Antihiperglikemijski i hipopolipidemijski efekti Cistanche Tubulosa

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Antihiperglikemijski i hipolipidemijski učinci Cistanche tubulosain tip 2 dijabetičkih db/db miševa

Wen-Ting Xiong, et al

Abstract

Etnofarmakološka relevantnost:Osušena sočna stabljikaCistanchetubulosa (Schenk) R. Wight je jedna komponenta recepata tradicionalne kineske medicine za dijabetes. Međutim, do sada nije bilo modernih naučnih izvještaja koji bi potvrdili ovu tradicionalnu tvrdnju za vrstu Cistanche. Tako smo istražili efekteCistanchetubulosana homeostazu glukoze i lipide u serumu kod mužjaka BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J (db/db) miševa, model dijabetesa tipa 2.

Materijali i metode:Sadržaj verbaskozida i ehinakozidaCistanchetubulosaprah je procijenjen pomoću HPLC. Ukupan sadržaj fenola, sadržaj polisaharida i antioksidativna aktivnostCistanchetubulosaprah je također ocijenjen. Zatim, različite dozeCistanche tubulosa(ekvivalentno 120,9, 72,6 ili 24,2 mg verbaskozida/kg) davani su oralno jednom dnevno tokom 45 dana mužjacima db/dbmice. Db/þ miševi su korišćeni kao normalne kontrole. Tijekom eksperimenta mjereni su tjelesna težina, glukoza u krvi natašte, postprandijalna glukoza u krvi i testovi tolerancije na inzulin. U vreme žrtvovanja, krv je sakupljena za merenje nivoa insulina, homeostatskog modela za procenu insulinske rezistencije (HOMA-IR), i nivoa ukupnog holesterola, triglicerida, HDL-c, LDL-c i VLDL-c; livenski mišići su sakupljeni za mjerenje nivoa glikogena.

Rezultati: Cistanchetubulosaznačajno potisnu povišene razine glukoze u krvi natašte i postprandijalne glukoze u krvi, poboljšaju inzulinsku rezistenciju i dislipidemiju i potisnu gubitak tjelesne težine indb/db miševa. Kako god,Cistanchetubulosanisu značajno uticali na nivoe insulina u serumu ili na nivoe glikogena u jetri i mišićima.

zaključak:Ova studija pruža naučne dokaze za tradicionalnu upotrebuCistanchetubulosaza liječenje dijabetesa, što sugerira daCistanchetubulosaima potencijal za razvoj u funkcionalni sastojak hrane ili lijek za sprječavanje hiperglikemije i liječenje hiperlipidemije.

Ključne riječi:Cistanchetubulosa, dijabetes tipa 2,Antihiperglikemijski efekat, Hipolipidemijski efekat

1. Uvod

Dijabetes melitus (DM) je progresivan i složen metabolički poremećaj koji se uglavnom karakterizira abnormalno visokim razinama glukoze u krvi (hiperglikemija) (Tiwari i Rao, 2002; Stumvollet al., 2005; Nathan et al., 2009). Otprilike 90 posto od 347 miliona pacijenata sa dijabetesom širom svijeta ima DM tipa 2 (nezavisan od insulina) (Danaei et al., 2011). Tri glavna metabolička defekta dosljedno doprinose hiperglikemiji kod pacijenata sa DM tipa 2: manjkava sekrecija inzulina, visoka proizvodnja glukoze u jetri i rezistencija na inzulin (Bavenholm et al., 2001). DM tipa 2 može skratiti očekivani životni vijek i predstavlja značajan medicinski i ekonomski teret (Gakidou et al., 2011.)

Patogeneza DM tipa 2 je multifaktorska i povezana je i sa genetskim faktorima i faktorima načina života (Stumvoll et al., 2005). Intervencije u načinu života u kombinaciji sa oralnimanti-hiperglikemijskilijekovi su tipična metoda liječenja DM tipa 2. Oralni drogsexert ananti-hiperglikemijskiefekat ublažavanjem tri glavna metabolička defekta koji uzrokuju hiperglikemiju ili smanjenjem postprandijalnog povećanja nivoa glikemije kroz ometanje probave i apsorpcije ugljikohidrata u crijevima.

Iako su višestruke klase efikasnih lijekova postale priznati izbor za medicinsku terapiju kod većine pacijenata sa DM tipa 2, nekoliko od ovih sintetičkih lijekova ima ozbiljne nuspojave. Na primjer, rosiglitazon i pioglitazon povećavaju incidencu infarkta miokarda, kongestivne srčane insuficijencije i perifernog edema povezan sa povećanim rizikom od karcinogeneze, pa čak i smrti nakon dugotrajne upotrebe (Nissen i Wolski, 2007; Zhang et al., 2007; Home et al., 2009). Stoga postoji kritična potreba za otkrivanjem alternativnih agenasa koji bi imali antihiperglikemijsku aktivnost, ali bi imali manje nuspojava. U poređenju sa sintetičkim hemikalijama, prirodno dobijenimantihiperglikemijskiagensi, kao što su bilje i tradicionalni lijekovi, imaju dugu povijest upotrebe i mogu predstavljati općenito sigurne potencijalne izvore novihantihiperglikemijskidroge (Yeh et al., 2003).

Cistanche, rod parazitskih biljaka koje pripadaju porodici Orobanchaceae, obično se koristi kao tradicionalni lijek za liječenje poremećaja bubrega i neplodnosti, prema Kineskoj farmakopeji (Kineska farmakopejska komisija, 2010.). Kao što je zabilježeno u knjigama kineske medicine kao što su BenCao TuJing i Nature of Drug, rod Cistanche je također kuhan s ovčetinom, krompirom ili pirinčem kako bi se proizvela tonik za liječenje oštećenja uzrokovanih prenaprezanjem stotinama godina, što sugerira da je rod Cistanche siguran za uzimati oralno.

U tradicionalnoj kineskoj medicini, DM se naziva simptom "Xiao Ke" i vekovima se lečio kineskim biljem. Osušena sočna stabljika vrste Cistanche koja se tradicionalno koristi kao komponenta devet recepata protiv dijabetesa ("Xiao Ke Fang") u knjizi tradicionalne kineske medicine Sengji Zonglu. Međutim, do sada nije bilo modernih naučnih izvještaja koji bi potvrdili ovu tradicionalnu tvrdnju za vrste Cistanche.

Cistanchetubulosa(Schenk) R. Wight, vrsta Cistanche koja parazitira na korijenu biljke Tamarix – koja se uglavnom uzgaja u pustinji Taklamakan – nedavno se koristila za proizvodnju instant čaja koji se koristi kao funkcionalna hrana (DaZhongWeiShengBao, 2010; Baidu Pedia, 2011) .

Cistanchetubulosasadrži značajne količine feniletanoidnih glikozida (PhG), iridoida, lignana, alditola, oligosaharida, polisaharida i hlapljivih jedinjenja kao što su palmitika kiselina i linolna kiselina (Song et al., 2000; Jiang i Tu, 20). Smatra se da su glavne aktivne komponente vrste Cistanche PhGs (Xie et al., 2006; Jiang i Tu, 2009).Cistanchetubulosai njegove komponente, kao što su PhGs, polisaharidi i polifenoli, pokazuju dobre antioksidativne učinke (Denget al., 2004; Pellati et al., 2004; Frum et al., 2007; Sui et al., 2011; Wang et al., 2011.), antihipertenzivni (Ahmad et al., 1995.) i hipo kolesterol (Shimoda et al., 2009.). Brojni izvještaji pokazuju da PhG, polisaharidi i polifenoli djelujuantihiperglikemijskidjeluju ili imaju povoljan utjecaj na tip 2 DM kroz uklanjanje slobodnih radikala i modulaciju oksidativnog stresa izazvanog glukozom (Pinto et al., 2010; Saltiel, 2001; Gulati et al., 2012). Ove komponente i bioaktivnostCistanchetubulosasugeriraju da se potencijalno može koristiti za liječenje DM tipa 2. Zbog nepostojanja izvještaja koji opisuju efekteCistanchetubulosau liječenju DM-a, smatrali smo vrijednim istražiti antidijabetičku aktivnostCistanchetubulosa. Stoga smo ispitali efekteCistanchetubulosao hiperglikemiji i dislipidemiji kod BKSdb/db miševa (BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J, Jackson Laboratory kataloški broj 00642), model tipa 2 DM koji pokazuje mnoge karakteristike humanog DM uključujući progresivnu hiperglikemiju i inzulinsku rezistenciju et al., 1966; Nishina et al., 1994; Uchida et al., 2005; Srinivasan i Ramarao, 2007).

2. Materijali i metode

2.1. Hemikalije

Verbaskozid (čistoća 493 posto) i ehinakozid (čistoća 493 posto) kupljeni su od Nacionalnog instituta za kontrolu hrane i lijekova (Peking, Kina). HPLC grade metanol je nabavljen od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, SAD). Akarboza je kupljena od Bayera (West Haven, CT, SAD). Prečišćena voda je proizvedena korišćenjem aMillipore Milli-Q Integral 3 sistema i Q-POD Milli-Q sistema (Bedford, MA, SAD).

2.2. Cistanche tubulosa pripravak u prahu

Osušene sočne stabljikeCistanchetubulosa(Šifra uzorka 109092, uzgajan u Hetianu, Xinjiang, Kina) kupljeni su od Xinjiang Guru Biology Co. Ltd. (Hetian, Xinjiang, Kina). Osušeni korijeni su usitnjeni u prah, prosijani kroz 200-mrežasto sito, pomiješani temeljno, zapečaćen u malim pakovanjima da se prašak izoluje od svjetlosti i vlage i čuva na 4 1C.

2.3. Identifikacija Cistanche tubulosa

Osušenu sukulentnu stabljiku uzorka 109092 identifikovali su prema njihovim morfološkim karakteristikama prof. DeXiang Gu i prof. Xin Liu, koji su stručnjaci za vrste Cistanche. Uzorci su dalje identifikovani sekvenciranjem DNK. Ukupna genomska DNK je izolovana iz uzorka 109,092 korišćenjem AxyPrep™ MultisourceGenomic DNK kompleta (Axygen, Kalifornija, SAD). ITS regija koja sadrži fragment 5.8S rDNA je amplificirana korištenjem prajmernih sekvenci ITS1/ITS2 5′ CGT AAC AAG GTT TCC GTA GAA 3′ i 5′ TTA TTG ATA TGCTTA AAC TCA GCG GG 3′ (BGI Genomics, Shenzhen, Kina), metodom koju su opisali Schneeweiss et al. (Schneeweiss et al., 2004). Amplificirana DNK je sekvencirana pomoću BGI (BGI Genomics, Shenzhen, Kina), a rezultat je upoređen saCistanchetubulosa5.8s rDNK sekvenca na GenBank-u.

2.4. HPLC analiza

Dva PhG-a, ehinakozid i verbaskozid, korišteni su kao standardi kvaliteta zaCistanchetubulosa, prema Kineskoj farmakopeji (Kineska farmakopejska komisija, 2010.). HPLC je najčešće korišten za kvalitativno i kvantitativno određivanje PhG-a. Dakle, sadržaj verbaskozida i ehinakozidaCistanchetubulosasu određene prema našoj prethodno objavljenoj HPLC metodi (Zhao et al., 2011). Ukratko, 0,1 gCistanchetubulosaprah je dodan u 1{{10}} ml prečišćene vode i intenzivno miješan vorteksom na orbitalnom šejkeru (Vortex-Genie 2, Scientific Industries, Bohemia, New York, USA) 10 min na sobnoj temperaturi. Čvrsta supstanca je ponovo ekstrahovana dva puta pod istim uslovima. Ekstrakti su sjedinjeni, podešeni na 50 ml i centrifugirani na 12,000g 5 min. Supernatant je filtriran kroz filter šprica od politetrafluoroetilena (PTFE) sa 0,45 μm pora (Pall, Ann Arbor, MI, USA). Zatim je 20 ul supernatanta ubrizgano u HPLC sistem (binarna HPLC pumpa 1525, detektor refrakcionog indeksa 2414, detektor fotodiodnog niza 2996; Waters, Milford, MA, SAD) koji je uključivao kolonu Symmetry C18 (4,6 mm 5 250 mm; Vode) i Guard stub (3,9 mm 20 mm, 5 mm; Vode); sistem je kontrolisan korišćenjem EmpowerPros softvera (Waters, Milford, MA, USA) sa brzinom protoka od 1 ml/min na 30 1C. Mobilna faza je napravljena miješanjem rastvarača A (0,5 posto (V/V) vodeni rastvor sirćetne kiseline) i rastvarača B (metanol) da bi se formirao linearni gradijent od 25-40 posto B za 0-10 minuta. Vremena retencije za ehinakozid i verbaskozid bila su 10,4 min i 13,6 min, pri maksimalnoj UV apsorbanciji od 330 nm.

2.5. Analiza ukupnog sadržaja fenola, sadržaja polisaharida i antioksidativne aktivnosti Cistanche tubulosa

2.5.1. Priprema uzorka

CistanchetubulosaEkstrakt je pripremljen sa prečišćenom vodom po našoj prethodno objavljenoj metodi (Zhao et al., 2011) uz manje modifikacije, za određivanje ukupnog sadržaja fenola, sadržaja polisaharida i antioksidativne aktivnosti (Sl. 1). Ukratko, 1 gCistanchetubulosaprašak je dodan u 15 ml prečišćene vode na sobnoj temperaturi, intenzivno miješan vorteksom koristeći orbitalni mućkač tokom 5 minuta, a supernatant je rekuperiran centrifugiranjem na 3000g tokom 15 minuta. Talog je ponovo ekstrahovan dva puta pod istim uslovima. Kombinovani supernatant je podešen na 50 ml sa prečišćenom vodom i propušten kroz PTFE špric filter (Pall) sa 0,45 μm porama pre analize.

2.5.2. Analiza ukupnog sadržaja fenola

Ukupni sadržaj fenola je određen korištenjem Folin-Ciocalteureagensa i galne kiseline kao referentnog spoja, kako su opisali Singleton i Rossi (Dubois et al., 1956; Singleton i Rossi, 1965) uz manje modifikacije. Ukratko, 0.1 mLCistanchetubulosaekstrakt je pomešan sa {{0}}.9 mL prečišćene vode i 5 mL Folin–Ciocalteu reagensa (prethodno razblaženog 10- puta destilovanom vodom), ostavljeno da odstoji na 25 1C za 3,5 min, a zatim je 4 mL rastvora natrijumbikarbonata (7,5% w/v) dodato u smjesu i inkubirano na {{10}}C 60 min. Apsorpcija je izmjerena na 765 nm pomoću spektrofotometra (Perkin Elmer λ 25 UV–visible, Waltham, MA, SAD). Ukupni sadržaj fenola je određen korištenjem standardne krive napravljene sa galnom kiselinom (0-0,6 mg/mL) kao standardom. Rezultati su izračunati kao miligram ekvivalenta galne kiseline (GAE)/1 gCistanchetubulosasirovi prah. Svi testovi su ponovljeni četiri puta.

2.5.3. Analiza sadržaja polisaharida

Sadržaj polisaharida uCistanchetubulosamjeren je metodom fenol-sumporna kiselina (Dubois et al., 1951; Duboiset al., 1956). Ukratko, 1 ml odgovarajuće razrijeđenog ekstrakta Cistanchetubulosa i 0.5 mL otopine fenola stavljeni su u epruvete sa navojnim poklopcem, koje su zatvorene i miješane vorteksom. Zatim je 2,5 ml koncentrirane sumporne kiseline dodano direktno na površinu tekućine u roku od 5 s. Epruvete su zatim zatvorene, vorteks miješane 5 s, inkubirane 2 min na 100 1C i ostavljene da se ohlade na sobnu temperaturu prije analize. Apsorpcija je izmjerena na 490 nm pomoću spektrofotometra (Perkin Elmer λ25 UV – vidljivo) naspram 70 posto metanolnog slijepog uzorka. Sadržaj polisaharida je određen korištenjem standardne krive napravljene sa glukozom (0-100 mg/mL) kao standardom. Rezultati su izračunati kao postotak polisaharida/Cistanchetubulosasirovi prah. Svi testovi su ponovljeni tri puta.

2.5.4. Analiza ukupne antioksidativne aktivnosti

Antioksidativna aktivnostCistanchetubulosaekstrakt, akarboza i rosiglitazon određeni su testom 2,2′-amino-di(2-etil benzotiazolin sulfonske kiseline-6)amonijum soli (ABTS) i testom redukcije antioksidativne moći željeznih jona (Fe3þ) ( FRAP) korištenjem komercijalnih kompleta (Beyotime, Haimen, Kina). Sa odgovarajućim oksidansima, ABTS se može oksidirati u zeleni ABTS þ; antioksidansi mogu inhibirati ovaj proces. Ukupna antioksidativna aktivnost antioksidanata može se odraziti apsorbancijom ABTS þ na 734 nm. Apsorbanca je izmjerena na 734 nm (ABTS) pomoću čitača mikroploča (Epoch, Bio-Tek, Richmond, VT, USA), sa Troloxom (ABTS) kao standard antioksidansa. Rezultati ABTS testa izračunati su kao mM Trolox ekvivalentni antioksidativni kapacitet (TEAC)/1 g praha.

U kiselim uslovima, antioksidansi mogu vratiti feritripiridiltriazin (Fe3þ-TPTZ) u plavi Fe2þ-TPTZ. Ukupna antioksidativna aktivnost antioksidansa može se odraziti apsorbancijom Fe2þ-TPTZ na 593 nm. Apsorpcija je izmjerena na 593 nm (FRAP) pomoću čitača mikroploča (Epoch), sa FeSO4 (FRAP) kao antioksidativnim standardom. Rezultati FRAP testa izračunati su kao mM FeSO4 ekvivalentni antioksidativni kapacitet (FEAC)/1 g praha. Svi testovi su ponovljeni četiri puta.

2.6. Efekti Cistanche tubulosa na hiperglikemiju kod db/db miševa

2.6.1. Životinje i grupe tretmana

Mužjaci BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J (db/db) miševa i njihovi nedijabetički heterozigoti u leglu (db/þ) ljubazno su dostavljeni u dobi od 5-6 sedmica od strane Nacionalnog resursnog centra za model miševa mutanta Centar za istraživanje životinja Univerziteta Nanjing (Nanjing, Kina). Briga o životinjama i eksperimentalni postupci odobreni su od strane Laboratorijskog odbora za etiku na životinjama Škole prirodnih znanosti Univerziteta Sun Yat-sen (šifra odobrenja 0046500), a izvedeni su u skladu sa Pravilnikom o eksperimentima na životinjama Kine. Životinje su bile smještene u prostoriji bez patogena (SPF) klase 2272 1C na 6075 posto vlažnosti u ciklusu svjetlosti i mraka od 12 sati i hranjene prečišćenom AIN-93G prehranom (trofična hrana za životinje sa visokim sadržajem). tech Co., Ltd., Nantong, Kina) i osigurao pročišćenu vodu ad libitum.

Sedam dana nakon dolaska, nedijabetičkim db/þ miševima je data pročišćena voda (vozilo) kao normalna kontrolna grupa za dijabetičarske grupe (n=7), dok su dijabetički db/db miševi izmjereni i nasumično podijeljeni u 6 grupa (n=8) radi istraživanja efekteCistanchetubulosakod dijabetičkih db/db miševa tipa 2 (Tabela 1). Mišima db/þ oralno je davan vehikulum, a db/db miševima oralno je davan vehikulum, rosiglitazon (0,52 mg/kg/dan), akarboza (19,5 mg/kg/dan) ili tri dozeCistanchetubulosa(ekvivalentno 120,9, 72,6 ili 24,2 mg verbaskozida/kg/dan i naziva se CT120.9, CT72.6 ili CT24.2, respektivno) u trajanju od 45 dana. Doze odCistanchetubulosapostavljeni su prema dozi sirovog praha koju preporučuje Farmakopeja Narodne Republike Kine (PPRC);Cistanchetubulosadoze od 120,9, 72,6 i 24,2 mg verbaskozida/kg/dan što odgovara 5- puta, 3- puta, i 1- puta razblaženjima doze sirovog praha koju preporučuje PPRC. Svi testni uzorci za oralnu primenu rastvoreni su u pročišćenoj vodi u odgovarajućim koncentracijama kako bi se dale slične količine test uzoraka miševima iste telesne težine. Ukupni primijenjeni volumeni su bili o1 mL, a testni uzorci su oralno davani svakoj grupi miševa svaki dan između 16:30 i 17:30 tokom 45 dana. Telesna težina i nivoi glukoze u krvi su praćeni tokom eksperimentalnog perioda. Na kraju eksperimenta (50. dan), miševi su postili 14 h, a uzorci krvi su sakupljeni iz oftalmološke vene, inkubirani na sobnoj temperaturi 30 minuta, centrifugirani i uzorci seruma su pohranjeni na 70 1C za dalji test. Nakon toga, miševi su eutanazirani. Jetra i skeletni mišići su sakupljeni, isprani u ledeno hladnoj slanoj otopini da bi se uklonila krv, naglo zamrznuti u tečnom dušiku i pohranjeni na 70 1C za daljnje ispitivanje.

2.6.2. Analiza nivoa glukoze u krvi natašte (FBG), inter-peritonealinsulin test tolerancije (ITT) i nivoa insulina u serumu natašte (FINS)

Nivo glukoze u krvi natašte je mjeren nakon 14 h posta prije početka eksperimenta na životinjama (0 dana), 1. dana {{10}} i svakih 5 dana tokom 20-45 dana eksperimenta korištenjem sistema za praćenje glukoze u krvi (ACCU-CHEK Active, Roche DiagnosticsGmbH, Mannheim, Njemačka). Procentualna povećanja vrijednosti FBG (vrijednosti porasta procenta FBG: procenat povećanja FBG) na dan x (dan 20-45) izračunata su korištenjem (BGdan x BGdan 0)/BG0 dan 100, kako bi se predstavila povećanja vrijednosti FBG za svaki grupe u poređenju sa njihovim početnim vrednostima FBG. Nivoi glukoze u krvi nakon obroka određivani su 120 minuta nakon oralne primjene glukoze (2 g/kg TM) 40. dana.

ITT je izveden 45. dana eksperimenta, nakon gladovanja preko noći (14 h). Nivo glukoze u krvi iz vene repa izmjeren je prije injekcije insulina (0 min) i na 30 min, 60 min nakon interperitonealne injekcije insulina (0,1 IU/kg TM). Odgovori glukoze tokom ITT su izražene kao integrisane površine ispod krive za insulin (AUCinsulin), izračunate pomoću trapeza (Vishwakarma et al., 2003). Na kraju eksperimenta, nivoi insulina u serumu natašte su analizirani korišćenjem ELISA kompleta za pacov/mišji inzulin iz Milliporea (Bedford, MA, SAD); uzorci seruma su pripremljeni prema uputama iz kompleta. Indeks homeostatskog modela procjene inzulinske rezistencije (HOMA-IR) izračunat je korištenjem sljedeće formule: HOMA-IR¼inzulin natašte (ng/ml) glukoza u krvi natašte (mmol/L)/22,5 (Matthews et al., 1985).

2.6.3. Analiza nivoa lipida u serumu

Koncentracije ukupnog holesterola u serumu (TC), holesterola lipoproteina visoke gustine (HDL-c) i triglicerida (TG) određene su korišćenjem komercijalnih enzimskih kompleta (Biosino Biotechnology &Science Inc., Peking, Kina). Nivo holesterola lipoproteina niske gustine (LDL-c) izračunat je kao TC-TG/5 – HDL-c, dok su nivoi holesterola lipoproteina veoma niske gustine (VLDL-c) izračunati kao TG/5, prema Friedewaldovoj jednačini (Friedewald). et al., 1972). Indeks aterogenosti je izračunat kao (TC HDL-c)/HDL-c.

2.6.4. Analiza nivoa glikogena u jetri i skeletnim mišićima

Smrznuta jetra i skeletni mišići obrađeni su za analizu glikogena odmah nakon uklanjanja iz 70 1C zamrzivača. Sadržaj glikogena u jetri i skeletnim mišićima mjeren je korištenjem komercijalnog kompleta za glikogen (Jiancheng, Nanjing, Kina) zasnovanog na Keppler i Deckerovoj metodi (Keppler i Decker, 1974). Apsorbanca uzoraka na 505 nm je izmjerena nakon hlađenja cijevi na sobnu temperaturu. Količina glikogena u svakom uzorku tkiva izražena je kao mg glukoze po g tkiva.

2.7. Statistička analiza

Svi rezultati su izraženi kao srednji 7SEM i analizirani su pomoću ANOVA statističkih paketa Social Science Software (SPSS 16.0, Chicago, IL, USA) ili GraphPad Prism 5 (La Jolla, CA, USA). HOMA-IR indeksi su također procijenjeni pomoću nezavisnog t-testa dva uzorka nakon logaritamske transformacije. Vrijednosti AUC su izračunate korištenjem GraphPad Prism 5. Smatralo se da P vrijednosti manje od 0.05 ukazuju na statistički značajne razlike.

3. Rezultati

3.1. Identifikacija uzorka Cistanche

Rezultati poravnanja sekvenci pokazuju da je pojačana sekvenca ista saCistanche tubulosageni za 5.8S rDNK djelomičnu i potpunu sekvencu (614 nukleotida; Gen-Bank pristupni broj AB217871). Na osnovu njegovih morfoloških karakteristika i sekvence gena 5.8S rDNA, uzorak 109,092 je identifikovan kaoCistanchetubulosa.

3.2. Kvantitativno određivanje sadržaja verbaskozida i sadržaja ehinakozida u Cistanche tubulosa

Sadržaj verbaskozida i ehinakozida uCistanchetubulosasu kvantificirani korištenjem odgovarajućih standarda. Sadržaj verbaskozida i ehinakozidaCistanchetubulosaiznosili su 2,66 posto, odnosno 11,59 posto. HPLC hromatogram odCistanchetubulosaekstrakt je prikazan na slici 2.

3.3. Ukupni sadržaj fenola, sadržaj polisaharida i antioksidativno djelovanje Cistanche tubulosa

Ukupni fenolni sadržajCistanchetubulosaiznosio je 66,2970,44 mg GA/g. Sadržaj polisaharida uCistanche tubule je bio10,1570,26 posto. ABTS i FRAP testovi su pokazali da su antioksidativne aktivnosti bile 1,3970,06 mM TEAC/g i 1,6170,04 mM FEAC/g zaCistanchetubulosa, {{0}}.1570.01 mM TEAC/gand 0,1270,01 mM FEAC/g za akarbozu, i 0,1670,01 mMTEAC/g i 0,1370,01 mM FEAC/g za rosiglitazon, respektivno.

3.4. Antihiperglikemijski efekti Cistanche tubulosa kod db/db miševa

Naši rezultati su to pokazaliCistanche tubulosamože potisnuti povišene razine glukoze u krvi natašte i povišene razine glukoze u krvi nakon obroka, povećati osjetljivost na inzulin i ublažiti gubitak tjelesne težine (BW) dijabetičkih db/db miševa. općenito,Cistanchetubulosabio je efikasniji u smanjenju hiperglikemijatan akarboze tokom eksperimenta, a osim toga, Cistanche tubulosa je bio superiorniji od akarboze za poboljšanje insulinske rezistencije (p vrijednosti su navedene u nastavku).

3.4.1. Utjecaj Cistanche tubulosa na tjelesnu težinu i težinu jetre

U kontrolnoj grupi dijabetičara, BW se konstantno povećavao u prvih 25 dana. Međutim, s progresijom dijabetesa, BW kontrolnih miševa s dijabetesom lagano se smanjio do 30. dana (dodatna tabela 1). UCistanchetubulosagrupe, sve tri dozeCistanchetubulosasmanjio stopu gubitka težine u poređenju sa kontrolnim miševima sa dijabetesom (bez značaja, Dodatna tabela 1). U pozitivnoj kontrolnoj grupi, rosiglitazon je doveo do značajnog povećanja tjelesne težine od 20 dana u poređenju sa kontrolnom grupom dijabetičara (po0.05). Nasuprot tome, akarboza je usporila brzinu gubitka težine u poređenju sa kontrolnom grupom dijabetičara. U normalnoj kontrolnoj grupi tjelesna težina se konstantno povećavala tokom eksperimenta i bila je značajno niža od kontrolne grupe dijabetičara (po0,001).

Na kraju eksperimenta, težina jetre i odnos jetra/tjelesna težina su samo značajno povećani u rosiglitazon grupi (po{0}}.001) u poređenju sa kontrolnom grupom dijabetičara.

3.4.2. Utjecaj Cistanche tubulosa na razinu glukoze u krvi

Cistanchetubulosaprikazanoantihiperglikemijskiutiče na indb/db miševe nakon 20 dana oralne primjene i može kontrolisati nivo FBG-a i procentnu vrijednost FBG-a tokom dužeg vremenskog perioda na db/dbmiševi na način ovisan o dozi, na što ukazuje značajno smanjen natašte i postprandijal nivoi glukoze u krvi (slika 3, tabela 2). U kontrolnoj grupi dijabetičara, nivo FBG se konstantno povećavao tokom eksperimenta i bio je oko 6 puta veći od normalne kontrolne grupe 45. dana (28,3071,027 mmol/L vs. 4,6670,350 mmol/L; po0,001). Sve tri dozeCistanchetubulosaznačajno inhibirao tendenciju FBG povećanja db/db micedura tokom cijelog eksperimenta, pri čemu CT120.9 pokazuje najjači hipoglikemijski efekat (20, 35. i 45. dan: po{{1{{ 16}}}}.001; dan 40: po0.05 naspram kontrole dijabetesa). U pozitivnim kontrolnim grupama, rosiglitazon (0,52 mg/kg) i akarboza (19,5 mg/kg) su također značajno inhibirali tendenciju povećanja FBG-a kod db/db miševa tokom cijelog eksperimenta (2. dan{{41} } do 45: po0.001, dan 10: po0,05, rosiglitazonevi.kontrola dijabetesa; dan 35: po0,001, dan 40: po0,01, dan 20 i 45: po0. 05, akarboza u odnosu na kontrolu dijabetesa). Međutim, akarboza (19,5 mg/kg) je bila manje efikasna od rosiglitazona (20. dan: po0,05; dan 30: po0,01; dan 35–45: po0,001) i CT120,9 (dan 45: po0,001) . U normalnoj kontrolnoj grupi, nivo FBG je ostao konstantan tokom čitavog eksperimenta i bio je značajno niži od onog u kontrolnoj grupi dijabetičara (po0,001).

Nakon primjene u trajanju od 20 dana,Cistanche tubulosaznačajno inhibirao povećanje nivoa glukoze u krvi kod db/db miševa (slika 3). Procentualne vrijednosti povećanja FBG u kontrolnoj grupi za dijabetičare i grupi sa akarbozom (19,5 mg/kg TM) porasle su tokom eksperimenta. FBG-procentualno povećanje vrijednosti od triCistanchetubulosagrupe su se samo neznatno povećale na 30. dan. Procentualne vrijednosti FBG-povećanja grupe CT120.9 ostale su konstantne između 30. dana i 45. dana, dok su CT72.6 i CT24.2 neznatno porasle (p40.05) do 45. dana. Do kraja eksperiment, tri dozeCistanchetubulosa(CT120.9, CT72.6 i CT24.2) značajno potisnu povećanje procentnih vrijednosti FBG-poveća za 181,5 posto, 151,72 posto i 123,58 posto u poređenju sa kontrolnom grupom dijabetičara (PO{{ 24}}.001), respektivno. Od 20. do 40. dana, procentualne vrijednosti porasta FBG u tri grupe Cistanche tubulosa bile su niže ili slične grupi sa akarbozom (p40,05). Na dan 45, procenat povećanja FBG-a u grupi CT120.9 bio je značajno niži od grupe sa akarbozom (po0,01).

Cistanchetubulosaprikazane hipoglikemične efekte zavisne od doze (Tabela 2). Na kraju eksperimenta, nivoi FBG u grupi CT120.9 bili su značajno niži od kontrolne dijabetičara, akarboze i još dvaCistanchetubulosagrupe (CT120.9 naspram akarboze, CT72.6 i CT24.2, po0.01; CT120.9 naspram kontrole dijabetesa,po0.001; Tabela 2). Do kraja eksperimenta, nivoi FBG za triCistanchetubulosagrupe (CT120.9, CT72.6 i CT24.2) su porasle za 53,41 posto, 83,19 posto, odnosno 111,33 posto, u poređenju sa njihovim početnim nivoima FBG, dok su nivoi FBG u dijabetičkoj kontrolnoj grupi i grupi akarboze porasli za 234,91 posto i 150,76 posto . Od tri testirane doze Cistanche tubulosa, samo CT120.9 je doveo do konstantno nižih nivoa FBG tokom čitavog eksperimenta. CT72.6 i CT24.2 su bili manje efikasni u smanjenju nivoa FBG od CT120.9 (Tabela 2, Dodatna slika 1). Nivoi FBG grupe CT120.9 su porasli samo od 30. dana, dok su nivoi FBG u druga dvaCistanchetubulosagrupe i grupa akarboze su se brže povećavale. Od 10. do 40. dana, nivoi FBG su triCistanchetubulosagrupe su bile niže ili slične grupi teakarboze (19,5 mg/kg TM); ove razlike nisu bile statistički značajne (p40,05).

Dana 40, CT120.9 je značajno potisnuo povišenje postprandijalnog nivoa glukoze u krvi (po0,05, Tabela 2) 2 h nakon pojedinačne oralne doze glukoze (2 g/kg). Učinak CT120.9 na postprandijalni nivo glukoze u krvi kod db/db miševa bio je uporediv sa 19,5 mg/kg akarboze (p40,05). Efekat CT72.9 i CT24.2 bio je manje efikasan od rosiglitazona (po0,001).

3.4.3. Utjecaj Cistanche tubulosa na nivo inzulina u serumu natašte i interperitonealnu toleranciju na inzulin

Rezultati FINS-a su pokazali da je nakon oralne primjene 45 dana CT120.9 neznatno povisio nivo inzulina u serumu (p40,05) kod db/db miševa za 40,73 posto, dok je rosiglitazon značajno povisio nivo inzulina u serumu za 58,90 procenat (po0,05 naspram kontrole dijabetesa; Tabela 3).

HOMA-IR indeks je izračunat da se kvantitativno procijeni doprinos inzulinske rezistencije i deficijentne funkcije stanica hiperglikemiji natašte. U poređenju sa kontrolnom grupom dijabetičara, CT120.9 je neznatno poboljšao HOMA-IR indeks osjetljivosti na sistemski insulin za 15,30 posto (p40.05), dok je rosiglitazon značajno poboljšao HOMA-IR indeks za 35.30 posto (PO0.00) (PO0.00). kontrola dijabetesa; tabela 3). ITT je korišten za procjenu učinkaCistanchetubulosana inzulinsku osjetljivost nakon injekcije egzogenog inzulina. Rezultati su pokazali da CT120.9 poboljšava odgovor na inzulin kod dijabetičkih db/db miševa. Efekat CT120.9 bio je uporediv sa rosiglitazonom i bio je superiorniji od akarboze. CT12{{10}}.9 i rosiglitazon su značajno smanjili nivoe glukoze u krvi na 0 min (prije insulina injekcija,po0.001 naspram dijabetičke kontrole) i 30 min (po0.01 za CT120.9,po0.001 za rosiglitazon) nakon injekcije insulina (slika 4). CT120.9 i rosiglitazon smanjili su AUCinsulin za 27,92 posto i 43,89 posto u poređenju sa kontrolom dijabetesa. Nije bilo značajne razlike između nivoa glukoze u krvi u grupama koje su primale CT120.9 i rosiglitazon u bilo kom trenutku tokom ITT. Nivo glukoze u krvi grupe CT120.9 bio je značajno niži od akarboze na 0 min (prije injekcije inzulina, po0,01: CT120,9 naspram akarboze), 30 min (po0,01:CT120,9 naspram akarboze) i 60 min (po0,05: CT120,9 naspram akarboze) nakon injekcije insulina (slika 4). CT120.9 je smanjio AUCinsulin za 28,79 posto u poređenju sa akarbozom. Akarboza, CT72.6 i CT24.2 nisu imali značajne efekte na AUCinsulin ili nivoe glukoze u krvi u bilo kojoj vremenskoj tački ITT. I FIN i ITT rezultati normalne kontrolne grupe bili su značajno niži od onih u kontrolnoj grupi dijabetičara (po0,05: FIN;po0,001: ITT).

3.4.4. Utjecaj Cistanche tubulosa na nivoe glikogena u jetri i skeletnim mišićima

Nivoi glikogena u različitim tkivima su direktan odraz osjetljivosti na inzulin, jer inzulin potiče unutarćelijsko taloženje glikogena. Rosiglitazon je značajno snizio nivo glikogena u jetri za 59,61 posto (po0.001), i povećao nivo glikogena u mišićima za 33,93 posto (po0,05 u odnosu na kontrolu dijabetesa). CT24.2 je snizio nivo glikogena u jetri za 30,41 posto (po0,05 u odnosu na kontrolu dijabetesa). Niže doze Cistanche tubulosa nisu imale značajan uticaj na nivoe glikogena u jetri ili skeletnim mišićima.

3.5. Hipolipidemijski efekti Cistanche tubulosa kod db/db miševa

Za procjenu efekataCistanchetubulosana dislipidemiju, odredili smo nivoe ukupnog holesterola, TG, HDL-c, LDL-c i VLDL-c kod db/db miševa. Naši rezultati to pokazujuCistanchetubulosamože poboljšati dislipidemiju povećanjem nivoa HDL-c, smanjenjem nivoa TG, LDL-c i VLDL-c uz smanjenje nivoa holesterola kod db/db miševa. CT120.9 (po0.05) i CT24.2(po0.001) značajno su smanjili nivo TC kod dijabetičkih db/dbmice (Tabela 3 ) u poređenju sa kontrolom dijabetesa. Od svih eksperimentalnih grupa, samo CT24.2 je značajno smanjio nivoe TG(po0,05) i VLDL-c (po0,05) u poređenju sa kontrolom dijabetesa. Sve tri dozeCistanchetubulosaznačajno snizio nivo LDL (po0.01 za CT120.9, po0.05 za CT72.6, po0.001 za CT24.2, u odnosu na kontrolu dijabetesa) . Sve tri dozeCistanchetubulosa(CT120.9, CT72.6 i CT24.2) beznačajno su podigli nivo HDL-a za 9,78 procenata, 7,32 procenata i 7,78 procenata (p40,05 u odnosu na kontrolu dijabetesa).

Od ovih lipidnih parametara, nizak nivo HDL-c/TC je najznačajniji nezavisni faktor rizika za bolest koronarnih arterija.CT120.9 (po0.05) i CT24.2 (po0.001 u odnosu na kontrolu dijabetesa) značajno povisio nivo HDL-c/TC. Indeks aterogenosti, koji je faktor rizika za koronarnu bolest, smanjen je sa sve tri dozeCistanchetubulosa(po{{0}}.001 za CT120.9 i CT24.2, po0.01 za CT72.6 naspram kontrole dijabetesa).

U pozitivnoj kontrolnoj grupi, rosiglitazon je značajno povisio nivoe TC (po{{0}}.001) i LDL-c (po0,01) u poređenju sa kontrolom dijabetesa. Rosiglitazon je takođe značajno povisio nivo HDL c za 57,32 posto (po0,001), ali nije imao povoljan uticaj na nivo HDL-c/TC ili indeks aterogenosti. Akarboza nije imala nikakav značajan uticaj na indekse lipida u serumu kod db/db miševa.

4. Diskusija

Ova studija je dizajnirana da istraži potencijalnu antihiperglikemijsku i hipolipidemijsku aktivnostCistanchetubulosa.

Rezultati in vitro testa su to pokazaliCistanchetubulosasadrži cijenjenu količinu fenolnih i polisaharida, te pokazuje dobru antioksidativnu aktivnost. Ukupan sadržaj fenola uCistanche tubulosaje niži od ukupnog sadržaja fenola u čaju (Ankolekar et al., 2011) i kafi (Chu et al., 2011), a veći od mnogih drugihhiperglikemijskizačinsko bilje kao što su brusnica (Pinto et al., 2010.), morske alge (Nwosu et al., 2011.), slanutak (Sreerama et al., 2012.) i neke od tradicionalnih ljekovitih biljaka koje se koriste u liječenju DM tipa 2 (Gulatiet al., 2012). Sadržaj polisaharida u Cistanche tubulosa je manji od sadržaja polisaharida u Panax ginsengu (Wanget al., 2011.) i čaju (Chu et al., 2011.), a veći od mnogih drugihantihiperglikemijskibiljke kao što su Aloe vera L. (Hu et al., 2003.), jujuba (Sun et al., 2011.), Polyporus umbellatus (Tian et al., 2007.), Rheum palmatum (Ni et al., 2007.) i neke od tradicionalno ljekovito bilje koje se koristi u liječenju DM tipa 2 (Gulatiet al., 2012). Biljke s visokim sadržajem antioksidansa, kao što su aspolifenoli i feniletanoidni glikozidi (PhG), često se identificiraju da posjeduju antidijabetičku aktivnost, što je barem djelomično zbog njihove sposobnosti da smanje oksidativni stres (Pinto et al., 2010; Saltiel, 2001; Gulati et al., 2012). Naš antioksidativni rezultat je u skladu s prethodnim izvještajima (Arthur et al., 2011;anti-Baoet al., 2010; Funes et al., 2009) što ukazuje na toCistanchetubulosaposjeduje značajna antioksidativna svojstva. Vrijednost TEAC i FRAP Cistanche tubulosa bile su veće od zelenog kupusa, šargarepe, krastavca, zelene salate, celera (Pellegrini et al., 2003) i nekih drugih biljaka s dobrim antioksidativnim efektima koje su se koristile za liječenje dijabetesa (Rahimi et al. , 2005), i bio je mnogo veći od akarboze i rosiglitazona. Prethodna klinička ispitivanja su pokazala da -lipoična kiselina (Konrad et al., 1999) ili drugi antioksidansi (Paolisso et al., 1992) mogu poboljšati osjetljivost na inzulin kod inzulinsko rezistentnih i/ili dijabetičara. Stoga je Cistanchetubulosa izvor antioksidansa koji mogu imati zaštitne efekte protiv dijabetesa i dugotrajnih komplikacija dijabetesa.

Cistanche vrste se koriste kao tonik hrana ili lijek stotinama godina, što sugerira da su bezbedne za oralno uzimanje. Prethodni izvještaj o 14-dnevnom testu akutne toksičnosti pokazao jeCistanchetubulosaEkstrakt pripada stvarnim netoksičnim: Maksimalna tolerisana doza (MTD) odCistanchetubulosanađeno je da ekstrakt iznosi 410 g/kg kod miševa. Nije zabilježen mortalitet tokom 14-dnevnog praćenja, a testirani miševi svake grupe nisu pokazali nikakve znakove toksičnosti tokom 24 h i 14 dana posmatranja (Zhang et al., 2012). Najviša doza u našem eksperimentu, 5,084 g CTAE/kg TM/dan, što je ekvivalentno 9,10 g sirovog praha/kg kod miševa, mnogo je niža od MTD. Dakle, doza je sigurna u našem eksperimentu.

DM tipa 2 je jedna od najzastupljenijih i najozbiljnijih metaboličkih bolesti u svijetu i uglavnom je karakterizirana hiperglikemijom. U ovoj studiji, usvojili smo BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J(db/db) miševe kao model tipa 2 DM da bismo istražili efekteCistanchetubulosana metabolizam glukoze i lipida in vivo. db/dbmice su dobro prihvaćen genetski model glodavaca metaboličkih bolesti povezanih sa životnim stilom, što je posebno korisno za procjenu sredstava protiv dijabetesa i gojaznosti. Ovaj soj miševa nosi mutaciju u genu receptora za leptin, pokazuje hiperglikemiju, hiperlipidemiju, insulinsku rezistenciju i gojaznost do starosti 6-7 nedelja (Hummel et al., 1966; Nishina et al., 1994; Uchida et al., 2005; Srinivasan i Ramarao, 2007.).

Sa progresijom dijabetesa, blagi pad tjelesne težine kontrolne grupe dijabetičara (dopunska tabela 1) može biti posljedica sniženog nivoa inzulina u plazmi koji se javlja kod dijabetičara db/db miševa u dobi od 10 do 12 sedmica (Hummel et al., 1966) i povećana metabolička efikasnost kod dijabetičkih db/db miševa (Trayhurn, 1979). Smanjena brzina gubitka težine u sve tri dozeCistanche tubulesmože biti zbog činjenice daCistanchetubulosatakođe povišen nivo insulina u terumu (Tabela 3), što je korisno za DM. Rosiglitazon je doveo do značajnog povećanja tjelesne težine, što je poznata nuspojava rosiglitazona. Značajno povećana težina jetre i odnos jetra/tjelesna težina u grupi koja je primala rosiglitazon (po0.001) ukazuje da rosiglitazon može izazvati akumulaciju lipida i funkcionalne promjene u jetri.

To su pokazali rezultati in vivo testaCistanche tubule bi moglepotiskuju povišene razine glukoze u krvi natašte i povišene razine glukoze u krvi nakon obroka i povećanu osjetljivost na inzulin db/db miševa. općenito,Cistanchetubulosabio je učinkovitiji u smanjenju hiperglikemije i dislipidemije i poboljšanju inzulinske rezistencije od akarboze tijekom eksperimenta.

Nakon 20 dana oralne primjene,Cistanchetubulosaznačajno inhibirao tendenciju povećanja nivoa FBG i FBG-procentne vrijednosti kod db/db miševa. Na kraju eksperimenta,Cistanchetubulosapokazao svojeantihiperglikemijskiučinak na način ovisan o dozi. Ovi rezultati ukazuju na toCistanchetubulosamože potencijalno djelovati kao potencijalno sredstvo za snižavanje glukoze u krvi kada se primjenjuje u odgovarajućoj dozi. Većina odlaganja glukoze se dešava u skeletnim mišićima nakon obroka, dok je nivo FBG prvenstveno određen izlazom glukoze iz jetre. Rezultati FBG-a su to pokazaliCistanchetubulosaznačajno poboljšao izlaz glukoze u jetri db/db miševa; Loša proizvodnja glukoze u jetri je jedan od tri glavna metabolička defekta kod DM tipa 2 koji doprinose hiperglikemiji (Bavenholm et al.,2001). Dana 30, procentualne vrijednosti povećanja FBG u kontrolnoj grupi dijabetičara bile su niže od očekivanih nivoa, što bi moglo objasniti činjenicu da su samo CT72.6 (po0.01), akarboza (po0.05), androsiglitazon ( po0,001) značajno je smanjio porast FBG u poređenju sa kontrolnom grupom dijabetičara.

Zbirno, rezultati u tabeli 2 ukazuju na toCistanchetubulosaučinkovito kontrolirao povišen nivo glukoze u krvi nakon obroka nakon punjenja glukozom, što sugerira da je Cistanche tubulosa kandidat za ublažavanje postprandijalne hiperglikemije. Visok nivo glukoze u krvi nakon obroka nezavisan je faktor rizika za kardiovaskularne komplikacije povezane sa DM tipa 2 (Ceriello, 2005; Blaak et al., 2012). CT120.9 je značajno potisnuo povišenje postprandijalnog nivoa glukoze u krvi, što sugerira da je CT120.9 poboljšao poremećenu toleranciju glukoze kod dijabetičara db/dbmiševi, a učinak je bio uporediv sa 19,5 mg/kg akarboze. Međutim, anti-hiperglikemijski efekat CT120. 9 je bio manje intenzivan od rosiglitazona.

Nedostatak lučenja inzulina i insulinska rezistencija su dva od tri glavna metabolička defekta kod DM tipa 2 koji doprinose hiperglikemiji (Bavenholm et al., 2001). Naš rezultat analize FINS-a pokazao je da visoka dozaCistanchetubulosau određenoj mjeri obnovilo manjak inzulina kod db/db miševa. Stoga je Cistanchetubulosa efikasno potisnula povišene nivoe glukoze u krvi natašte i postprandijalne (Tabela 2) delimično stimulišući lučenje insulina. Hiperglikemija i hiperlipidemija izazivaju dodatni oksidativni stres na beta-ćelije i mitohondrije pored primarne patogeneze dijabetesa. Postoje in vitro i in vivo dokazi da je kronična izloženost visokim razinama glukoze i lipida u krvi štetna za tobeta-ćelije, uzrokujući manjak lučenja inzulina, oštećenu ekspresiju inzulinskog gena i indukciju ćelijske smrti apoptozom (Pitocco et al., 2010.). Kako bi antioksidansi mogli zaštititi beta-ćelijske linije i izolirana otočića od štetnih efekata izloženosti visokim koncentracijama glukoze (Kaneto et al., 1996, Tajiri et al., 1997), Cistanche tubulosa može poboljšati lučenje inzulina kroz svoj antioksidativni učinak.

Teško poremećena insulinska tolerancija kontrolne grupe dijabetičara potvrdila je stanje rezistencije na insulin db/db miševa. Rezultati ITT-a su pokazali da visoka dozaCistanchetubulosapoboljšana insulinska rezistencija kod db/db miševa, koja je bila uporediva sa rosiglitazonom i superiornija od akarboze, što sugeriše daCistanchetubulosaposjeduje snažna svojstva osjetljivosti na inzulin.

Homeostazu glukoze uglavnom reguliraju jetra i skeletni mišići. Većina odlaganja glukoze se dešava u jetri i skeletnim mišićima, pri čemu je glikogen primarni intracelularni oblik glukoze koja se može skladištiti (Saltiel, 2001). Nivo glikogena u različitim tkivima direktan je odraz osjetljivosti na inzulin, jer inzulin potiče unutarćelijsko taloženje glikogena. Sadržaj glikogena stimulisanog insulinom je značajno smanjen kod životinja sa insulinskom rezistencijom, proporcionalno stepenu nedostatka insulina (Chandramohan et al., 2008).Cistanchetubulosanije imao povoljan učinak na skladištenje glikogena u jetri ili skeletnim mišićima.

Metabolički profil DM tipa 2 karakteriziraju poremećeni metabolizam glukoze i inzulinska rezistencija, često u kombinaciji s dislipidemijom (Cha et al., 2005). Dislipidemija je jedan od glavnih faktora rizika za kardiovaskularne bolesti u DM. Karakteristične karakteristike dijabetičke dislipidemije su visoka koncentracija triglicerida (TG) u plazmi, niska koncentracija lipoproteina visoke gustine (HDL-c), povećana koncentracija lipoproteina niske gustine (LDL-c) i povećana koncentracija lipoproteina vrlo niske gustine koncentracija holesterola (VLDL-c) (Mooradian, 2009). Nakon tretmana saCistanchetubulosatokom 45 dana, nivoi ukupnog holesterola, TG, LDL-c i VLDL-c kod db/db miševa su smanjeni dok su nivoi HDL-c povećani, što ukazuje daCistanchetubulosablagotvorno utjecao na dislipidemiju, a može značajno smanjiti rizik od ateroskleroze, koronarne bolesti srca i dijabetičkih komplikacija (Tabela 3). Cistanche tubulosa je značajno smanjila nivo TC, što je u skladu s prethodnim izvještajem (Shimoda et al., 2009). Mehanizam kojim Cistanche tubulosa poboljšava dislipidemiju može biti povezan s posredovanjem ekspresije jetrene mRNA povezane s transportom i metabolizmom holesterola (Shimoda et al. ., 2009). Iako prevalencija hiperholesterolemije nije povećana u DM, snižavanje nivoa holesterola može smanjiti relativni rizik od kardiovaskularnih bolesti kod pacijenata sa DM (Mooradian, 2009). Cistanche tubulosa značajno je povisila nivo HDL-c/TC i smanjila aterogenost indeks, koji su faktori rizika za koronarnu bolest, što ukazuje na to da je Cistanche tubulosa korisna u liječenju dijabetesa i kardiovaskularnih bolesti. Pozitivni kontrolni lijek rosiglitazon značajno je povisio TClevel, što je relevantno za povećani rizik od progresije dijabetesa i kardiovaskularnih bolesti.

5. Zaključak

U zaključku, pružamo prvu demonstraciju antihiperglikemika ihipolipidemijskiefektiofCistanchetubulosaintip 2 dijabetičkih db/db miševa.Cistanchetubulosanormalizirana hiperglikemija obnavlja osjetljivost na inzulin i smanjuje dislipidemiju.Cistanchetubulosapoboljšao sva tri glavna metabolička defekta koji doprinose hiperglikemiji kod DM tipa 2. Dakle,Cistanchetubulosapokazao visok potencijal za prevenciju progresije DM tipa 2 i smanjenje rizika od ateroskleroze, koronarne bolesti srca i dijabetičkih komplikacija. Kao tradicionalna kineska medicina i tonik, Cistanchetubulosa bi se mogla dalje razvijati u lijekove, farmaceutsku hranu ili dodatke prehrani u budućnost. Međutim, potrebna su dalja istraživanja kako bi se identificirala bioaktivna komponenta i razjasnili mehanizmi odgovorni za antihiperglikemičke ihipolipidemijskiefektiofCistanchetubulosa.

Priznanja

Ovaj rad je podržan grantovima iz Nacionalnog programa za istraživanje i razvoj ključnih tehnologija u 11. petogodišnjem planu Kine (2007BAI32B06) i Ureda za smanjenje siromaštva i razvoj vodeće grupe Državnog vijeća (2008-3A).

Dodatak A. Dodatni materijal

Dodatni podaci povezani s ovim člankom mogu se pronaći u internetskoj verziji na http://dx.doi.org/10.1016/j.jep.2013.09.027.

Iz: 'Antihiperglikemijski i hipolipidemijski efekti Cistanche tubulosa' odWen-Ting Xiong, et al

---W.-T. Xiong et al. / Časopis za etnofarmakologiju 150 (2013) 935–945