja se ponavlja do 10−5 razblaživanjeje dobijeno. Uzorak (1 mL) svake serije razblaženja je sakupljen i stavljen u sterilnu posudupetrijeva posuda koja sadrži Zobell 2216E agar medij (Himedia, Mumbai, Indija) za bakterijskeizolacija. Zatim su petrijeve zdjelice inkubirane na 30◦C 2 dana. Bakterija žute bojekolonije koje rastu na površini agar podloge razdvojene su metodom traka dodobiti čiste bakterijske sojeve.

2.3. Bakterijska simbiontska kultura

BakterijeV. salariussoj 19.PP.Sc1.6 [16] je inokuliran prenošenjem 1 mLizolat u 2 L sterilnog Zobell Marine Brotha 2216 (Himedia, Mumbai, Indija). Bilo jezatim stavite na šejker na 100 o/min na 27◦C dok boja medija ne postane žuta (±7 dana).Nakon toga, simbiotske bakterije koje su proizvele cistanche su izolovane icentrifugirano 15 min na 6000 o/min, nakon čega su se pelete odvojile i zatim filtriralekoristeći Whatman filter papir br. 1 (Maidstone, UK).

2.4. Ekstrakcija karotenoida

Ekstrakcija cistanche metodom brze maceracije vrši se u mrakusoba. Metanol (analitičke čistoće) nabavljen od Mercka (Darmstadt, Njemačka).dodano u kulturu peleta i zatim centrifugirano 10 minuta na 6000 o/min. Nakon toga, adobijen je filtrat koji sadrži cistanche i pelete u obliku bakterijske mase,filtrira sa Wahtman No 1 filter papirom, ispari i osuši pomoću N plina [14,15].

2.5. Formulacije kreme

Formula je koristila tri formulacije sa različitim vrstama krema, odnosno vs.au, i wo [16–18]. Formula koja se koristi je kao što je prikazano u tabeli1.

Tabela 1.Kremaste formule ekstrakta karotenoidaV. platesoj 19.PP.Sc1.6.

2.5.1. Formula 1: krema vs

U posudi smo otopili stearinsku kiselinu i glicerin. Na tetraborat i TEA su bilirastvoriti u malo vode, a zatim staviti u rastvor stearinske kiseline i glicerina. Zatim smo promešalii homogenizirati, pa dodati malo vode da rezultati budu dobri. Poslednji korak je biododati ekstrakt karotenoida i miješati dok se ne ujednači.2.5.2. Formula 2: Krema vlPrvo, glicerol monostearat i cetil alkohol su otopljeni u šolji 1. Suncokret iTween 80 je pomešan u šolju 2. Nakon toga smo mešavinu iz šolje 2 stavili u šolju 1. Ovomiješano do homogene smjese sa malo vruće vode. Na kraju smo dodali karotenoidekstrakt i mješati dok ne postane homogena.

2.5.3. Formula 3: Cream wo

2.6. Cream Evaluation

Procijenjene su karakteristike tri formulacije kreme; početnu evaluacijuizvršeno je organoleptičko ispitivanje. U organoleptičkim testovima opažanja uključuju promjene uboja, miris (užeglost) i osjećaj. U organoleptičkom testu kao ispitanici korišćeno je 25 osoba,koji se sastoji od 15 obučenih i 10 neobučenih ljudi. Sljedeći test je bio homogenost,što se postiže nanošenjem kreme na staklene ploče i praćenjem ujednačenostiboja, bez obzira da li je ujednačena ili ne. Nakon toga, u pH testu, krema je taloženau staklenu čašu, a zatim je mjerenje pH urađeno pomoću pH metra koji je imaoprethodno kalibriran sa Dappar standardom (pH 4 i pH 7). Snaga raspršivanjatest je obavljen na prozirnom staklu postavljenom na milimetarski papir i 0.5 g kreme

staviti na staklo, a zatim prekriti drugom prozirnom čašom i ostaviti da odstoji±5 s dodobiti prečnik formirane površine. Zatim, različite težine od 50, 100, 150, 200, 250, 300,350, 400 i 450 g stavljeno je na prozirno staklo i formirano je prečnik površineje primećeno. U specifikacijama je navedeno da se krema treba lako i ravnomjerno razmazati.

U međuvremenu, test viskoznosti kreme određen je pomoću Brookfield LVDV-I PrimeViskozimetar Izvršen je test adhezije sa staklenim predmetom označenim kao4 × 2,5 cm, tada je čak 0.25 g kreme stavljeno na sredinu površine i prekrivenodrugih staklenih predmeta. Stoga je na 5 min postavljen teret od 1 kg, a zatim dva staklena predmetakoji su bili pričvršćeni bili su montirani na ispitnu opremu koja je imala opterećenje od 80g. Nakon toga je zabilježeno vrijeme potrebno za razdvajanje dva staklena predmeta. Zapažanja zasvi testovi su vršeni sedmično tokom 5 sedmica.

2.7. Mjerenje antioksidativne aktivnosti

Kreme otopljene u metanolu pripremane su u nizu koncentracija. Dakle, aukupno 3 mL uzorka je razrijeđeno sa 1 mL 0.1 mM DPPH otopine i dozvoljenoda odstoji 30 min. Nakon taloženja, rastvor je homogenizovan i njegova apsorpcija je bilamjereno spektrofotometrom na talasnoj dužini od 517 nm. ApsorbancijaOčitana je i kontrolna otopina, odnosno DPPH bez test otopine. Nadalje, thekoličina antioksidativne aktivnosti je izmjerena korištenjem sljedeće jednadžbe [19]: 

2.8. Mjerenje faktora zaštite od sunca (SPF)

Urađeno je mjerenje vrijednosti faktora zaštite od sunca (SPF).in vitro. SPFUrađen je test kako bi se utvrdila aktivnost kreme za zaštitu od sunca korištenjem UV-Visspektrofotometar. Svaka krema, težine 0.1 g, rastvorena je u 100 mL metanola uvolumetrijsku tikvicu i filtriran pomoću Whatmana br. 1. Stavljeno je ukupno 3 mL rastvorau kivetu za mjerenje njegove apsorpcije pomoću UV-Vis spektrofotometra. Nakon toga, theodređivanje SPF vrijednosti pomoću UV-Vis spektrofotometra je poznato izkarakteristike upijanja kreme na talasnim dužinama od 290 do 320 nm sa intervalima od 5 nm.Izračun SPF vrijednosti koristi sljedeću jednačinu [20,21]: 

abs=Apsorbanca uzorka.

Pitajte za više:

E-pošta:wallence.suen@wecistanche.com Whatsapp plus 86 15292862950