Bioaktivne bakterijske nanocelulozne membrane obogaćene Eucalyptus Globulus Labill. Vodeni ekstrakt listova za primjenu u njezi kože protiv starenja, 2. dio
Jun 10, 2022
Molimo kontaktirajteoscar.xiao@wecistanche.comza više informacija
3. Rezultati i diskusija
Pripremljene su bioaktivne BNC membrane, koje sadrže različite doze vodenog ekstrakta dobijenog hidrodestilacijom listova E.globulus, predviđajući njihovu primenu kao maske za njegu kože protiv starenja. Četiri BNC membrane koje sadrže 7,5 mg cm-glicerola (koji djeluje kao plastifikator i humektant)[39,48] i različit sadržaj HDE, odnosno 1.0 ug cm-2 (BNC-G-HDE1) ,1.5 ug cm-2(BNC-G-HDE1.5),2.0 ug cm-2(BNC-G-HDE2), i 3.0 ug cm-7(BNC-G-HDE3), pripremljeni su (Tabela 1). Za poređenje su pripremljene i čista BNC membrana (BNC) i BNC membrana samo sa glicerolom (BNC-G) (Tablica 1). BNC-G-HDE membrane su proizvedene jednostavnom metodom impregnacije, zasnovane na difuziji vodenih rastvora HDE i glicerola u hidrofilnu i visoko poroznu BNC mrežu (slika 1), prema prethodnim studijama koje su opisivale ovaj proces za ugradnju mješavine biljnih ekstrakata [13] i kofeina [23].
Uz dodatak HDE i glicerola, debljina suhih BNC membrana se povećala sa 50±1 um za čisti BNC na 87 ±4 um za BNC-G, te na vrijednosti u rasponu od 79±4 um do 98 ±8 μm za membrane napunjene HDE i glicerolom, što ukazuje na uspješnu inkorporaciju komponenti ekstrakta i glicerola u 3D strukturu BNC-a. Makroskopski aspekt dobijenih membrana (slika 1) ukazuje na homogenu distribuciju HDE i glicerola unutar nanostrukture BNC.koliko cistanche uzetiTakođe je evidentno da uključivanje glicerola čini membrane prozirnijim, kao što je prethodno opisano [20]. Štaviše, ugradnja HDE nije rezultirala vidljivim promjenama boje bjelkastih BNC membrana, što je u skladu sa bezbojnim izgledom HDE vodenog rastvora (slika 1).
Molimo kliknite ovdje da saznate više
Sve dobijene BNC membrane okarakterisane su u smislu morfologije, mehaničkih performansi, termičke stabilnosti i kapaciteta upijanja vlage. Nadalje, procijenjena je antioksidativna aktivnost i in vitro citotoksičnost membrana. Za membranu BNC-G-HDE2 (2.0 ug cm--), stabilnost antioksidativne aktivnosti nakon 3 mjeseca skladištenja na 22-25 stepen C i 52 posto RH ili na 40 stepen C i 75 procenata, kao i in vitro aktivnost protiv starenja su takođe procenjeni.
3.1. Morfologija
Morfologija BNC, BNC-G i BNC-G-HDE membrana procijenjena je SEM analizom, kao što je prikazano na slici 2. Na mikrografiji površine čistog BNC, njegova karakteristična 3D nanofibrilarna mreža je jasno uočljiva; međutim, ova mikrostruktura je manje uočljiva na BNC-Gand BNC-G-HDE membranama, posebno sa povećanjem količine ekstrakta, koji zajedno sa glicerolom prekriva celulozne nanofibrile. Ovaj efekat je već uočen kod BNC membrana koje sadrže samo glicerol [49] ili glicerol i aktivne farmaceutske sastojke (npr. kofein, diklofenak i lidokain) [22]. Također se može vidjeti da ove membrane pokazuju manje kompaktnu strukturu od netaknute BNC zbog zarobljavanja glicerola (kao i komponenti ekstrakta) u BNC mreži. Ugradnja molekula glicerola između BNC nanofibrila smanjuje intermolekularne vodikove veze između celuloznih nanofibrila[49], i posljedično, smanjuje kolaps BNC strukture tijekom sušenja, što rezultira membranama sa povećanom fleksibilnošću [23]. Na slikama poprečnog presjeka jasno se uočava i punjenje lamelarnih prostora BNC glicerolom i ekstraktom. Slični rezultati su također prijavljeni za materijale na bazi BNC napunjene etanolnom otopinom ekstrakta propolisa [50] ekstrakta Scrophularia striata Boiss [51] ili hijaluronske kiseline [52]. Dakle, ovi rezultati potvrđuju uspješnu inkorporaciju glicerola i HDE u BNC membrane, bez evidentnog stvaranja aglomerata ekstrakta.šta je cistancheOvo zapažanje je pokazatelj dobre kompatibilnosti komponenti ekstrakta (fenolnih jedinjenja) sa celuloznim vlaknima i glicerolom.
3.2. Mehaničke performanse
Mehaničke performanse svih BNC membrana procijenjene su testovima zatezanja i upoređene s onima komercijalne BNC maske za lice. S obzirom na to da se maska za lice obično nanosi u mokrom stanju, mehaničke performanse pripremljenih membrana ocjenjivane su iu suhom i mokrom (80 posto sadržaja vlage) stanju. Procjena otpornosti i elastičnosti platnaste maske za lice je fundamentalna jer ona mora biti dovoljno otporna za rukovanje i, u isto vrijeme, dovoljno elastična da omogući savršeno prianjanje i čvrsto prianjanje na kožu, čime se omogućava bolje prodiranje u kožu. aktivnih spojeva u kožu [13]. Rezultati zateznih ispitivanja suhih membrana (Slika 3A) pokazuju da je ugradnja glicerola značajno utjecala na mehanička svojstva BNC membrana poboljšavajući, u velikoj mjeri, njihovu elastičnost. Ovo je evidentno po značajnom povećanju vrijednosti elongacije na prekidu sa 3,6±0,6 posto za BNC na 15,5±1,4 posto za BNC-G, praćeno značajnim smanjenjem Youngovog modula (od 1 0.1±1,2 GPa za BNC do 0,5±0,1 GPa za BNC-G) i zatezne čvrstoće (od 237±34 MPa za BNC do 40±9 MPa za BNC-G). Ovi rezultati se slažu s prethodnim studijama o materijalima na bazi BNC koji sadrže glicerol kao plastifikator [39,49,53]. Kao što je gore objašnjeno, ugradnja glicerola u BNC mrežu uzrokuje smanjenje međumolekularnih sila između celuloznih nanofibrila, čime se povećava prostor između vlakana i njihova mobilnost, što rezultira elastičnijim membranama [49]. Što se tiče mehaničkog ponašanja vlažnih membrana (Slika 3B), efekat dodatka glicerola na izduživanje membrane nije toliko očigledan.cistanche แอ ม เว ย์Zapravo, BNC pokazuje identičnu vrijednost istezanja kao i BNC-G (BNC:15,2±1,3 posto, BNC-G:20.8± 3,5 posto), što može biti povezano s prisustvom molekula vode u BNC mreži koja će također oslabiti interfibrilarne veze [24], čineći mokri BNC rastezljivijim. Međutim, kao i kod suhih membrana, značajno smanjenje Youngovog modula (BNC:0.3±0.0 GPa vs.BNC-G:0.02 ±0,01 GPa) i vlačna čvrstoća (BNC:26±1 MPa vs. BNC-G:2±1 MPa) je uočena nakon opterećenja glicerolom.
Ugradnja HDE-a u BNC membrane ne mijenja, na značajan način, većinu mehaničkih svojstava suhih membrana u poređenju sa BNC-G pandanom. Izuzetak je povećanje vlačne čvrstoće i Youngovog modula za BNC-G-HDE2 i povećanje istezanja pri prekidu BNC-G-HDE3. Sve BNC-G-HDE membrane pokazuju velika izduženja (11-18 posto) zajedno sa malim vrijednostima Youngovog modula ({{10}}.7-1.9 GPa) i vrijednosti vlačne čvrstoće između 51 i 116 MPa. Slično, u vlažnom stanju, također je potvrđeno da dodatak HDE ne utječe značajno na većinu mehaničkih svojstava BNC-G (slika 3B). Vlažne BNC-G-HDE membrane također pokazuju visoka izduženja (19-27 posto), niske vrijednosti Youngovog modula (0.03-0.06 GPa) i vrijednosti vlačne čvrstoće između 4 i 5 MPa.
Sve zajedno, mehanička svojstva o kojima smo raspravljali potvrđuju da su BNC-G-HDE membrane dovoljno savitljive da se mogu manipulirati i oblikovati na kožu, što je poželjno za namjeravanu primjenu. Zapravo, rezultati pokazuju da su ove membrane zaista obećavajuće, posebno s obzirom na usporedbu s komercijalnom BNC maskom. Suhe BNC-G-HDE membrane imaju identične ili čak značajno (str<0.05)superior mechanical="" properties="" (e.g.,="" elongation="" at="" break="" of="" dry="" bnc-g-hde3)="" to="" those="" of="" the="" commercial="" bnc="" counterpart="" when="" evaluated="" in="" a="" wet="" state,="" the="" commercial="" bnc="" shows="" higher="" values="" of="" elongation="" at="" break="" and="" tensile="" strength="" than="" those="" observed="" in="" the="" bnc-g-hde="" membranes,="" whereas="" values="" of="" young's="" modulus="" are="" identical.="" differences="" in="" the="" content="" of="" plasticizers="" and="" humectants="" (e.g.,="" glycerol,="" hyaluronic="" acid,="" peg-450)="" can="" explain="" the="" increased="" elasticity="" of="" wet="" commercial="" bnc="" compared="" to="" the="" bnc-g-hde="" membranes="" developed="" in="" the="" present="">
3.3. Termička stabilnost
Za uvid u termičku stabilnost BNC-G-HDE suhih membrana, izvršena je termogravimetrijska analiza u inertnoj (N,)atmosferi. BNC-G membrana je analizirana kao kontrola. Profili degradacije i odgovarajući derivati su prikazani na slici 4. Sve membrane pokazuju početni gubitak težine ispod 100 stepeni, zaslužan za isparavanje adsorbovane vode iz polimerne matrice, što potvrđuje hidrofilnost BNC-a i higroskopnu prirodu glicerola. Osim ovog koraka dehidracije, sve membrane pokazuju profil mršavljenja u dva koraka. Termički profil BNC-G membrane pokazuje korak gubitka težine sa početnom i maksimalnom temperaturom razgradnje od oko 125 stepeni i 233 stepena, respektivno, uglavnom povezanim sa razgradnjom glicerola, u dobroj saglasnosti sa prethodnim rezultatima dobijenim na drugim mestima sa plastificiranim BNC-om. [49]. Druga faza gubitka težine javlja se pri početnoj i maksimalnoj temperaturi razgradnje od oko 295 stepeni i 355 stepeni, respektivno, a pripisuje se razgradnji celuloznih glikozilnih jedinica [30].
Što se tiče membrana koje sadrže HDE, korak gubitka težine pripisan razgradnji glicerola pokazuje maksimalnu temperaturu raspadanja na ca. 232 stepena za BNC-G-HDE1,224 stepena za BNC-G-HDE1.5,226 stepena za BNC-G-HDE2, i 213 stepeni za BNC-G-HDE3. Slično kao kod BNC-G, drugi korak gubitka težine se opaža pri maksimalnim temperaturama raspadanja od oko 355 stepeni C za BNC-G-HDE1, 353 stepena C za BNC-G-HDE1.5, 343 stepena za BNC-G-HDE2, i 350 stepeni za BNC-G-HDE3, zahvaljujući razgradnji BNCpolimernih lanaca.cistanche tubulosa doza redditIz termograma nije bilo moguće identificirati gubitak težine koji se pripisuje razgradnji fenolnih jedinjenja HDE, a koja se prema literaturi može javiti u rasponu od 100-300 stepena [54,55]. Međutim, s obzirom na nizak omjer (<0.1%, w/w)of="" the="" hde="" in="" the="" bnc="" membranes,="" the="" weight="" loss="" associated="" with="" the="" extract="" components="" is="" probably="" not="">
Ovi rezultati pokazuju da su sve membrane stabilne do cca. 125 stepeni, što je uporedivo sa rezultatima ranije prijavljenim za glicerol-plastificirane BNC membrane [49] i adekvatan je za predviđenu upotrebu kao maska za lice, s obzirom na upotrebu na tjelesnoj temperaturi.
3.4. Kapacitet upijanja vlage
Zadržavanje vlage je vrlo poželjno svojstvo maski za lice koje ima za cilj da izbjegne dehidraciju polimerne strukture i osigura prianjanje maske na kožu tokom cijelog vremena tretmana [24]. Istovremeno, bubrenje nanoporozne strukture BNC-a, zbog vezivanja vode, će također olakšati isporuku inkorporiranih aktivnih spojeva. Stoga je određen kapacitet upijanja vlage pripremljenih suhih membrana kako bi se procijenila njihova sposobnost apsorpcije vlage iz okoline. Stoga su membrane stavljene u eksikator sa kontrolisanom vlažnošću (RH oko 52 posto) na sobnoj temperaturi, a upijanje vlage je praćeno tokom vremena, od 30 min do 48 h (Slika 5). RHof oko 52 posto korišten u testu je blizu vrijednosti od 45±5 posto, što je naznačeno kao opće smjernice za izvođenje studija hidratacije s hidratantnom kozmetikom [56].
All the prepared BNC membranes can absorb environmental humidity, showing an incremental uptake over time and reaching a maximum at 48 h, which is in agreement with a previous work with BNC loaded with silk-sericin [24]. As expected, the incorporation of glycerol, a highly hygroscopic compound, resulted in BNC membranes with a higher aptitude to uptake environmental humidity, even for short periods of time, such as 1 h, with BNC-G membranes absorbing 5.3±0.3% of moisture after this time, and pristine BNC absorbing only 1.3±0.2%. Similar behavior was observed for the BNC-Gmembranes loaded with the HDE, presenting a moisture uptake of 4.4± 0.6% for BNC-G-HD,4.4± 0.3% for BNC-G-HDE1.5,4.2±0.3% for BNC-G-HDE2, and 3.9±0.6% for BNC-G-HDE3 after 1 h. The amount of the HDE seems to have no influence on the moisture uptake capacity of the membranes since the differences are not significant(p>0.05). Considering that the time of treatment of a beauty mask is generally between 20 min and 1 h, the capacity of the BNC-G-HDE membranes to rapidly absorb environmental humidity is fundamental to guarantee the adherence of the BNC sheet to the skin during the entire treatment and favor the release of the active compounds. It is also noteworthy that for the short period of 1 h, the moisture uptake capacity of BNC-G-HDE membranes is identical (p>{{0}}}.05) do onog dobijenog za komercijalnu BNC masku (3,2±1,0 posto).
3.5. U Chemico antioksidativnom djelovanju
TPC E.globulus HDE je određen Folin-Ciocalteu metodom, računajući 329±9 mg GAEg-I liofiliziranog ekstrakta. Ovaj rezultat potvrđuje prisustvo visokog sadržaja fenolnih jedinjenja u ovom ekstraktu, koji je uporediv sa vrednostima TPC koje su ranije prijavljene za fenolne ekstrakte listova E.globulus (311±20 mg GAEg-I suvog ekstrakta) [57].
Fenolna jedinjenja su dobro poznata po svojim antioksidativnim svojstvima koja su rezultat uklanjanja slobodnih radikala, što je jedan od mehanizama za sprečavanje ćelijskog oksidativnog stresa [29]. Stoga su procijenjene antioksidativne aktivnosti HDE i pripremljenih BNC membrana (BNC, BNC-G, BNC-G-HDE1, BNC-G-HDE1.5, BNC-G-HDE2 i BNC-G-HDE3). DPPH metodom uklanjanja slobodnih radikala (slika 6). Antioksidativna aktivnost je praćena do 2,5 h, na osnovu obično kratkog trajanja nanošenja maske za lice i procedura opisanih na drugom mestu [44,58].
Čista BNC membrana ne pokazuje značajnu aktivnost uklanjanja radikala, što se slaže sa podacima iz prethodnih studija [51,59]. Slični rezultati su dobijeni za BNC-G membrane jer glicerol nije antioksidans. Što se tiče vodenih otopina HDE, oni pokazuju antioksidativno djelovanje ovisno o dozi, što se može pripisati njihovom sadržaju u fenolima, slično rezultatima koji su ranije prijavljeni za vodeni ekstrakt lista E.globulus [57]. Maksimalna aktivnost uklanjanja DPPH postignuta je na kraju 2,5 h pomoću rastvora HDE3 (7,5 ug mL-) (75,1 ±5,8 procenata). Ovaj rezultat ukazuje da HDE ima veću antioksidativnu aktivnost u poređenju sa etanolnim ekstraktom osušene komercijalne biomase E.globulus, koji pokazuje samo aktivnost uklanjanja DPPH od 65 posto (pri 0.5 h inkubacije) za koncentraciju ekstrakta od 250 ug mL-I【37】 Što se tiče BNC-G-HDE membrana, rezultati su otkrili da sve membrane pokazuju antioksidativno djelovanje s odgovorom ovisnom o dozi koji se vremenom povećava.prednosti cistanche salseMaksimalne aktivnosti čišćenja DPPH postignute su na kraju 2,5 h, sa 14,2 ±1,6 procenata, 28,1 ±6,3 procenata, 48,9±6,1 procenata i 53,3± 5,7 procenata za BNC-G-HDE1, BNC-G-HDE1,5, BNC-G-HDE2, odnosno BNC-G-HDE3 membrane. Stoga rezultati jasno pokazuju da ugradnja HDE u BNC mrežu uspješno daje čistom BNC antioksidativno djelovanje, slično onome što je postignuto u prethodnim radovima s ekstraktima S.striata Boiss [51] ili Epilobium Angustifolia L.[60] ].
These results also demonstrate that the HDE is gradually released from the membranes, and after 2.5 h, the DPPH scavenging activities obtained for all membranes, except for BNC-G-HD3, are identical (p>0.05) do onih postignutih za odgovarajuće HDE rješenje. Razlika (str<0.05)between bnc-g-hde3="" and="" hde3="" samples="" may="" be="" related="" to="" the="" kinetics="" of="" the="" hde="" release="" from="" the="" membrane.="" these="" are="" promising="" results="" regarding="" the="" use="" of="" these="" membranes="" for="" the="" delivery="" of="" the="" active="" compounds="" of="" the="" hde.="" in="" particular,="" the="" bnc-g-hde2="" membrane="" seems="" preferable="" for="" further="" studies,="" because="" it="" shows="" similar="" results,="" in="" terms="" of="" antioxidant="" activity,="" to="" the="" membrane="" with="" the="" highest="" dose="" of="" hde,="" even="" though="" a="" lower="" dose="" of="" hde="" is="" used,="" which="" is="" especially="" relevant="" when="" future="" scale-up="" is="">
3.6. Procjena stabilnosti BNC-G-HDE2 membrane u skladištu
Poznato je da faktori okoline (npr. temperatura, svjetlost i kiseonik) imaju uticaj na strukturnu stabilnost fenolnih jedinjenja i na njihovu antioksidativnu aktivnost 61. Temperatura skladištenja i svetlost su među faktorima koji se najviše prijavljuju koji se povezuju sa smanjenjem antioksidativno djelovanje ekstrakata koji sadrže fenolne spojeve [62,63]. Dakle, na osnovu međunarodnih smjernica o ispitivanju stabilnosti kozmetičkih proizvoda [46], izvršen je istraživački test stabilnosti kako bi se ocijenile promjene u antioksidativnoj aktivnosti BNC-G-HDE2 membrane u normalnim uvjetima skladištenja, odnosno na 22-25 stepen i 52 procenta relativne vlažnosti (stanje I) i pri ubrzanim uslovima (tj. preterani uslovi skladištenja), odnosno na 40 stepeni i 75 procenata relativne vlažnosti (stanje II) tokom 3 meseca.
Posmatranje makroskopskog aspekta membrana (Slika 7) pokazuje da nema značajnih promjena u njihovoj homogenosti tokom 3 mjeseca skladištenja u oba uslova skladištenja.
Results from the antioxidant activity of the BNC-G (control) and BNC-G-HDE2 mem-branes over the 3 months of storage in each condition are depicted in Figure 8. As in the assay of the antioxidant activity of BNC-G-HDE membranes(Section 3.5), the values obtained for the antioxidant activity of BNC-G are not significant. Regarding the BNC-G-HDE2 membrane, when it is stored at 22-25°C and 52% RH (Figure8A), the antioxidant activity is kept unchanged over the entire assay(p>0.05), showing values of 37.0±6.9%in the beginning of the assay and 39.6± 2.4% after 3 months. Similar results were obtained after storage at accelerated conditions(Figure 8B) of 40°C and 75%RH, in which the variation in the antioxidant activity after 1 month (31.7±7.5%)and after 3 months (31.0±5.2%)is not significantly different(p>0.05) od onoga na početku testa. Stoga, ovi rezultati pokazuju da je antioksidativna aktivnost BNC-G-HDE2 stabilna najmanje 3 mjeseca pod ovim uvjetima skladištenja, što znači da se unutar membrana ne događa očigledna degradacija fenolnih jedinjenja iz HDE. Štaviše, sa ovim obećavajućim rezultatima u ubrzanim uslovima, predvidljivo je da će stabilnost membrana biti duža od 3 meseca pod normalnim uslovima skladištenja.
3.7. In vitro biološki testovi
3.7.1. Cytotoxicity Assay
Procjena sigurnosti membrana baziranih na BNC-u je bitna za njihovu primjenu kao maske za lice jer to podrazumijeva njihov direktan kontakt s kožom. Stoga je citotoksičnost BNC-G (za kontrolu) i četiri BNC-G-HDE membrane procijenjena pomoću MTT testa, s ekstraktima membrana, prema ljudskim keratinocitima (HaCaT) i mišjim fibroblastima (NIH/3T3) ćelijama . Ove ćelijske linije su odabrane kao reprezentativne za dva važna strukturna tipa ćelija kože. Keratinociti su glavne ćelije epiderme (najgornji sloj kože), dok su fibroblasti dio dermisa (drugi sloj kože) [64].
Rezultati dobijeni za BNC-G membranu (slika 9) su u skladu sa dobro poznatom necitotoksičnošću čistog BNC prema HaCaT [52,65] i NIH/3T3 [65,66] ćelijama i BNC plastificiranog glicerolom na HaCaT ćelijama [39]. Što se tiče rezultata citotoksičnosti BNC membrana napunjenih HDE, primjetno je da, neovisno o dozi HDE, membrane nemaju značajan utjecaj na vitalnost ni HaCaT ni NIH/3T3 stanica. Sve vrijednosti vijabiliteta ćelije dobijene za BNC-G-HDE membrane su iznad 70 posto i stoga se smatraju necitotoksičnim prema ovim ćelijskim linijama, prema međunarodnom standardu ISO10993-5 za biološku evaluaciju medicinskih uređaja (dio 5 : Testovi in vitro citotoksičnosti). Stoga su ovi rezultati potvrda da je ugradnja ovih doza E.globulus HDE u BNC potpuno sigurna za dermalnu primjenu. Zaista, ovi podaci su u skladu s rezultatima objavljenim na drugim mjestima koji pokazuju necitotoksičnost etanolnog ekstrakta iz biomase E.globulus (1, 10 i 100 ug mL-1) testiranog na normalnim ljudskim dermalnim fibroblastima [37].
3.7.2. Aktivnost protiv starenja
Proces starenja kože povezan je ne samo s promjenama u sastavu i strukturnom integritetu dermalnog ekstracelularnog matriksa (ECM) [67] već i s povećanjem starenja ćelija u dermalnom sloju [68]. Akumulacija senescentnih dermalnih fibroblasta sada je prepoznata kao aktivna uloga u procesu starenja kože, doprinoseći opadanju funkcionalnosti tkiva [69,70].
U tom smislu je procijenjena aktivnost protiv starenja BNC-G-HDE2 membrane prema mišjim fibroblastima (NIH/3T3 ćelijska linija). BNC-G-HDE2 membrana je odabrana za ovu procjenu jer, zajedno sa BNC-G-HDE3, pokazuje jednu od najvećih antioksidativnih aktivnosti, a kako se u BNC-G-HDE2 koristi manja količina HDE-a, to je poželjno u pogledu buduće ekonomske primjene.
Ćelijsko starenje indukovano je genotoksičnim agensom etopozidom, a mjerena je aktivnost -gal, široko korištenog biomarkera za starenje stanica [71]. Prema podacima prikazanim na slici 10, ni BNC-G ni BNC-G-HDE2 membrane ne aktiviraju -gal povezan sa starenjem NIH/3T3 ćelija. Naprotiv, nakon tretmana etopozidom, broj NIH/3T3 ćelija koje su povezane sa starenjem -gal pozitivnih (plavo bojenje) značajno se povećava u poređenju sa kontrolom (44,1±2,7 posto naspram 8,9±1.0 posto) . Ovo je takođe vidljivo u stečenoj morfologiji NIH/3T3 ćelija, pokazujući karakterističan fenotip starenja sa uvećanim i spljoštenim ćelijama (Slika 10A). Primjetno je da nakon 24 h tretmana ekstraktom BNC-G-HDE2 dolazi do značajnog smanjenja broja starih NIH/3T3 ćelija (32,2±4,0 posto) (Slika 10B). Za ovaj pozitivan efekat svakako su zaslužne komponente HDE, odnosno fenolna jedinjenja koja se oslobađaju iz membrane. U stvari, već je dokazano da fenolna jedinjenja imaju blagotvorne efekte na prevenciju ćelijskog starenja supresijom -gal povezanog sa starenjem, uglavnom zbog njihove poznate uloge kao inhibitora oksidativnog oštećenja [72,73]. Drugi primjeri u skladu sa ovdje dobijenim rezultatima su nalazi o efektima ekstrakta lista Sonchus oleraceus L. (koji sadrži kaftarnu kiselinu, hlorogensku kiselinu i cikoricnu kiselinu) na H2O2-indukovano starenje stanica u WI{{45 }} ljudske diploidne fibroblastne ćelije [74], ili fenola masline (hidroksitirozol i oleuropein) na presenescentnim ljudskim dermalnim i plućnim fibroblastima [72] Međutim, koliko nam je poznato, ovo je prvi put da je ova aktivnost prijavljeno za BNC membrane obogaćene biljnim ekstraktima. Stoga, ovo su obećavajući rezultati koji ukazuju na značajan potencijal razvijenih BNC-G-HDE membrana za primjenu u njezi kože protiv starenja.
4. Zaključak
S ciljem razvoja potpuno biološkog materijala s bioaktivnim i adekvatnim mehaničkim svojstvima za potencijalne primjene protiv starenja kože, BNC membrane napunjene glicerolom i različitim dozama (1-3 ug cm-2) vodenog ekstrakta E.globulus dobijenog hidrodestilacijom (HDE) listova koji sadrže fenolne spojeve (329±9 mg GAE gI liofiliziranog ekstrakta) pripremljeni su metodom impregnacije. Sve BNC-G-HDE membrane pokazale su otporno, ali još uvijek elastično mehaničko ponašanje, slično (i u suhom i u mokrom stanju) kao kod komercijalne BNC maske za lice. Sposobnost BNC-G-HDE membrana da upijaju vlagu iz okoline bila je veća od one kod čistog BNC-a i takođe uporediva sa komercijalnom BNC maskom. Utvrđeno je da su BNC-G-HDE membrane termički stabilne do oko 125 stepeni. Štaviše, ugradnja HDE-a daje BNC-u antioksidativnu aktivnost zavisnu od doze (test čišćenja radikala DPPH). Stabilnost antioksidativne aktivnosti membrane sa 2 ug cm-2HDE-a dokazana je nakon skladištenja preko 3 mjeseca na očekivanom normalnom (22-25 stepen /52 posto RH) i ubrzanom (40C/75 posto RH) )uslovi skladištenja. Pokazalo se da sve BNC-G-HDE membrane nisu citotoksične prema ćelijskim linijama HaCaT i NIH/3T3. Štaviše, pokazalo se da tretman sa BNC-G-HDE2 membranom uzrokuje smanjenje procenta starih ćelija (oko 32 procenta) u poređenju sa onim uočenim u ćelijama tretiranim samo etopozidom (oko 44 procenta). Nalazi koji su ovdje navedeni jasno naglašavaju potencijal pripremljenih BNC membrana napunjenih HDE kao robusne maske za lice za njegu kože protiv starenja.
Ovaj članak je preuzet iz Materials 2022, 15, 1982. https://doi.org/10.3390/ma15051982 https://www.mdpi.com/journal/materials
