Efekti protiv starenja ekstrakta kulture kalusa Leontopodium Alpinum (Edelweiss) kroz profiliranje transkriptoma, dio 3

Molimo klikniteoscar.xiao@wecistanche.comza više informacija

3.4. In vitro evaluacija LACCE ekstrakta povezanog sa hidratantnim efektom

Ispitivali smo hidratantni efekat LACCE-a na HaCaT ćelije koristeći ekspresiju Akvaporina 3 (AQP3), koji kodira protein koji prenosi vodu i glicerol eksprimiran u ćelijama kože, pomoću RT-PCR u realnom vremenu (Slika 3C). U poređenju sa negativnom kontrolom, gen AQP3 je značajno povećan dodatkom LACCE ekstrakta.prednosti i nuspojave cistanche tubulosaZanimljivo, kako je koncentracija LACCE ekstrakta bila povećana, ekspresija AQP3 se postepeno povećavala sa 3,19 (0,1 posto LACCE) na 4,5 (1 posto LACCE).

Molimo kliknite ovdje da saznate više

3.5. In vitro procjena LACCE ekstrakta kao sredstva protiv bora

Testirali smo efekat LACCE protiv bora koristeći gen marker koji kodira matričnu metaloproteinazu-2(MMP-2), koja promoviše rast ćelija, pomoću RT-PCR u realnom vremenu (Slika 3D). UVB zračenje je značajno povećalo ekspresiju MMP-2u poređenju sa negativnom kontrolom bez UVB zračenja (promjena puta 0.67 sa vrijednošću manjom od 0.05). Ekspresija MMP-2 je smanjena dodavanjem LACCE-a protiv UVB zračenja. Općenito, ekspresija MMP{13}} se postepeno smanjivala kako je koncentracija LACCE bila povećana. Ekspresija MMP-2 u normalnim uslovima bez UVB zračenja bila je uporediva sa onom u 0,5 posto LACCE sa UVB zračenjem.

3.6.Klinička procjena LACCE-a o podizanju lica i poboljšanju periorbitalnih bora, elastičnosti kože, gustoći kože i debljini kože

Da bismo ispitali učinak LACCE-a in vivo, izvršili smo kliničku procjenu LACCE-a povezanu s podizanjem lica i poboljšanjem periorbitalnih bora, elastičnosti kože, dermalne gustoće i debljine kože. Zbog toga je 21 volonterka, koja je dalje podijeljena na 12 u 40-im i devet u 50-im, učestvovala u kliničkoj evaluaciji tokom četiri sedmice.

Cistanche može protiv starenja

Prvo smo ispitali efekat LACCEon periorbitalnih bora koristeći PRIMOS sistem visoke rezolucije. Analizirana su dva različita parametra hrapavosti, prosjek hrapavosti (Ra) (slika 4A) i srednja kvadratna hrapavost (Rq) (slika 4B). Četiri nedelje nakon tretmana sa LACCE i placebom, vrednosti Ra i Rq su se smanjile u oba uzorka.ekstrakt cistanche tubulosa,Međutim, stopa smanjenja vrijednosti Ra i Rq bila je mnogo veća u uzorku tretiranom LACCE nego u uzorku tretiranom placebom (Tabela 2). Na primjer, stopa smanjenja vrijednosti Ra bila je 3,654 posto i 6,118 posto za dvije odnosno četiri sedmice, respektivno, sa statističkom značajnošću (p<0.05). similarly,="" the="" decrease="" rate="" for="" the="" rq="" value="" was="" 3.583%and="" 6.189%="" at="" two="" and="" four="" weeks,="" respectively,="" with="" statistical="" significance=""><0.05). moreover,="" the="" ratio="" of="" volunteers="" who="" displayed="" a="" reduction="" in="" the="" roughness="" parameters="" for="" the="" lacce-treated="" sample="" was="" much="" higher="" than="" that="" for="" the="" placebo-treated="" sample.="" for="" example,="" at="" four="" weeks,="" the="" ratios="" of="" volunteers="" showing="" a="" decrease="" in="" ra="" and="" rq="" values="" were="" 90.476%="" in="" the="" lacce-treated="" sample="" and="" 57.142%="" in="" the="" placebo-treated="">

Slika 4. In vivo klinički testovi LACCE-a za podizanje lica i poboljšanje periorbitalnih bora, elastičnost kože, gustoću kože i debljinu kože. Vrijednosti Ra (A) i Rq(B) mjerene su PRIMOs sistemom visoke rezolucije u tri različite vremenske tačke kako bi se uočio efekat periorbitalnog bora LACCE (1 posto). Vrijednosti bruto elastičnosti (R2)(C), neto elastičnosti (R5)(D) i biološke elastičnosti (R7)(E) mjerene su kako bi se promatrala elastičnost kože pomoću LACCE. Mjerenje dermalne gustine (F) i debljine kože (G). R mjerenje u kutu usana (H). Prije/poslije: vjerovatnoća p (ponovljena mjerenja ANOVA, značajno:*p<><><0.001).lacce lacebo="" b:="" probability="" p(repeated="" measures="" anova,="" significant∶="" 十="" p=""><>

Ispitivali smo učinak LACCE-a na elastičnost kože obraza koristeći Cutometer. Izmjerena su tri različita parametra, bruto elastičnost (R2), neto elastičnost (R5) i biološka elastičnost (R2)(R7) (Slika 4C-E). Vrijednosti R2, R5 i R7 za oba stanja tretirana LACCE i placebom porasla su tokom četiri sedmice.recenzije cistanche tubulosa,Na primjer, vrijednost R2 za uzorak tretiran LACCE povećala se sa 0.728 na 0.752, dok se vrijednost R2 za uzorak tretiran placebom povećala sa 0.74{ {10}} do 0,752 (slika 4C). Štaviše, stopa povećanja u uzorku tretiranom LACCE bila je mnogo veća od one u uzorku tretiranom placebom (Tabela 3). Na primjer, stope povećanja u uzorku tretiranom LACCE bile su 3,296(R2), 5,816(R5) i 6,756 (R7), dok su stope povećanja u uzorku tretiranom placebom bile 1,621(R2), 2,895(R5), i 3.378(R7) za četiri sedmice. Međutim, nije bilo razlike u omjeru dobrovoljaca koji su pokazali povećanje elastičnosti kože između dva uzorka.

Ispitivali smo efekat LACCE-a na dermalnu gustinu i debljinu kože pomoću Dermascan-C. Oba uzorka su pokazala povećanje dermalne gustine i debljine kože četiri sedmice nakon tretmana (slika 4F,G). Na primjer, dermalna gustina u uzorku tretiranom LACCE povećala se sa 26,708 na 28,168, dok se gustina kože u uzorku tretiranom placebom povećala od 26,936 do 28,168 (Slika 4F). Stopa povećanja dermalne gustine bila je mnogo veća u uzorku LACCE (5,466 procenata) nego u uzorku tretiranom placebom (3,118 procenata) četiri nedelje nakon tretmana (tabela 4). Opet, stopa povećanja debljine kože bila je mnogo veća u LACCE uzorku (10,192 posto) nego u uzorku tretiranom placebom (4,829 posto) četiri sedmice nakon tretmana. Zanimljivo je da su mnogi volonteri pokazali snažno povećanje dermalne gustine (90,476 posto) i debljine kože (100 posto) nakon četiri sedmice LACCE tretmana.

Ispitivali smo efekat LACCE-a na podizanje lica u uglu usana koristeći Moireé analizu. I uzorci tretirani LACCE i placebom pokazali su smanjenje podizanja lica (slika 4H); međutim, stopa smanjenja podizanja lica bila je mnogo veća u LACCE uzorku (2,541 posto) nego u placebo uzorku (0.437 posto) nakon četiri sedmice tretmana. Odnos dobrovoljaca koji su pokazali smanjenje u podizanju lica bio je veći kod LACCE (85,714 posto) nego kod placeba (57,142 posto).

3.7. Analiza transkriptoma HaCaT ćelija kao odgovor na LACCE pomoću RNA-Seq

Iako je ekstrakt LACCE pokazao nekoliko pozitivnih efekata kao kozmetički agens, moglo bi biti vrijedno pažnje ispitati promjenu u ljudskom transkriptomu kao odgovor na LACCE. Za ovo smo koristili 1% LACCE ekstrakta umjesto niže koncentracije jer smo pretpostavili da bi mogući učinak niske koncentracije LACCE na ćelije keratinocita mogao biti mali. HaCaT ćelije su tretirane sa 1% LACCE (tretman), dok su kontrolne HaCaT ćelije tretirane sterilnom vodom. Tri biološke replike su primijenjene za RNA-Seg. Broj čitanja sekvence kretao se od 32.776.672 do 42.640,000(Tabela 5). Više od 90 posto očitavanja u svih šest uzoraka mapirano je na ljudskim referentnim transkriptima koji sadrže 159.998 transkripata (Slika 5A). Za analizu ekspresije gena, izračunali smo fragmente po kilobazi transkripta na milion (FPKM) vrijednosti. Kao što je prikazano na slici 5B, vrijednosti FPKM iz tri tretirana uzorka bile su veće od onih iz tri kontrolna uzorka. Nakon uklanjanja suvišnih transkripata, samo 11.290 transkripata od 68.158 transkripata je eksprimirano u ljudskim keratinocitnim ćelijama (Tabela S1).

Slika 5. Rezultati mapiranja, distribucija fragmenata po kilobazi transkripta na milion (FPKM) vrijednosti i vizualizacija diferencijalno eksprimiranih gena. (A) Dio mapiranih (narandžastih) i nemapiranih (sivih) čitanja na ljudskom referentnom transkriptomu. (B) Okvirni grafikon koji prikazuje distribuciju FPKM vrijednosti u svakoj biblioteci. (C) Vulkanski grafikon koji prikazuje distribuciju log1o(adj) i log2 (FC) za sve eksprimirane gene. Pad i FC označavaju prilagođenu p-vrijednost i promjenu preklopa, respektivno. Deset identifikovanih DEG-ova označeno je plavim (niže regulisani geni, dole), crvenim (gore regulisani geni, gore) i sivim (geni koji nisu značajno izraženi, NS) tačkama.

Iako smo koristili višu koncentraciju LACCE (1 posto) koja je bila 10 puta veća od normalnog LACCE (0,1 posto) koji se koristi za kozmetiku, transkriptom ljudskih keratinocitnih ćelija nije se značajno promijenio kao odgovor na LACCE tretman, kao što je prikazano na dijagramu vulkana (Tabela S1 i Slika 5C).cistanche UKNa osnovu prilagođene p-vrijednosti manje od 0.001 i log2 (promjene puta) veće od 1, identifikovali smo ukupno 10 diferencijalno eksprimiranih gena (DEG) na LACCE (Tabela 6). Od 10 DEG,

četiri gena sa smanjenom regulacijom bili su geni koji kodiraju inhibitor vezivanja DNK 3, domen ponavljanja ankirina 1, Rho povezan BTB domen koji sadrži 3 i 18S ribosomalni N5. Šest reguliranih gena bili su geni koji kodiraju karboanhidrazu 2, protein koji vezuje inzulinski faktor rasta 3, keratin 15, BCL2-interagirajući protein 3, protein koji veže faktor rasta fibroblasta 1 i transCript4 koji može inducirati oštećenje DNK.

3.8. Funkcionalne uloge gore reguliranih gena u odgovoru na LACCE

Utjecaj LACCE-a na transkriptom keratinocita bio je blaži od ostalih tretmana stresa. Da bismo dobili funkcionalni pregled gena koji su regulirani naviše i naniže, izvršili smo analizu obogaćivanja GO. Međutim, nismo dobili značajne rezultate za obogaćene GO termine zbog malog broja različito eksprimiranih gena. Stoga smo povećali broj diferencijalno eksprimiranih gena primjenom prilagođene p-vrijednosti manjoj od 0.05 i log2 (promjena puta) veće od 0,5. Kao rezultat toga, identifikovali smo 22 gena sa povećanom regulacijom i 13 gena sa smanjenom regulacijom (Tabela S1). Analiza obogaćivanja GO identifikovala je 36 obogaćenih GO termina sastavljenih od 21 GO termina (biološki proces), dva GO termina (molekularna funkcija) i 13 GO termina (ćelijska komponenta) u genima sa povećanom regulacijom (Tabela S2). Nasuprot tome, samo 12 obogaćenih GO termina za biološki proces identifikovano je u 13 gena sa smanjenom regulacijom (Tabela S2).

Prema biološkom procesu, geni uključeni u keratinizaciju, rožnjače, programiranu ćelijsku smrt, organizaciju staničnih spojeva, pozitivnu regulaciju razvojnog procesa i uspostavljanje kožne barijere bili su visoko regulirani (Slika 6A).cistanche wirkungZa molekularnu funkciju, strukturni konstituent citoskeleta i strukturna aktivnost molekula bili su visoko izraženi (Tablica S2). U slučaju ćelijske komponente, geni u intermedijarnom filamentu, ekstracelularnom egzosomu i keratinskom filamentu bili su visoko izraženi (slika 6B). Od 12 GO termina za 13 gena sa smanjenom regulacijom, geni koji se odnose na odgovor na jon cinka, regulaciju okoštavanja i negativnu regulaciju biološkog procesa često su bili smanjeni.

Slika 6. Hijerarhijska struktura identifikovanih obogaćenih GO termina za povećane ljudske gene kao odgovor na LACCE. Usmjereni aciklični grafovi (DAG) vizualiziraju hijerarhijsku strukturu identificiranih obogaćenih GO termina za gore regulirane gene nakon LACCE tretmana prema biološkom procesu (A) i ćelijskoj komponenti (B). Svaki GO termin je označen različitom bojom okvira na osnovu p-vrijednosti. Detaljne informacije o identifikovanim terminima GO mogu se naći u tabeli S2.

4. Diskusija

Kozmetika je klasično definirana kao bilo koji pripremljeni proizvodi koji se može primijeniti na ljudsko tijelo, uključujući lice, kožu, kosu, usta i oči, kako bi se promijenio ili ojačao izgled ljudskog tijela [21]. Osim toga, kozmetika se koristi za čišćenje, pružanje mirisa i zaštitu. Većina kozmetike se sastoji od hemijskih spojeva koji mogu biti dobijeni iz prirodnih izvora ili sintetike [22].

U ovoj studiji ispitali smo moguće efekte LACCE-a kao prirodnog spoja za kozmetiku kroz različite testove in vitro i in vivo. Nekoliko rezultata in vitro testova pokazalo je jaku antioksidativnu aktivnost LACCE kao odgovor na UVB tretman. Zanimljivo je da je učinak LACCEasan antioksidansa bio u korelaciji sa koncentracijom LACCE. Antioksidativna aktivnost LACCE (1 posto) bila je uporediva sa NAC-om ili mnogo veća od vitamina C. LACCE sadrži veću količinu hlorogenske kiseline, 3,5-dikafeoilkinske kiseline, leontopodne kiseline B i leontopodne kiseline A od normalne kulture kalusa runolika, kao što je prikazano u prethodnoj studiji [4]. Konkretno, prethodna studija koja je identificirala dvije leontopodne kiseline iz runolika pokazala je funkcionalnu ulogu LACCE kao antioksidansa [23].

Ekspresija dva inflamatorna gena je potisnuta LACCE tretmanom, sugerirajući moguću ulogu LACCE-a u antiinflamatornoj aktivnosti, kao što je pokazano ranije [7,24]. Zanimljivo je da nije bilo značajne razlike u protuupalnom učinku između različitih koncentracija LACCE-a, što ukazuje da bi 1 posto LACCE-a moglo biti dovoljno za primjenu kao protuupalno sredstvo u kozmetici. Nasuprot tome, ekspresije AQP3 i MMP2 potrebne za vlaženje i stvaranje bora, dramatično su se promijenile nakon tretmana različitim koncentracijama LACCE.

Klinički test je najvažniji korak za korištenje biljnog ekstrakta kao kozmetičkog izvora. U ovoj studiji smo ispitali in vivo efekte LACCE-a sa 21 volonterom. Primjena LACCE-a na licu i tkivima kože pokazala je značajno povećanje četiri različita faktora (poboljšanja periorbitalnih bora, elastičnosti kože, gustoće kože i debljine kože) u poređenju sa placebom. Konkretno, stalna upotreba LACCE-a značajno je poboljšala stanje lica i tkiva kože. Iako su ekstrakti runolika poznati kao izvor kozmetike, ovo je prvi izvještaj koji pokazuje uspješnu primjenu LACCE-a kao kozmetičkog materijala.

Za procjenu biljnih ekstrakata kao kozmetičkog ili medicinskog izvora in vitro, ispitivanje ekspresije markerskih gena je popularan eksperimentalni pristup. Međutim, primjena samo odabranih gena za analizu genske ekspresije ima nekoliko ograničenja. Nedavni brzi razvoj sekvenciranja sljedeće generacije olakšava analizu genske ekspresije u cijelom genomu. U ovoj studiji, koristili smo RNA-Seq da ispitamo promjene na nivou transkriptoma u ćelijama ljudskih keratinocita kao odgovor na LACCE. Naši rezultati su pokazali da je najmanje 16,56 posto ljudskih gena eksprimirano u ćelijama keratinocita, što ukazuje na tkivno specifičnu ekspresiju ljudskih gena. LACCE je inducirao ekspresiju brojnih gena; međutim, globalna promjena u ljudskom transkriptomu od strane LACCE-a bila je blaga u poređenju sa drugim stresnim uslovima. Ovaj rezultat osigurava sigurnost LACCE-a za primjenu u ljudskim tkivima.

analiza obogaćivanja otkrila je da su pojačano regulirani geni koji kodiraju keratin 5 (KRT5), KRT19, KRT6A, KRT15, ​​KRT14, KRT17 i spojni plakoglobin (JUP) uključeni u keratinizaciju i rožnjače. Epidermalni keratinociti igraju važnu ulogu kao barijera protiv različitih faktora okoline [25]. Konkretno, terminalno diferencirane epidermalne ćelije razvijaju se u mrtve keratinocite programiranom ćelijskom smrću koja se naziva kornifikacija, formirajući snažnu epidermalnu barijeru [26]. Nakon stanične smrti, rožnati sloj kože pruža mnoge prednosti licu i tkivima, uključujući povećanje elastičnosti, stabilnosti, hidratacije i mehaničke otpornosti [25]. Od identifikovanih KRT gena, gen koji kodira Keratin15(KRT15), član porodice gena keratina, poznat je kao marker matičnih ćelija folikula dlake koji je visoko eksprimiran u tkivima kože[27,28]. Nedavna studija je sugerirala da KRT15 djeluje u regeneraciji epitela protiv zračenja i sanacije rana [29,30].

Pored nekoliko gena koji kodiraju KRT proteine, geni koji kodiraju DDIT4, BNIP3 i IGFBP3 funkcionišu u programiranoj ćelijskoj smrti. Na primjer, transkript 4 (DDIT4) izazvan oštećenjem DNK je visoko izražen različitim stresovima i inhibira cilj sisara na putu rapamicinskog kompleksa 1 (mTORC1) koji je povezan s liječenjem raka [31]. Prethodne studije su identifikovale gen DDIT4, koji je bio visoko eksprimiran deksametazonom, hemoterapeutskim agensom koji indukuje autofagiju u limfocitima, sugerirajući njegovu moguću ulogu u regulaciji rasta, proliferacije i preživljavanja ćelija [32,33]. LACCE je pokazao slične efekte kao i deksametazon kao protuupalni agens. Bcl-2/adenovirus E1B 19-kDa-interagirajući protein (BNIP3) je član porodice proteina pro-apoptoze koji reguliše ćelijsku proliferaciju[34] . Pored toga, BNIP3 je uključen u zaštitu keratinocita od UVB-indukovane apoptoze tako što povećava ekspresiju gena [35]. Nekoliko studija je pokazalo da je ekspresija proteina 3 koji vezuje faktor rasta sličan insulinu (IGFBP-3) povezana sa ćelijskim starenjem [36,37]. Dodatak IGFBP-3 indukuje ili inhibira apoptozu u zavisnosti od tipa ćelija [37]. Na primjer, IGFBP-3 je bio pojačano reguliran u ćelijama grlića materice imortaliziranim humanim papiloma virusom, što je rezultiralo poboljšanjem IGF-1-indukovane mitogeneze [37]. Nedavna studija je pokazala smanjenu regulaciju IGFBP-3 u starim i H,O{40}}indukovanim starim ćelijama u poređenju sa mladim ćelijama, sugerirajući njegovu moguću ulogu kao markera starenja [36].

BNIP3, IGFBP3, stratifin (SFN), CA2, FGFBP1, KRT17 i JUP uključeni su u pozitivnu regulaciju razvojnog procesa. Od njih, karboanhidraze su sveprisutni enzimi prisutni u prokariotima i eukariotima, uključujući životinje i biljke [38]. Kod ljudi, karboanhidraza katalizira stvaranje ugljične kiseline iz vode i ugljičnog dioksida (CO), koji su potrebni za fiziologiju mozga, bubrega i kostiju [39]. Prethodna studija je pokazala da su CA4 i CA9 bili pojačano regulisani kod miša tokom perioda hipoksije rane pomoću RNA-Seq [40]. Osim toga, dodatak rekombinantnog enzima CA9 potaknuo je reepitelizaciju rane [40]. Nadalje, proteomska studija je također otkrila učešće CA2 proteina u starenju i neurodegeneraciji kod miša [41]. Ovdje smo pokazali da je LACCE promovirao regeneraciju ljudskih keratinocitnih ćelija pojačavajući ekspresiju CA2. Protein koji vezuje faktor rasta fibroblasta 1 (FGFBP1) je ekstracelularno izlučeni šaperon koji se vezuje za FGF i modulira FGF signalizaciju J42]. Nekoliko studija je pokazalo da je FGFBP1 visoko eksprimiran tokom angiogeneze i da igra važnu ulogu u karcinogenezi kože, upali i zacjeljivanju rana [42-44]. Štaviše, ćelijska lokalizacija gena sa povećanom regulacijom u vezikuli, ekstracelularnom egzosomu, srednjem filamentu i keratinskom filamentu sugerira da su ovi proteini primarna komponenta citoskeleta.

U genima smanjene regulacije, poznato je da je većina gena inducirana različitim stresovima. Na primjer, dva gena koji kodiraju metalotionein 2a (MT2A) i metalotionein le (MT1E) induciraju se u uslovima metalnog stresa, uključujući jon cinka, jona bakra i kadmijuma, i oksidativni stres, kao što je UVB [45,46]. Štaviše, inhibitor DNK-vezivanja 3 (ID3), član proteina helix-loop-helix, je trenutno rani gen kao odgovor na mitogene signale i oksidativni stres [47]. Ankirinski repetitivni domen 1 (ANKRD1), također poznat kao srčani protein ankirinskog ponavljanja (CARP), je kofaktor transkripcije koji se pojačano regulira tokom zacjeljivanja rana i inducira angiogenezu [48]. I ID3 i ANKRD1 uključeni su u negativnu regulaciju biološkog procesa. ID3 djeluje kao transkripcijski regulator koji inhibira diferencijaciju matičnih stanica i promovira progresiju ćelijskog ciklusa [47]. Osim toga, nedavna studija je pokazala da je gubitak funkcije ANKRD1 kod miševa rezultirao odgođenim zacjeljivanjem rana, sugerirajući njegovu ulogu u ranama i ozljedama tkiva [49 ]. Nadalje, Rho-vezani BTB domeni 3 (RHOBTB3) funkcioniraju tako da promoviraju proteazomsku degradaciju faktora izazvanih hipoksijom (HIFs), koji su glavni regulatori adaptivnih odgovora na nizak kisik [50]. Osim toga, interferonom inducirani transmembranski protein 1 (IFITM1) inhibira ulazak mnogih virusa u ćeliju domaćina [51]. Slično, gen koji kodira interferon alfa-inducibilni protein 6(IFI6) induciran je interferonom i reguliše apoptozu i antivirusni urođeni imunitet [52,53]. Regulacija gena koji reaguju na stres LACCE tretmanom sugerira da LACCE ne uzrokuje stres u ljudskim ćelijama keratinocita.

5. Zaključci

Ovdje smo procijenili LACCE kao prirodni kozmetički materijal kroz nekoliko in vitro i in vivo testova, sugerirajući njegove snažne efekte na poboljšanje tkiva lica i kože. Konkretno, analiza transkriptoma zasnovana na RNA-Seg otkrila je molekularni mehanizam u ćelijama ljudskih keratinocita kao odgovor na LACCE. LACCE je pojačao regulaciju gena uključenih u keratinizaciju i rožnjače, stvarajući kožnu barijeru, koju promoviraju geni potrebni za programiranu ćelijsku smrt. Mnogi pozitivni regulatori razvojnog procesa bili su regulirani naviše, dok su različiti geni izazvani stresom bili smanjeni LACCE tretmanom. Uzeto zajedno, naša studija je pokazala da je LACCE sredstvo za kozmetiku protiv starenja ili kozmetičke proizvode.

Ovaj članak je preuzet iz Genes 2020, 11, 230; doi:10.3390/genes11020230 www.mdpi.com/journal/genes