Antioksidans i potencijal protiv starenja kože odabranih tajlandskih biljaka: in vitro procjena i in silico predviđanje cilja, 2. dio

3. Diskusija

Starenje kože je prirodan proces koji se javlja u svim ljudskim bićima. Međutim, mnogi načini života i okolišni faktori također mogu ubrzati ovaj proces koji dovodi do preranog starenja kože [19]. ROS je dobro poznat kao važan patogeni faktor u procesu starenja kože. Akumulacija ROS može povećati ekspresiju enzima elastaze i tirozinaze, što potom dovodi do stvaranja bora, nedostatka elastičnosti i hiperpigmentacije [20-22]. Sve su to zajedničke karakteristike starenja kože [4]. Ovdje je naša studija istraživala svojstva antioksidansa, anti-elastaze i tirozinaze biljnih ekstrakata iz 16 tajlandskih biljnih vrsta i otkrila obećavajuća prirodna jedinjenja za potencijalni razvoj novih tretmana protiv starenja kože.

Glikozid cistanche takođe može povećati aktivnost SOD u tkivima srca i jetre, te značajno smanjiti sadržaj lipofuscina i MDA u svakom tkivu, efikasno hvatajući različite reaktivne radikale kisika (OH-, H₂O₂, itd.) i štiteći od oštećenja DNK uzrokovanih od strane OH-radikala. Cistanche feniletanoidni glikozidi imaju snažnu sposobnost uklanjanja slobodnih radikala, veću redukcijsku sposobnost od vitamina C, poboljšavaju aktivnost SOD u suspenziji sperme, smanjuju sadržaj MDA i imaju određeni zaštitni učinak na funkciju spermatozoida. Cistanche polisaharidi mogu pojačati aktivnost SOD i GSH-Px u eritrocitima i plućnim tkivima eksperimentalno starenja miševa uzrokovanih D-galaktozom, kao i smanjiti sadržaj MDA i kolagena u plućima i plazmi, te povećati sadržaj elastina. dobar učinak čišćenja na DPPH, produžava vrijeme hipoksije kod starijih miševa, poboljšava aktivnost SOD u serumu i odlaže fiziološku degeneraciju pluća kod eksperimentalno starenja miševa. i ima potencijal da bude lijek za prevenciju i liječenje bolesti starenja kože. U isto vrijeme, ehinakozid u Cistancheu ima značajnu sposobnost uklanjanja slobodnih radikala DPPH i može ukloniti reaktivne vrste kisika, spriječiti degradaciju kolagena izazvanu slobodnim radikalima, a također ima dobar učinak popravljanja oštećenja anjona slobodnih radikala timina.

Kliknite na dodatak cistanche tubulosa

【Za više informacija:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Elastaza je enzim proteaze koji je prvenstveno odgovoran za razgradnju elastina, važnog proteina koji se nalazi u ECM. Elastin je vitalan za davanje elastičnosti koži zbog svojih elastičnih svojstava povrata [13]. Stoga, inhibicija aktivnosti elastaze može pomoći u sprječavanju gubitka elastičnosti kože i bora [23]. Naš rezultat je pokazao da je A. occidentale bio najsnažniji inhibitor elastaze, a slijede G. zeylanicum i S. alata, po rangu vrijednosti IC50. Nadalje, rezultati spajanja su otkrili da pet spojeva dobijenih iz ove tri biljke imaju nižu energiju vezivanja od EGCG (pozitivna kontrola) i FRW (originalni inhibitor), pri čemu se smatra da jedinjenja koja pokazuju nižu energiju vezivanja imaju bolju inhibiciju (Tabela S4) [ 24]. Ta jedinjenja su flavonoidi, koji uključuju tetramer proantocijanidina [25], amentoflavona [25], rutina [26,27], agathisflavona [26] iz A. occidentale i kaempferola 3-O-gentiobioside iz S. alata [28] (Tabela S3). Rezultati sugeriraju da je svih pet spojeva odgovorno za djelovanje protiv elastaze, kao i da se mogu smatrati obećavajućim kandidatima za razvoj protiv starenja kože. Međutim, otkrili smo da nijedno od jedinjenja iz G. zeylanicum nije pokazalo jak afinitet vezivanja u odnosu na kontrolne ligande, iako je njegov ekstrakt pokazao drugi najaktivniji in vitro test. Ovo može biti zbog sinergističkog učinka spojeva u mješavini, a ne zbog individualnog efekta svake fitokemijske komponente.

Pored elastaze, melanin se smatra još jednom važnom metom za tretman starenja kože. Melanin je glavna komponenta boje kože, kose i očiju sintetizirana melanogenezom unutar melanocita. Međutim, prekomjerna proizvodnja melanina može uzrokovati poremećaje kože, uključujući pjege, melazmu, staračke pjege i hiperpigmentaciju, što dovodi do pojave preranog starenja [12]. U melanogenezi, tirozinaza je kritični enzim u koraku koji ograničava brzinu. Stoga, smanjenje aktivnosti tirozinaze može dovesti do smanjene proizvodnje melanina [29]. Naši rezultati su pokazali da je G. zeylanicum bio najsnažniji inhibitor tirozinaze, a slijede ga A. catechu i A. occidentale, prema IC50 vrijednostima. Iznenađujuće, većina jedinjenja (47 od 48 jedinjenja) u ove tri biljke pokazala je nižu energiju vezivanja protiv tirozinaze od KA (pozitivna kontrola) i tropolona (originalni inhibitor) (Tabela S5). Među 47 jedinjenja, 16 je izvedeno iz G. zeylanicum, 12 je izvedeno iz A. catechu, a 29 je izvedeno iz A. occidentale, od kojih se 10 može naći u više od jedne biljke (Tablica S3). Međutim, za razliku od vezivanja jedinjenja sa elastazom, identifikovana potencijalna jedinjenja protiv tirozinaze su iz različitih fitokemijskih klasa. Što se tiče ranga energije vezivanja za tirozinazu, jedinjenja koja se smatraju najboljih pet inhibitora su o-kumarinska kiselina [30] (fenol), tetramer proantocijanidina [25] (flavonoid), kafeinska kiselina [30] (fenol), ferulinska kiselina [30] (fenolna), i areka tanin A1 [31] (tanin), u rastućem redoslijedu bodova (Tabela S5). Rezultati dobijeni in vitro skriningom i analizom pristajanja u ovoj studiji potvrdili su svojstva četiri tajlandske ljekovite biljke protiv starenja kože i sugerirali njihova potencijalna jedinjenja koja bi mogla biti odgovorna za uočene aktivnosti. Daljnje studije o frakcioniranju, kao i identifikaciji i izolaciji bioaktivnih spojeva u ovim obećavajućim biljnim ekstraktima, kritično su potrebni da bi se dokazalo prisustvo naših predloženih molekula koji bi se kasnije mogli razviti za liječenje starenja kože [14].

A. catechu, A. occidentale, G. zeylanicum i S. alata su biljke koje se koriste u tradicionalnoj medicini i nalaze se u tropskoj zoni jugoistočne Azije, uključujući Tajland [32–36]. Značajno je da su ove biljke pokazale nekoliko aktivnosti povezanih s antioksidansima. Voće A. catechu je popularan proizvod za žvakanje sa listovima betela, koji opija i izaziva malu ovisnost [36]. Koristi se za liječenje opekotina i čireva na koži i djeluje kao adstringent [35,37]. Zabilježen je snažan antioksidativni i protuupalni učinak protiv ozljede jetre izazvane oksidativnim stresom kod pacova [38]. A. occidentale i G. zeylanicum, koji pripadaju južnom Tajlandu, koriste se kao hrana i lokalna ljekovita biljka [32,33]. Listovi A. occidentale se koriste za liječenje kožnih osipa, svraba, čireva i groznice, dok se listovi G. zeylanicum koriste za liječenje reumatoidnog artritisa, gripe, dizenterije i dispepsije [32,33,39]. Ekstrakti listova A. occidentale i G. zeylanicum pokazali su neuroprotektivne efekte protiv glutamata i H2O2-indukovanog oksidativnog oštećenja [32,40]. Osim toga, sirovi ekstrakt iz listova obje biljke pokazao je antioksidativni stres i svojstva protiv starenja kod nematode Caenorhabditis elegans [33,41,42]. Listovi S. alata koriste se za liječenje kožnih osipa, mikoza i dermatitisa [34]. Ekstrakt lista ove biljke bio je u stanju da poveća i enzimske i neenzimske antioksidativne sisteme i spreči oštećenje tkiva jetre i bubrega uzrokovano oksidativnim stresom tokom dijabetesa na modelu štakora [43].

U skladu s prethodnim izvještajima, naši nalazi otkrivaju da A. catechu, A. occidentale, G. zeylanicum i S. alata pokazuju antioksidativni potencijal, osim aktivnosti prema enzimima povezanim sa starenjem kože. Ustanovili smo da su ove biljke bogate ukupnim fenolima i flavonoidima sa visokim antioksidativnim kapacitetom prema DPPH i ABTS radikalima, osim S. alata, koja je pokazala samo umjereni nivo i u količinama i u aktivnostima. Fenoli i flavonoidi su dvije dobro poznate klase biljnih sekundarnih metabolita koji su uglavnom odgovorni za antioksidativno djelovanje [44,45]. Ovo je bilo u skladu s našim rezultatima da je ukupni sadržaj fenola i flavonoida pokazao značajnu pozitivnu korelaciju s aktivnostima uklanjanja slobodnih radikala (Slika S1). Zanimljivo je da je korelacionom analizom takođe otkriveno da je sadržaj ukupnih fenolnih i flavonoidnih jedinjenja u ovim ispitivanim biljnim ekstraktima bio u pozitivnoj korelaciji sa inhibicijom elastaze i tirozinaze. Međutim, utvrđeno je da je jačina korelacije veća kod fenola nego kod flavonoida. Pokazalo se da aktivnosti uklanjanja slobodnih radikala imaju visoku korelaciju sa enzimskim inhibicijskim aktivnostima ekstrakata. Ovi rezultati sugeriraju da visoki sadržaj fenola i antioksidativna aktivnost mogu dovesti do jake inhibicije enzima elastaze i tirozinaze. Međutim, mogućnost interakcije protein-polifenol također bi trebala biti zabrinuta. Neki polifenoli mogu direktno uzrokovati precipitaciju enzima putem svoje sposobnosti da se vežu za proteine ​​bogate prolinom, što rezultira stvaranjem vodonične veze sa enzimom i na taj način dovodi do neselektivne inhibicije [46].

4. Materijali i metode

4.1. Hemikalije i reagensi

Folin-Ciocalteuov fenol reagens, aluminijum hlorid (AlCl3), dimetil sulfoksid (DMSO), natrijum acetat (NaOAc), kvercetin, 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH), 2,{{5} } azinobis-(3-etilbenztiazolin-6-sulfonska kiselina) (ABTS), L-askorbinska kiselina, kalijum persulfat (K2S2O8), elastaza iz svinjskog pankreasa, epigalokatehin galat (EGCG), nsukcinil-Ala-Ala- Ala-p-nitroanilid (SANA), tirozinaza iz gljive, kojična kiselina (KA) i 3,4-dihidroksi-L-fenilalanin (L-DOPA) kupljeni su od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, SAD). Natrijum karbonat (Na2CO3) je nabavljen od Mercka (Darmstadt, Njemačka). Galna kiselina je kupljena od TCI America (Portland, OR, SAD). Dikalijum fosfat (K2HPO4) i monobazni kalijum fosfat (KH2PO4) kupljeni su od HiMedia (Mumbai, Indija). Tris baza je kupljena od Vivantis Technologies (Shah Alam, Malezija). Etanol i metanol su kupljeni od RCI Labscan (Bangkok, Tajland). Sve hemikalije i reagensi su analitičke kvalitete.

4.2. Biljni materijali i ekstrakcija

Biljke u ovoj studiji sakupljene su lokalno iz vrtova ili kupljene na lokalnim tržnicama prema potrebi. Tabela 1 daje naučni naziv, korišteni dio i izvor svake biljke. Ove biljke su botanički potvrđene, a njihovi uzorci vaučera deponovani su u herbarijum Kasina Suvatabhandhua, Odsjek za botaniku, Prirodno-matematički fakultet Univerziteta Chulalongkorn, Bangkok, Tajland, ili ih je identificirao botaničar. Biljni materijali su oprani, osušeni na 65 ◦C i fino mljeveni u mehaničkom mlinu. Ekstrakcija osušene biljke (40 g) izvedena je metodom Soxhlet ekstrakcije ili maceracije sa 400 mL etanola ili metanola. Ekstrakti su filtrirani i upareni do suva pod vakuumom. Zatim su osušeni ostaci rastvoreni u DMSO kao osnovni rastvor od 100 mg/mL i pohranjeni na -20 ◦C za dalje proučavanje.

4.3. Određivanje ukupnog sadržaja fenola

Ukupni sadržaj fenola određen je Folin–Ciocalteu metodom [47]. Ukratko, 50 µL ekstrakata u količini od 1 mg/mL u deioniziranoj vodi pomiješano je sa 50 µL 10 posto (w/v) Folin-Ciocalteu-ovog fenolnog reagensa u ploči sa 96-jažicom i inkubirano u mraku na sobnoj temperaturi ( RT) 20 min. Nakon inkubacije, 50 µL 7,5 posto (w/v) Na2CO3 je dodano u smjesu i inkubirano daljnjih 20 minuta. Apsorbancija je izmjerena čitačem mikropločica na 760 nm. Ukupni sadržaj fenola je izračunat iz standardne kalibracione krive upotrebom galne kiseline od 1,56 do 100 µg/mL, a rezultati su prikazani kao mg ekvivalenta galne kiseline (GAE) po g ekstrakta suhe težine.

4.4. Određivanje ukupnog sadržaja flavonoida

Ukupni sadržaj flavonoida određen je korištenjem aluminij hlorida (AlCl3) [47]. Ukratko, 50 µL ekstrakata od 1 mg/mL u dejoniziranoj vodi je dopunjeno do 200 µL sa 95 posto etanola, a zatim je 10 µL 10 postotnog AlCl3 i 10 µL 1 M NaOAc dodano u 96-bunarić ploča. Ploča je inkubirana u mraku na sobnoj temperaturi 40 minuta, a apsorbancija je mjerena čitačem mikroploče na 415 nm. Ukupni sadržaj flavonoida je izračunat iz standardne kalibracione krive koristeći kvercetin od 1,56 do 100 µg/mL, a rezultati su prikazani kao mg kvercetinskog ekvivalenta (QE) po g ekstrakta suhe težine.

4.5. Određivanje aktivnosti uklanjanja radikala DPPH

Analiza aktivnosti uklanjanja radikala DPPH izvedena je kao što je prethodno opisano [47]. Radni reagens DPPH• pripremljen je pomoću DPPH rastvorenog u apsolutnom etanolu. Ukratko, 180 µL radne otopine DPPH• pomiješano je sa 20 µL ekstrakata u 96- pločici s bunarima i inkubirano je u mraku na sobnoj temperaturi 15 minuta, a apsorbancija je mjerena čitačem mikroploče na 517 nm. Kao standard služila je askorbinska kiselina od 1,56 do 100 µg/mL. Aktivnost uklanjanja radikala izračunata je kao postotak inhibicije slobodnih radikala koristeći sljedeću jednačinu:

Procenti aktivnosti uklanjanja DPPH svakog biljnog ekstrakta upoređeni su sa onima askorbinske kiseline. Rezultati su izraženi kao mg antioksidativnog kapaciteta ekvivalentnog vitamina C (VCEAC) po g suvog ekstrakta težine. IC50 (polu-maksimalna inhibitorna koncentracija) određena je iz grafikona procenta inhibicije u odnosu na koncentraciju svakog ekstrakta.

4.6. Određivanje aktivnosti uklanjanja radikala ABTS

Analiza aktivnosti uklanjanja radikala ABTS izvedena je kao što je prethodno opisano [47]. Radni reagens ABTS• plus pripremljen je miješanjem 7 mM ABTS• i 2,45 mM K2S2O8 u omjeru 1:1, a smjesa je morala ostati 16-18 h u mraku na sobnoj temperaturi. ABTS• plus radna otopina je razrijeđena apsolutnim etanolom kako bi apsorbanca dostigla između 0.7 i 0.8 na 734 nm. Ukratko, 180 µL ABTS• plus radne otopine je pomiješano sa 20 µL ekstrakata u 96-ploči sa bunarima i inkubirano u mraku na sobnoj temperaturi 30 minuta, a apsorbancija je izmjerena čitačem mikroploče na 734 nm. Kao standard služila je askorbinska kiselina od 1,56 do 100 µg/mL. Aktivnost uklanjanja radikala izračunata je kao postotak inhibicije slobodnih radikala pomoću jednačine (1).

Procenti aktivnosti uklanjanja ABTS-a svakog biljnog ekstrakta upoređeni su sa onima askorbinske kiseline. Rezultati su izraženi kao mg antioksidativnog kapaciteta ekvivalentnog vitamina C (VCEAC) po g ekstrakta suhe težine. IC50 je određen iz grafikona procenta inhibicije u odnosu na koncentraciju svakog ekstrakta.

4.7. Određivanje anti-elastazne aktivnosti

Anti-elastazna aktivnost je procijenjena testom inhibicije elastaze korištenjem modificiranog protokola [13,48,49]. Ukratko, 20 µL ekstrakta, 10 µL 0.4 U/mL pankreasne svinjske elastaze (PPE) i 140 µL 0,1 M Tris-HCL pufera na pH 8,0 dodani su u ploču sa 96-jažicom i prethodno inkubirani na sobnoj temperaturi 20 min. Nakon inkubacije, 30 µL 2 mM SANA je dodano u reakcionu smjesu i dalje inkubirano 30 minuta na sobnoj temperaturi. Apsorbancija je izmjerena čitačem mikroploča na 734 nm. EGCG je korišten kao pozitivna kontrola za inhibiciju. Negativna kontrola je sadržavala 100 posto DMSO umjesto ekstrakata. Procenat inhibicije aktivnosti elastaze izračunat je pomoću jednačine (1). IC50 je određen iz grafikona procenta inhibicije elastaze u odnosu na koncentraciju svakog ekstrakta.

4.8. Određivanje anti-tirozinazne aktivnosti

Anti-tirozinazna aktivnost je izvedena metodom dopahroma uz određene modifikacije [8]. Ukratko, 20 µL ekstrakta, 20 µL 200 U/mL tirozinaze pečuraka i 140 µL 0,1 M fosfatnog pufera na pH 6,8 dodano je u 96-ploče s bunarima i prethodno inkubirano na sobnoj temperaturi za 20 min. Nakon inkubacije, 40 µL 2,5 mM L-DOPA je dodano u reakcionu smjesu i dalje inkubirano 20 minuta na sobnoj temperaturi. Apsorbancija je očitana čitačem mikropločica na 492 nm. KA je korišten da posluži kao pozitivna kontrola za inhibiciju. Negativna kontrola je sadržavala 100 posto DMSO umjesto ekstrakata. Procenat inhibicije aktivnosti tirozinaze izračunat je pomoću jednačine (1). IC50 je određen iz grafikona procenta inhibicije tirozinaze u odnosu na koncentraciju svakog ekstrakta.

4.9. Molecular Docking

4.9.1. Priprema liganda

Lista fitokemijskih jedinjenja iz tri najefikasnije biljke sa jakom inhibicijom protiv elastaze ili tirozinaze odabrana je iz objavljene literature [25–28,30–32,42,50–61] (Tabela S3). Sve hemijske strukture jedinjenja generisane su iz IUPAC naziva korišćenjem BIOVIA Draw 2019 (BIOVIA, San Diego, Kalifornija, SAD). Zatim su spojevi očišćeni od geometrije i sačuvana datoteka za formatiranje pdb koristeći Discovery Studio Visualizer (BIOVIA, San Diego, CA, USA). Ovi fajlovi su konvertovani u format pdbqt pomoću softvera AutoDockTools-1.5.6 (The Scripps Research Institute, San Diego, CA, USA).

4.9.2. Priprema proteina

Rendgenske kristalografske strukture elastaze (PDB ID: 3HGP) [62] i tirozinaze (PDB ID: 2Y9X) [63] su dobijene iz RCSB Protein Data Bank. Prije studije spajanja, korištenjem Discovery Studio Visualizera, molekule vode i originalni inhibitor uklonjeni su iz strukture proteina, isključujući Cu2 plus u strukturama tirozinaze. Ove proteinske strukture su pripremljene korištenjem pripremljene postavke proteina u softveru AutoDockTools-1.5.6. Svi nedostajući vodonici i Kollmanovi naboji su dodati proteinskoj strukturi i sačuvani u datoteci za formatiranje pdbqt za proučavanje pristajanja.

4.9.3. Molecular Docking

Studije molekularnog spajanja su izvedene korištenjem standardnog protokola u softveru AutoDockTools{{0}}.5.6. Mrežne lokacije su postavljene sa razmakom od 0,375 Å. Dimenzije x–y–z su postavljene na 40 × 40 × 40 tačaka za elastazu i 60 × 60 × 60 tačaka za tirozinazu. Mrežni okvir centara x, y i z bio je 12,58, 9,36 i 2,251 za elastazu i -10,044, -28,706 i -43,443 za tirozinazu. Studija spajanja je izvedena korištenjem Lamarckian genetskog algoritma (GA) sa zadanim parametrima, a rezultati pristajanja su analizirani korištenjem AutoDockTools-1.5.6 softvera i Discovery Studio Visualizer.

4.10. Statistička analiza

Svi eksperimenti su izvedeni u najmanje tri primjerka, a rezultati su predstavljeni kao srednja vrijednost ± standardna devijacija (SD). Vrijednosti IC50 analizirane su korištenjem softvera SigmaPlot verzije 12.0. Korelacija između različitih varijabli izražena je kao Pearsonovi koeficijenti korelacije (r). Korelacija je određena korištenjem GraphPad Prism-a (GraphPad Software Inc., San Diego, Kalifornija, SAD), a rezultati su smatrani statistički značajnim kada je p bio manji od 0.05 (p < 0.05).

5. Zaključci

Ukratko, naši su nalazi otkrili četiri tajlandske ljekovite biljke koje sadrže obećavajuće spojeve kandidate za razvoj kao sredstva protiv starenja kože. Ekstrakti listova A. occidentale i G. zeylanicum pokazali su snažno inhibitorno djelovanje i na enzime elastaze i na tirozinazu, dok su ekstrakti lista S. alata i ploda A. catechu pokazivali jače djelovanje samo prema elastazi, odnosno tirozinazi. Nekoliko jedinjenja dobijenih iz ovih biljaka takođe je potvrđeno za njihovu sposobnost da se vežu za oba enzima kroz molekularnu studiju spajanja. Štaviše, list G. zeylanicum, list A. occidentale i plod A. catechu poseduju značajan antioksidativni potencijal prema slobodnim radikalima sa visokim količinama fenola i flavonoida. Uzeti zajedno, plod A. catechu, list A. occidentale, list G. zeylanicum i list S. alata identificirani su kao prirodni izvori antioksidansa, anti-elastaze i anti-tirozinaze, koji se smatraju potencijalno korisnim za liječenje starenja kože.

Doprinosi autora:Konceptualizacija, AP; Istraga i formalna analiza, KC, SC (Sawarin Chumpolphant), PR i CS; Validacija, PR i AP; Vizualizacija, KC i SC (Sawarin Chumpolphant); Writing—Original Draft Preparation, KC, SC (Sawarin Chumpolphant), PR, CS i AP; Pisanje—pregled i uređivanje, KC, SC (Sawarin Chumpolphant), PR, CS, SC (Siriporn Chuchawankul), TT i AP; Nadzor, TT i AP; Software, SC (Siriporn Chuchawankul) i TT; Resursi, TT i AP; Pribavljanje sredstava, AP Svi autori su pročitali i složili se sa objavljenom verzijom rukopisa.

Finansiranje: Ovo istraživanje je finansijski podržao Tajlandski fond za naučna istraživanja i inovacije Univerziteta Chulalongkorn (CU_FRB65_hea (91)_198_53_01) i Ured stalnog sekretara Ministarstva Visoko obrazovanje, nauka, istraživanje i inovacije (grant br. RGNS 63- 003). KC se takođe želi zahvaliti na 90. godišnjici Fonda Univerziteta Chulalongkorn (Ratchadaphiseksomphot Endowment Fund).

Izjava o dostupnosti podataka:Nije primjenjivo.

Priznanja: Autori su zahvalni Maneewan Suwatronnakorn, Somchai Issaravanich i Chatrawee Duangjan na njihovoj ljubaznoj pomoći u pripremi biljnih ekstrakata. Također smo zahvalni Nijsiri Ruangrungsi i Chanidi Palanuvej na njihovoj pomoći u identifikaciji biljaka i Dicson Sheeja Malar na njihovoj pomoći oko engleskog uređivanja rukopisa. AP se zahvaljuje grantovima za razvoj novog nastavničkog osoblja, Ratchadaphiseksomphot Endowment Fund, Chulalongkorn Univerzitet.

Sukobi interesa:Autori izjavljuju da nema sukoba interesa.

Reference

1. Kligman, AM Koja je 'prava' funkcija kože? Exp. Dermatol. 2002, 11, 159.

2. Zhang, S.; Duan, E. Borba protiv starenja kože: Put od klupe do kreveta. Cell Transplant. 2018, 27, 729–738. [CrossRef] [PubMed]

3. Farage, MA; Miller, KW; Elsner, P.; Maibach, HI Karakteristike starenja kože. Adv. Njega rana 2013, 2, 5–10. [CrossRef] [PubMed]

4. Farage, MA; Miller, KW; Maibach, HI (Eds.) Degenerativne promjene u starenju kože. U Udžbeniku starenja kože; Springer: Berlin/Heidelberg, Njemačka, 2017; str. 15–30.

5. Vierkötter, A.; Krutmann, J. Utjecaj okoliša na starenje kože i etnički specifične manifestacije. Dermatoendokrinologija 2012, 4, 227–231. [CrossRef] [PubMed]

6. Shin, J.-W.; Kwon, S.-H.; Choi, J.-Y.; Na, J.-I.; Huh, C.-H.; Choi, H.-R.; Park, K.-C. Molekularni mehanizmi starenja kože i pristupi protiv starenja. Int. J. Mol. Sci. 2019, 20, 2126. [CrossRef]

7. Rinnerhaler, M.; Bischof, J.; Streubel, M.; Trost, A.; Richter, K. Oksidativni stres u starenju ljudske kože. Biomolecules 2015, 5, 545–589. [CrossRef]

8. Chatatikun, M.; Chiabchalard, A. Tajlandske biljke sa visokim nivoom antioksidansa, aktivnošću uklanjanja slobodnih radikala, anti-tirozinaznom i anti-kolagenaznom aktivnošću. BMC Complement. Altern. Med. 2017, 17, 487. [CrossRef]

9. Lephart, ED Starenje kože i oksidativni stres: Equol efekti protiv starenja putem biohemijskih i molekularnih mehanizama. Aging Res. Rev. 2016, 31, 36–54. [CrossRef]

10. Peng, H.-Y.; Lin, C.-C.; Wang, H.-Y.; Shih, Y.; Chou, S.-T. Efekti promjene melanogeneze eteričnog ulja Achillea millefolium L. i linalil acetata: Uključivanje oksidativnog stresa i JNK i ERK signalnih puteva u stanicama melanoma. PLOS ONE 2014, 9, e95186. [CrossRef]

11. Park, JH; Ku, HJ; Lee, JH; Park, J.-W. Nedostatak IDH2 ubrzava pigmentaciju kože kod miševa kroz pojačavanje melanogeneze. Redox Biol. 2018, 17, 16–24. [CrossRef]

12. Jiratchayamaethasakul, C.; Ding, Y.; Hwang, O.; Im, S.-T.; Jang, Y.; Myung, S.-W.; Lee, JM; Kim, H.-S.; Ko, S.-C.; Lee, S.-H. In vitro skrining inhibitornih i antioksidativnih aktivnosti elastaze, kolagenaze, hijaluronidaze i tirozinaze 22 ekstrakta halofitnih biljaka za nove kozmetičke preparate. Riba. Aquat. Sci. 2020, 23, 6. [CrossRef]

13. Thring, TS; Hili, P.; Naughton, DP Anti-kolagenazno, antielastazno i ​​antioksidativno djelovanje ekstrakata iz 21 biljke. BMC Complement. Altern. Med. 2009, 9, 27. [CrossRef] [PubMed]

14. Bravo, K.; Alzate, F.; Osorio, E. Plodovi odabranih divljih i kultiviranih andskih biljaka kao izvori potencijalnih spojeva s antioksidativnim djelovanjem i djelovanjem protiv starenja. Ind. Crops Prod. 2016, 85, 341–352. [CrossRef]

15. Kunwar, RM; Shrestha, KP; Bussmann, RW Tradicionalna biljna medicina u dalekom zapadnom Nepalu: farmakološka procjena. J. Ethnobiol. Etnomedicina 2010, 6, 35. [CrossRef] [PubMed]

16. Singh, G.; Passari, AK; Leo, VV; Mishra, VK; Subbarayan, S.; Singh, BP; Kumar, B.; Kumar, S.; Gupta, VK; Lalhlenmawia, H. Procjena varijabilnosti sadržaja fenola zajedno s antioksidativnim, antimikrobnim i citotoksičnim potencijalom odabranih tradicionalnih ljekovitih biljaka iz Indije. Front. Plant Sci. 2016, 7, 407. [CrossRef]

17. Byun, N.-y.; Heo, M.-R.; Yim, S.-H. Povezanost anti-bora i antioksidativnog djelovanja slobodnih radikala Areca orašastih plodova sa sadržajem fenola i flavonoida. Food Sci. Technol. 2021, 41, 1041–1049. [CrossRef]

18. Sellar, T.; Arulrajah, AA; Lanka, V. Uloga socijalne podrške u izgaranju na poslu u firmi za odjeću. Int. Autobus. Res. 2019, 12, 110–118. [CrossRef]

19. Vierkötter, A.; Schikowski, T.; Ranft, U.; Sugiri, D.; Matsui, M.; Krämer, U.; Krutmann, J. Izloženost česticama u zraku i vanjsko starenje kože. J. Investig. Dermatol. 2010, 130, 2719–2726. [CrossRef]

20. Lee, A.-Y. Abnormalnosti pigmentacije kože i njihov mogući odnos sa starenjem kože. Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 3727. [CrossRef]

21. Popoola, OK; Marnewick, JL; Rautenbach, F.; Ameer, F.; Iwuoha, EI; Hussein, AA Inhibicija oksidativnog stresa i enzima povezanih sa starenjem kože pomoću preniliranih halkona i drugih flavonoida iz Helichrysum teretifolium. Molecules 2015, 20, 7143–7155. [CrossRef]

22. Tu, Y.; Quan, T. Oksidativni stres i starenje vezivnog tkiva ljudske kože. Kozmetika 2016, 3, 28. [CrossRef]

23. Azmi, N.; Hashim, P.; Hashim, DM; Halimoon, N.; Majid, NMN Anti-elastaza, anti-tirozinaza i matriks metaloproteinaza-1 inhibitorna aktivnost ekstrakta glista kao potencijalnog novog sredstva protiv starenja. Asian Pac. J. Trop. Biomed. 2014, 4, S348–S352. [CrossRef] [PubMed]

24. Rangsinth, P.; Sillapachaiyaporn, C.; Nilkhet, S.; Tencomnao, T.; Ung, AT; Chuchawankul, S. Bioaktivna jedinjenja dobijena od gljiva potencijalno služe kao inhibitori SARS-CoV-2 glavne proteaze: pristup in silico. J. Tradit. Dopuna. Med. 2021, 11, 158–172. [CrossRef] [PubMed]

25. Konan, NA; Bacchi, EM Antiulcerogeno djelovanje i akutna toksičnost hidroetanolnog ekstrakta iz listova indijskog oraha (Anacardium occidentale L.). J. Ethnopharmacol. 2007, 112, 237–242. [CrossRef] [PubMed]

26. Ajileye, O.; Obuotor, E.; Akinkunmi, E.; Aderogba, M. Izolacija i karakterizacija antioksidativnih i antimikrobnih jedinjenja iz ekstrakta lista Anacardium occidentale L. (Anacardiaceae). J. King Saud Univ. Sci. 2015, 27, 244–252. [CrossRef]

27. Chotphruethipong, L.; Benjakul, S.; Kijroongrojana, K. Optimizacija ekstrakcije antioksidativnih fenolnih jedinjenja iz listova indijskog oraha (Anacardium occidentale L.) primenom metodologije površine odgovora. J. Food Biochem. 2017, 41, e12379. [CrossRef]

28. Moriyama, H.; Iizuka, T.; Nagai, M.; Miyazaki, H.; Satoh, T. Protuupalna aktivnost termički obrađenog ekstrakta lista Cassia alata i njegovog flavonoidnog glikozida. Yakugaku Zasshi 2003, 123, 607–611. [CrossRef]

29. Chatatikun, M.; Yamauchi, T.; Yamasaki, K.; Aiba, S.; Chiabchalard, A. Antimelanogeni efekat listova Croton roxburghii i Croton supstrata u -MSH stimulisanim B16F10 ćelijama. J. Tradit. Dopuna. Med. 2019, 9, 66–72. [CrossRef]

30. Wang, R.; Pan, F.; Ona.; Kuang, F.; Wang, L.; Lin, X. Ekstrakti sjemena Arecanut (Areca catechu L.) ekstrahirani konvencionalnim i ekološki prihvatljivim rastvaračima: Odnos između fitokemijskih sastava i bioloških aktivnosti multivarijantnom analizom. J. Appl. Res. Med. Aromat. Biljke 2021, 25, 100336. [CrossRef]

31. Nonaka, G.-i.; Hsu, F.-L.; Nishioka, I. Strukture dimernih, trimernih i tetramernih procijanidina iz Areca catechu LJ Chem. Soc. Chem. Commun. 1981, 15, 781–783. [CrossRef]

32. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Zhang, S.; Wink, M.; Tencomnao, T. Anacardium Occidentale, L. Ekstrakti listova štite od glutamata/H2O{2}}indukovane oksidativne toksičnosti i izazivaju rast neurita: uključenost signalnog puta SIRT1/Nrf2 i teneurina 4 transmembranskog proteina. Front. Pharmacol. 2021, 12, 627738. [CrossRef] [PubMed]

33. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Gu, X.; Zhang, S.; Wink, M.; Tencomnao, T. Glochidion zeylanicum ekstrakti listova pokazuju svojstva koja produžavaju životni vijek i imaju svojstva otpornosti na oksidativni stres kod Caenorhabditis elegans preko DAF-16/FoxO i SKN-1/Nrf-2 signalnih puteva. Phytomedicine 2019, 64, 153061. [CrossRef] [PubMed]

34. Oladeji, OS; Adelowo, FE; Oluyori, AP; Bankole, DT Etnobotanički opis i biološke aktivnosti Senna alata. Evid. Based Complement. Alternat. Med. 2020, 2020, 2580259. [CrossRef] [PubMed]

35. Peng, W.; Liu, Y.-J.; Wu, N.; Sun, T.; On, X.-Y.; Gao, Y.-X.; Wu, C.-J. Areca catechu L. (Arecaceae): Pregled njene tradicionalne upotrebe, botanike, fitohemije, farmakologije i toksikologije. J. Ethnopharmacol. 2015, 164, 340–356. [CrossRef]

37. Salehi, B.; Konovalov, DA; Fru, P.; Kapewangolo, P.; Peron, G.; mr Ksenija; Cardoso, SM; Pereira, OR; Nigam, M.; Nicola, S. Areca catechu—Od farme do hrane i biomedicinske primjene. Phytother. Res. 2020, 34, 2140–2158. [CrossRef]

37. Verma, DK; Bharat, M.; Nayak, D.; Shanbhag, T.; Shanbhag, V.; Rajput, RS Areca catechu: Učinak topikalnog etanolnog ekstrakta na zacjeljivanje opekotina kod albino pacova. Int. J. Pharmacol. Clin. Sci. 2012, 1, 74–78.

38. Pithayanukul, P.; Nithitanakool, S.; Bavovada, R. Hepatoprotektivni potencijal ekstrakata iz sjemena Areca catechu i orašastih plodova Quercus infectoria. Molecules 2009, 14, 4987–5000. [CrossRef]

40. Salehi, B.; Gültekin-Özgüven, M.; Kirkin, C.; Özçelik, B.; Morais-Braga, MFB; Carneiro, JNP; Bezerra, CF; Silva, TGd; Coutinho, HDM; Amina, B. Antioksidativni, antimikrobni i antikancerogeni efekti biljaka Anacardium: etnofarmakološka perspektiva. Front. Endocrinol. 2020, 11, 295. [CrossRef]

40. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Zhang, S.; Gu, X.; Wink, M.; Tencomnao, T. Neuroprotektivni efekti ekstrakta lista Glochidion zeylanicum protiv toksičnosti izazvane H2O2/glutamatom u kultiviranim neuronskim ćelijama i A-indukovane toksičnosti kod Caenorhabditis elegans. Biologija 2021, 10, 800. [CrossRef]

41. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Gu, X.; Wink, M.; Tencomnao, T. Produženje životnog vijeka i svojstva otpornosti na oksidativni stres ekstrakta listova iz Anacardium occidentale L. u Caenorhabditis elegans. Oksid. Med. Cell. Longev. 2019, 2019, 9012396. [CrossRef]

42. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Gu, X.; Zhang, S.; Wink, M.; Tencomnao, T. Podaci o efektima ekstrakta listova Glochidion zeylanicum u Caenorhabditis elegans. Podaci 2019, 26, 104461. [CrossRef] [PubMed]

43. Sugumar, M.; Doss, DVA; Maddisetty, PP Hepato-renalni zaštitni efekti hidroetanolnog ekstrakta Senna alata na enzimske i neenzimske antioksidativne sisteme kod dijabetičkih pacova izazvanih streptozotocinom. Integr. Med. Res. 2016, 5, 276–283. [CrossRef] [PubMed]

44. Aryal, S.; Banija, MK; Danekhu, K.; Kunwar, P.; Gurung, R.; Koirala, N. Ukupni sadržaj fenola, sadržaj flavonoida i antioksidativni potencijal divljeg povrća iz zapadnog Nepala. Biljke 2019, 8, 96. [CrossRef] [PubMed]

45. Panche, A.; Diwan, A.; Chandra, S. Flavonoidi: Pregled. J. Nutr. Sci. 2016, 5, e47. [CrossRef] [PubMed]

47. Tazeddinova, D.; Rahman, M.; Hamdan, SB; Matin, MM; Bin Bakri, MK; Rahman, MM Asocijacije polifenola na bazi biljaka sa proteinima: Prospektivni pregled. BioResources 2022, 17, 1–25. [CrossRef]

47. Prasansuklab, A.; Tencomnao, T. Ekstrakt lista Acanthus ebracteata pruža zaštitu neuronskih stanica od ozljeda oksidativnog stresa uzrokovanih glutamatom. BMC Complement. Altern. Med. 2018, 18, 278. [CrossRef]

48. Abhijit, S.; Manjushree, D. Anti-hijaluronidaza, anti-elastazna aktivnost Garcinia indica. Int. J. Bot. 2010, 6, 299–303.

49. Widowati, W.; Rani, AP; Hamzah, RA; Arumwardana, S.; Afifa, E.; Kusuma, HSW; Rihibiha, DD; Nufus, H.; Amalia, A. Antioksidativni i antiaging testovi ekstrakta Hibiscus sabdariffa i njegovih spojeva. Nat. Prod. Sci. 2017, 23, 192–200. [CrossRef]

50. Fernand, VE; Dinh, DT; Washington, SJ; Fakayode, SO; Losso, JN; van Ravenswaay, RO; Warner, IM Određivanje farmakološki aktivnih spojeva u ekstraktima korijena Cassia alata L. korištenjem tečne hromatografije visokih performansi. Talanta 2008, 74, 896–902. [CrossRef]

51. Jain, V.; Garg, A.; Parascandola, M.; Chaturvedi, P.; Khariwala, SS; Stepanov, I. Analiza alkaloida u proizvodima koji sadrže orašaste plodove tečnom hromatografijom-tandemskom masenom spektrometrijom. J. Agric. Food Chem. 2017, 65, 1977–1983. [CrossRef]

52. Liu, A.; Xu, L.; Zou, Z.; Yang, S. Studije o hemijskim sastojcima iz listova Cassia alata. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 2009, 34, 861–863. [PubMed]

53. Ming-Yue, W.; Jin-Hui, L.; Jian-Guo, L. Određivanje polifenola u Areca catechu pomoću HPLC. Nat. Prod. Res. Dev. 2011, 23, 101.

54. Mohammed, AR; Ali, A.; Aboul-Enein, S.; Mohamed, F.; Abou, E.; Magdy, M.; Mohammed, A. Fitokemijsko, citotoksično i antioksidativno istraživanje listova Cassia alata koji rastu u Egiptu. J. Innov. Pharm. Biol. Sci 2017, 4, 97–105.

55. Okpuzor, J.; Ogbunugafor, H.; Kareem, G.; Igwo-Ezikpe, M. In vitro istraživanje antioksidativnih fenolnih spojeva u ekstraktima Senna alata. Res. J. Phytochem. 2009, 3, 68–76. [CrossRef]

56. Pongnimitprasert, N.; Wadkhien, K.; Chinpaisal, C.; Satirafan, M.; Wetwitayaklung, P. Protuupalni efekti rheina i sirovih ekstrakata iz Cassia alata L. u HaCaT ćelijama. Sci. inž. Health Stud. 2018, 12, 19–32.

57. Promgool, T.; Pancharoen, O.; Deachathai, S. Antibakterijska i antioksidativna jedinjenja iz Cassia alata Linn. Songklanakarin J. Sci. Technol. 2014, 36, 459–463.

58. Singh, B.; Nadkarni, JR; Vishwakarma, RA; Bharate, SB; Nivsarkar, M.; Anandjiwala, S. Hidroalkoholni ekstrakt listova Cassia alata (Linn.) i njegovo glavno jedinjenje rhein pokazuju antialergijsko djelovanje putem stabilizacije mastocita i inhibicije lipoksigenaze. J. Ethnopharmacol. 2012, 141, 469–473. [CrossRef]

59. Wu, Q.; Yang, Y.; Simon, JE Kvalitativno i kvantitativno HPLC/MS određivanje proantocijanidina u oraščiću oraha (Areca catechu). Chem. Biodivers. 2007, 4, 2817–2826. [CrossRef]

60. Zhang, W.-M.; Huang, W.-Y.; Chen, W.-X.; Han, L.; Zhang, H.-D. Optimizacija uslova ekstrakcije polifenola iz sjemena areke i procjena njihove antioksidativne aktivnosti. Molecules 2014, 19, 16416–16427. [CrossRef]

61. Zhang, X.; Mei, W.; Zeng, Y.; Liu, J. Fenolni sastojci iz plodova Areca catechu i njihova antibakterijska aktivnost. J. Trop. Subtrop. Bot. 2009, 17, 74–76.

62. Tamada, T.; Kinoshita, T.; Kurihara, K.; Adachi, M.; Ohhara, T.; Imai, K.; Kuroki, R.; Tada, T. Kombinovana neutronska i rendgenska analiza inhibirane elastaze visoke rezolucije potvrđuju oksianionsku rupu na aktivnom mjestu, ali suzbija vodoničnu vezu niske barijere. J. Am. Chem. Soc. 2009, 131, 11033–11040. [CrossRef] [PubMed]

63. Ismaya, WT; Rozeboom, HJ; Weijn, A.; Mes, JJ; Fusetti, F.; Wichers, HJ; Dijkstra, BW Kristalna struktura tirozinaze gljive Agaricus bisporus: Identitet tetramerskih podjedinica i interakcija s tropolonom. Biochemistry 2011, 50, 5477–5486. [CrossRef] [PubMed]

Odricanje od odgovornosti/Napomena izdavača:Izjave, mišljenja i podaci sadržani u svim publikacijama su isključivo oni pojedinačnih autora i saradnika, a ne MDPI i/ili urednika. MDPI i/ili urednik(i) odriču se odgovornosti za bilo kakvu povredu ljudi ili imovine koja je rezultat ideja, metoda, uputstava ili proizvoda navedenih u sadržaju.

【Za više informacija:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】