Napredak u dermatologiji korištenjem DNK Aptamera "Aptamin C" inovacija: prevencija oksidativnog stresa i maksimiziranje efekta vitamina C kroz antioksidaciju

joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Sooho Choi PhD1|Jeongmin Han Ph.D. Kandidat2|Ji Hyun Kim MS Candidate1|A‐Ru Kim Ph.D. Kandidat3|Sang-Heon Kim Ph.D. Kandidat3|Weontae Lee Ph.D., professor2|Moon-Young Yoon Ph.D., profesor3|Gyuyoup Kim PhD1|Yoon-Seong Kim Ph.D., profesor1

Abstract

Pozadina:vitamin C(poznata i kao L-askorbinska kiselina) igra ključnu ulogu u smanjenju reaktivnih vrsta kiseonika (ROS) i regeneraciji ćelija štiteći ćelije od oksidativnog stresa. Iako se vitamin C široko koristi na kozmetičkim i terapeutskim tržištima, postoje značajni dokazi da se vitamin C lako podvrgavaoksidacijazrakom, pH, temperaturom i UV svjetlom nakon skladištenja. Ovaj nedostatak vitamina C smanjuje njegovu moć kao antioksidansa i smanjuje rok trajanja proizvoda koji sadrže vitamin C kao svoj sastojak. Da bismo prevazišli nedostatak vitamina C, razvili smo Aptamin C, inovativni DNK aptamer koji maksimizira antioksidativnu efikasnost vitamina C vezivanjem za redukovani oblik vitamina C i odlaganjem njegovogoksidacija.

Metode:Vezanje aptamina C sa vitaminom C određeno je ITC analizom. ITC eksperiment je izveden sa 0.2 mmol/Lvitamin Ckoji je ubrizgan 25 puta u alikvotima od 2 µL u ćeliju uzorka od 1,8 mL koja sadrži Aptamin C u koncentraciji od 0.02 mmol/L. Podaci su uklopljeni u izotermu vezivanja na jednom mjestu korištenjem programa with origin za ITC v.5.0.

Rezultati:Da bi se istražio učinak Aptamina C ivitamin Ckompleksa u ljudskoj koži, obavljeni su i in vitro i klinički testovi. Primetili smo da je kompleks aptamina C i vitamina C značajno efikasan u poboljšanju bora, efektu izbeljivanja i povećanju hidratacije. U kliničkom testu, ispitanici liječeni kompleksom pokazali su dramatično poboljšanje iritacije i svraba kože. Aptamin C kompleks nije pokazao neželjenu reakciju u testu.

zaključak:Uzeti zajedno, ovi rezultati su pokazali da bi Aptamin C, inovativno novo jedinjenje, potencijalno trebalo poslužiti kao ključni kozmeceutski sastojak za niz stanja kože.

KLJUČNE RIJEČIantioksidacija, Aptamin C (Aptamer koji vezuje vitamin C),oksidacija, oksidativni stres,vitamin C(L-askorbinska kiselina)

cistancheposjeduju jaku sposobnost antioksidacije

1|UVOD

Reaktivne vrste kiseonika (ROS) su hemijski reaktivne hemijske vrste koje sadrže kiseonik, koji igra važnu ulogu u ćelijskoj signalizaciji i homeostazi.1-3 To uključuje ne samo pozitivne efekte kao što je indukcija odbrambenih gena domaćina i mobilizacija sistema za transport jona, već također ima ulogu u apoptozi (programiranoj ćelijskoj smrti).4,5 Nivoi ROS-a mogu se povećati stresom iz okoline, što dovodi do oštećenja ćelijskih struktura.3 Ovaj fenomen se naziva "oksidativni stres". Oksidativni stres je jedan od vodećih uzroka raznih bolesti uključujući neurodegenerativne bolesti, Lou Gehrigovu bolest, autizam, multiplu sklerozu i kožne bolesti.{4}} Nadalje, oksidativni stres ima direktan utjecaj na proces starenja kože16; proteini, lipidi i DNK osjetljivo reagiraju na oksidativni stres koji uzrokuje ROS.17 Antioksidansi su vrlo učinkoviti u zaštiti kože jer reagiraju direktno na ROS sprječavajući ih da dođu do bioloških ciljnih molekula.18,19 Antioksidansi kao što suvitamin C, vitamin E, koenzim Q10 i polifenolna jedinjenja štite kožu od oštećenja izazvanih ROS. Antioksidansi na taj način pomažu u prevenciji i liječenju različitih kožnih bolesti te usporavaju proces starenja kože.20 Upotreba vitamina C u industriji prvenstveno je zbog njegovih antioksidativnih svojstava, koja su rezultatvitamin Csposobnost da neutralizira slobodne radikale kisika, kroz proces koji se naziva uklanjanje radikala.21,22 Međutim, zbog istih antioksidativnih svojstava, sama molekula je inherentno osjetljiva na razgradnju putemoksidacija. Da bismo riješili ovaj problem, razvili smo Aptamin C, DNK aptamer koji se specifično vezuje za vitamin C i inhibira oksidaciju vitamina C. Aptameri su jednolančani oligonukleotidi zasnovani na DNK ili RNK sposobnima da selektivno vežu širok spektar molekula. Aptameri se obično identifikuju in vitro metodom selekcije koja se naziva Sistematska evolucija liganada eksponencijalnim obogaćivanjem ili "SELEX". Identificirali smo da Aptamin C inhibiraoksidacijavitamina C iz nekoliko oksidacionih agenasa i održava antioksidativnu aktivnost tokom dugotrajnog skladištenja. Da bi se potvrdila procena bezbednosti Aptamina C, eksperimenti su sprovedeni na ćelijskom nivou i direktno primenjeni na ljude i nije primećena toksičnost. Kožne bolesti kao što su atopijski dermatitis, psorijaza i akne povezane su s imunološkim odgovorom i ROS.23vitamin Cima sposobnost uklanjanja ROS-a i ima protuupalni učinak.24 Aptamin C sprječavaoksidacijavitamina C i maksimizira njegovu efikasnost kroz sporo oslobađanje. Stoga očekujemo da će kompleks Aptamin C-vitamina C pokazati sinergijski efekat.

2|MATERIJALI I METODE

2.1|Aptamer skrining na vitamin C sa smanjenim grafen-oksidom

Ova metoda je izvedena modifikacijom metode prethodnog istraživanja.25 SsDNK kandidati koji se mogu specifično vezati zavitamin Crazvijeni su iz nasumične biblioteke ssDNK koja se sastoji od oko 1X1018 različitih sekvenci. Za ssDNA biblioteku koristili smo sekvencu koja je napravljena po narudžbini čija je veličina 60 mera i sadrži 30 nasumično generiranih nukleotidnih sekvenci i mjesto prajmera za amplifikaciju (5′‐ATGCGGATCCCGCGC‐(N)30‐GCGCGAAGCTTGCGC‐3′). Izveli smo ukupno pet krugova dok smo mijenjali eksperimentalni uvjet kako bismo odabrali specifičniji slijed. Ukupna zapremina za reakciju bila je 200 μL. Oko 20 μL 10× vezivnog pufera (10× PBS dodano 10 mmol/L MgCl2), 80 μL rGO (5 mg/mL, razrijeđeno u vodi) i 200 pikomola ssDNA biblioteke (20 μL 100 μmol/L zalihe ) su dodani i uneseni dH2O na 200 μL. Reakcija je nastavljena 30 minuta kako bi se ssDNA biblioteka vezala na rGO, a zatim je smjesa centrifugirana na 20 000 g 20 minuta da se eliminira supernatant. rGO pelet je ispran 1 put sa 200 μL pufera za vezivanje, što je ista koncentracija kao ciljni uslov vezivanja za svaki krug. Za eluiranje kandidata, 200 nanomolavitamin Crazrijeđen u 200 μL pufera za vezivanje dodato je u rGO pelet, a korak eluiranja je trajao 1 sat. Eluirana ssDNK je podijeljena centrifugiranjem, što je učinjeno na 20 000 g 20 minuta i amplificirano. Napravili smo precipitaciju EtOH kako bismo eliminirali nečistoće osim ssDNK prije amplifikacije. Uradili smo asimetrični PCR da bismo dobili amplificiranu ssDNK. Omjer prosljeđivanja prajmera i obrnutog prajmera asimetričnog PCR-a bio je 10:1. Napravili smo elektroforezu na 2,5 postotnom agaroznom gelu da bismo potvrdili PCR proizvod s nekoliko mikrolitara. Asimetrični PCR ne može proizvesti samo ssDNK. Dakle, uradili smo metodu drobljenja i namakanja da izolujemo ssDNK kandidate. Za ovu metodu, uradili smo elektroforezu na 12 posto poliakrilamidnom prirodnom gelu i obojeni gel etidijum bromidom (EtBr). Da bi se odvojila dvolančana DNK (dsDNA) i ssDNA, dio gela obojen ssDNA je izrezan, usitnjen i ekstrahiran ssDNK puferom za drobljenje i natapanje (500 mmol/L NH4OAc, 0,1 posto SDS, 0,1 mmol/L EDTA) preko noći. Uprašeni gel je odvojen centrifugiranjem. Supernatant koji sadrži ssDNA se koncentrira i pročišćava precipitacijom EtOH. Osušena ssDNK je sakupljena sa steriliziranom dH2O i ona je korištena za sljedeći krug kao biblioteka.

prirodni sastojcicistanche amazon

2.2|Eksperiment izotermne titracione kalorimetrije (ITC).

Eksperiment kalorimetrije izotermne titracije izveden je korišćenjem VP-ITC sistema (MicroCal Inc Northampton) na 25 stepeni u fiziološkom rastvoru fosfatnog pufera sastavljenom od 1 mmol/L magnezijum hlorida (pH 7,4). Prije svakog eksperimenta titracije, Aptamin C 2 mL ivitamin C600 µL uzoraka je degazirano 30 minuta pod vakuumom, bez miješanja, na temperaturi nekoliko stepeni nižoj od one u eksperimentu. Pripremili smo 0,2 mmol/L vitamina C koji je ubrizgan 25 puta u alikvotima od 2 µL u ćeliju uzorka od 1,8 mL koja sadrži Aptamin C u koncentraciji od 0,02 mmol/L. Podaci su uklopljeni u izotermu vezivanja na jednom mjestu korištenjem programa s origin za ITC v.5.0 (MicroCal Inc).

2.3|Testovi na mikroploči bazirani na fluorescenciji za oksidaciju vitamina C

Oksidacijaofvitamin Cmjeren je detekcijom oksidiranog produkta dehidroaskorbata (DHA) korištenjem modificirane verzije metode koju su opisali Vislisel et al.7 U ovoj metodi, DHA se detektuje reakcijom s o-fenilendiaminom (OPDA) kako bi se formirao proizvod fluorescentne kondenzacije 3-( dihidroksietil)furo[3,4-b] kinoksalin-1-on. Test je izveden na sljedeći način na crnim pločama sa 384 jažice (Greiner Bio-One). Aptameri su prvo rastvoreni u fiziološkom rastvoru sa fosfatnim puferom, pH 7,2, koji sadrži 1 mM MgCl2, u koncentraciji od 200 µmol/L, a zatim preklopljeni zagrevanjem na 95 stepeni i ostavljeni da se polako hlade do sobne temperature 15 minuta. Presavijeni aptameri su zatim razrijeđeni 1:1 (v:v) u svježe pripremljenom rastvoru od 5 mmol/Lvitamin Cu puferu za analizu [50 mmol/L natrijum acetata, 1 posto (w/v) BSA, 0,05 posto (v/v) Tween 20, 1mM MgCl2 (Sigma, sve komponente) podešen na pH 5,5], i smjesa je inkubirana 30 minuta na sobnoj temperaturi, da bi se omogućilo da se aptameri vežu prije dodavanja oksidatora. Oksidizatori su zatim dodani u rastvor vitamina C/aptamera u koncentracijama (EM) H2O2 (Sigma). Oksidizatori su prethodno razrijeđeni do njihove radne koncentracije u puferu za ispitivanje. Uzorci su zatim inkubirani na sobnoj temperaturi 10 minuta prije dodavanja OPDA (Sigma) u koncentraciji od 5,5 mmol/L u puferu za ispitivanje. Neposredno nakon dodavanja OPDA, fluorescencija uzoraka na 425 nm određena je pomoću SpectraMax® i3X čitača ploča (Molecular Devices) sa ekscitacijom na 345 nm, tokom 45-minutnog vremenskog toka sa mjerenjima svakih 60 sekundi. Svi uzorci i posude koje sadrže reagens umotane su u foliju kako bi se zaštitile od svjetlosti tokom svih inkubacija provedenih za fluorescentne testove.

2.4|Mjerenje smanjenja vitamina C korištenjem DCPIP (2,6-dihlorofenolindofenol)

Da bi se utvrdilo smanjenje odvitamin C, eksperimente smo proveli koristeći DCPIP reakciju. Vitamin C reaguje sa DCPIP, menjajući boju iz plave u bezbojnu. Pripremljeni vitamin C tretiran je sa 5 posto Aptamina CTM, a neobrađeni vitamin C je inkubiran na sobnoj temperaturi 8 sedmica. Uzorak je mjeren nakon 2, 4 i 8 sedmica. Oko 2 mL DCPIP je dodano u konusnu tikvicu pomoću pipete, a prvi neobrađeni vitamin C je dodavan sve dok otopina nije postala bezbojna. Iznosvitamin Cdodat je izmjeren i ponovljen s drugim uzorcima. Prema ovim podacima izračunat je stepen redukcije svakog uzorka.

2.5|In vitro studija o efektu protiv bora u ljudskim dermalnim fibroblastima

Da bi se procijenila vitalnost ćelija u ljudskim dermalnim fibroblastima, ćelije su tretirane različitim konačnim koncentracijama aptamina C savitamin C(Aptamin C ug plus vitamin C ug/mL) {{0}}.01 plus 0,5 ug/mL, 0,1 plus 5 ug/mL, 0,5 plus 25 ug /mL, 1 plus 50 ug/mL i 2 plus 100 ug/mL. Zatim su ćelije tretirane u koncentracijama aptamina C sa vitaminom C da bi se otkrio intracelularni kolagen, intracelularna kolagenaza (MMP-1) i aktivnost elastaze.

Ljudski dermalni fibroblasti (HDF) odabrani su na osnovu "Smjernica za procjenu efikasnosti funkcionalne kozmetike (ΙI)" MFDS-a. HDF-ovi su uzgajani u DMEM/F12 3:1 mješavini visoke glukoze sa dodatkom 10 posto FBS i 1 posto antibiotika-antimikotika u vlažnoj atmosferi od 5 posto CO2 na 37˚C.

HDF-ovi (5 × 104 ćelija/jažici) su zasijani u ploče sa 24 jažice i inkubirani 24 sata i tretirani su različitim koncentracijama Aptamina C savitamin Ci inkubirano 24 sata. Nakon 24 sata, supernatant je sakupljen, a količina prokolagena oslobođenog u mediju izmjerena je na 450 nm korištenjem Procollage Type IC-Peptide (PIP) ELISA kompleta. Stepen proizvodnje kolagena kalibriran je ukupnim sadržajem proteina i upoređen sa TGF-1 kao pozitivnom kontrolom. Za kontrolu rastvarača korišten je medij bez materijala za ispitivanje.

HDF-ovi (5 × 104 ćelija/jažici) su zasijani u ploče sa 24 jažice i inkubirani 24 sata i tretirani su različitim koncentracijama Aptamina C savitamin Ci inkubirano 48 sati. Nakon 48 sati, aktivnost kolagenaze je izmjerena na 450 nm pomoću MMP-1 Human ELISA kompleta. Aktivnost MMP-1 procijenjena je ukupnim sadržajem proteina i upoređena sa TGF-1 kao pozitivnom kontrolom. Za kontrolu rastvarača korišten je medij bez materijala za ispitivanje.

Svi podaci su izraženi kao srednja vrijednost ± standardna devijacija i došli su iz 3 nezavisna eksperimenta. Statistička analiza provedena je t-testom nezavisnih uzoraka korištenjem SPSS® softverskog programa (IBM) na nivou značajnosti P <>

2.6|Merenje bora na koži pomoću 3D sistema za analizu slike

U ovoj studiji su učestvovale 22 ispitanice (prosječna starost: 50,05 ± 2,94 godine). Bore kože vraninih nogu procijenjene su 3D sistemom za analizu slike na početku, 4 i 8 sedmica. Hidratacija kože procijenjena je kapacitivnom metodom, a TEWL metodom difuzije vode na površini kože i elastičnost kože metodom sukcije procijenjene su na početku, 2, 4 i 8 sedmica nakon tretmana. Takođe, samoupitnike o efikasnosti popunjavali su ispitanici u 2. i 4. i 8. sedmici, a upitnik o upotrebljivosti ispunjavali su ispitanici 8. sedmica nakon tretmana. Svi dobijeni podaci su statistički analizirani SPSS® softverom. Parametri bora vraninih stopala procenjeni su pomoću PRIMOS® Premium (GFMesstechnik GmbH). Ovaj sistem je omogućio kvantitativnu analizu hrapavosti, dubine, površine i volumena izbočenih na boru kože. Slika je analizirana na istom području u smislu parametara bora kože (1, Prosječna dubina bora; 2, Srednja dubina najveće bore; 3, Maksimalna dubina najveće bora; 4, Ukupna površina bora; 5, Ukupan volumen bora; 6 , Ukupni faktor forme bora; 7, Ukupna dužina bora; 8, Ra; 9, Ry; i 10, Rz) na početku, 4 i 8 sedmica nakon tretmana Primos 5.8 E ver. Softver.

3|REZULTATI

3.1|Za uspješno izvođenje rGO-SELEX-a s nestabilnom metom bio je potreban rigorozan pristup pripremi pufera

Biblioteka ssDNK, koja je bila vezana za rGO putem π-π interakcija slaganja između aromatičnih prstenova površine grafena i DNK baza 26,27 i nevezane ssDNK na rGO, odvojena je i uklonjena centrifugiranjem. ssDNK koja je adsorbovana na površini rGO je eluirana kroz tretman sa ciljnim jedinjenjem. Prema literaturnim izvještajima, konformacija aptamera se mijenja nakon vezivanja sa metom i slabljenjem interakcije π‐πslaganja sa rGO.28-31 Ovaj proces je ponovljen tokom pet rundi. Svaka sledeća runda se odvijala sa oštrijim uslovima pufera i kraćim vremenima eluiranja. Ova izvedba nam je omogućila da održimo ssDNK sa boljom specifičnošću za ciljna jedinjenja.

NGS podaci obogaćene biblioteke proizvedeni rGO-SELEX procesom dali su 404071 sekvencu. Odabrali smo 119 sekvenci iz ovih podataka, sortirali ih u 11 grupa na osnovu strukturne sličnosti i odabrali reprezentativne sekvence za aptamer kandidate (Slika 1A).

3.2|Odabir aptamina C

Sekundarne strukture kandidata za Aptamin C su predviđene korišćenjem besplatnog softvera M-Fold.32,33 Kandidati su grupisani prema svom položaju, dužini, obliku i broju stabljike i petlje strukture najvišeg potencijala (Slika 1B). DHA, oksidvitamin C, detektuje se njegovom reakcijom sa o-fenilendiaminom (OPDA) koji igra ulogu indikatora.34 Ako se aptamer veže i sprečava njegovooksidacija, na vitamin C i sprečava njegovu oksidaciju, signal fluorescencije 3-(dihidroksietil)-furo-[3,4-b] kinoksalin-1-ona, kondenzacijskog proizvoda vitamina C i OPDA, bit će niži od kontrola bez aptamera. Grafikon svakog kandidata aptamera pomiješanog s vitaminom C i oksidantom, sa pozitivnim kontrolama,vitamin Cplus sekvence oksidatora i skrembla pomiješane s vitaminom C i oksidantom (slika 1C). Pokazalo se da pet aptamera, aptamin Cb, Cc, Cf, Cg i Ck, ima efekte antioksidacije.

3.3|Inhibicija oksidacije vitamina C Aptaminom C

Aptamin C ima visok afinitet vezivanja zavitamin C. Vezivanje aptamina C sa vitaminom C određeno je ITC analizom. Iz izoterme vezivanja mogu se dobiti entalpija (ΔH), entropija (ΔS) i stehiometrija (n) reakcije vezivanja. Aptamin Cb egzotermno vezivanje je detektovano iz ITC merenja, a entalpija (ΔH) je izračunata kao 302,5 ± 3,788, entropija (ΔS) je izračunata kao 18,9, stehiometrija(n) je izračunata kao 56,7 ± {{21. }}.426, a konstante disocijacije (Kd) su izračunate kao 2.13uM za vitamin C. Aptamin Cf egzotermno vezivanje je otkriveno iz ITC mjerenja, a entalpija (ΔH) je izračunata kao 279.2 ± 2.992, izračunata je entropija (ΔS) kao 18.4, stehiometrija(n) je izračunata kao 167 ± 1.15, a konstante disocijacije (Kd) su izračunate kao 0.89uM za vitamin C. Aptamin Ck egzotermno vezivanje je otkriveno iz ITC mjerenja, a entalpija (ΔH ) je izračunata kao 250.4 ± 3.742, entropija (ΔS) je izračunata kao 19.8, stehiometrija(n) je izračunata kao 82.2 ± 0.732, a konstante disocijacije (Kd) su izračunate kao 0.90 µmol/L vitamin C (slika 2A). ITC mjerenja otkrivaju da je promjena entropije nakon povezivanja s aptaminom C glavna pokretačka snaga zavitamin C. Spriječitioksidacijavitamina C u tečnom stanju, svi rastvori su pripremljeni sa dejonizovanom vodom tretiranom azotom. Fluorescencija je izražena i kvantitativno analizirana kada se OPDA (o-fenilendiamin) vezuje za DHA koju stvaraoksidacijavitamina C. Stepen oksidacije vitamina C prema koncentraciji aptamina C (125, 250, 500 i 1000 nmol/L) je upoređen i potvrđen OPDA testom. Rezultati su pokazali da jevitamin Ckonverzija u dehidroaskorbinsku kiselinu bila je sporija kada je koncentracija aptamina C bila viša. (Slika 2B). Ovi podaci dokazuju da je Aptamin C inhibitor oksidacije vitamina C ovisan o dozi.

Proveli smo eksperimente kako bismo utvrdili može li Aptamin C spriječitioksidacijavitamina C tokom dužeg vremenskog perioda. Ko-tretirani aptaminom Cvitamin C, i netretirani vitamin C su bili izloženi svjetlu i ostavljeni da stoje na sobnoj temperaturi 8 sedmica. Kao rezultat toga, kada je netretirani vitamin C ostavljen sam, stepen redukcije je smanjen na manje od polovine za 2 nedelje, a skoro svi su oksidisani nakon 4 nedelje. U prisustvu aptamina C, vitamin C je smanjen na otprilike upola manje od 8 sedmica (slika 2C). Ovo sugerira da Aptamin C sprječava oksidaciju vitamina C tokom dužeg vremenskog perioda.

cistanche bodybuilding

3.4|Analiza aktivnosti intracelularne kolagenaze (MMP-1) i kolagena

Analizom aktivnosti kolagenaze, proizvodnja matriks metaloproteinaze-1 (MMP-1) je značajno smanjena na način ovisan o dozi, sa 7.06 posto, 9.29 posto i 31.81 posto pri koncentracijama od {{1{ {12}}}}.01 plus 0.5 ug/mL, 0.1 plus 5 ug/mL i 0.5 plus 25 ug/ mL (slika 3A). Analizom sinteze kolagena, prokolagen tip Ι karboksi-terminalnog peptida (PIP) je značajno povećan na način koji zavisi od doze, sa povećanjem od 25.{{20}} posto na 0,01 plus 0,5 ug/mL , 41,99 posto pri 0,1 plus 5 ug/mL i 71,18 posto pri 0,5 plus 25 ug/mL (slika 3B).

3.5|Klinička studija o efektima poboljšanja kožnih bora na ljudsku kožu

Statistička analiza parametara bora obavljena je pomoću 3D sistema za analizu slike, kako bi se procijenili efekti poboljšanja bora testnog proizvoda na ljudsku kožu. U poređenju sa kontrolnom grupom, parametar "Prosečna dubina bora" smanjen je za 4,77 odsto u 4 nedelje i 4,25 odsto u 8 nedelja, parametar "Srednja dubina najveće bore" je smanjen za 3,37 odsto u 4 nedelje i 4,53 odsto u 8 nedelja", Parametar maks. dubine najveće bore je smanjen za 4,36 posto za 4 sedmice i 7,19 posto za 8 sedmica, parametar "Ukupna dužina bora" je smanjen za 1,61 posto za 4 sedmice i 2,67 posto za 8 sedmica, parametar "Ra" je smanjen za 4,22 posto u 4 sedmice i 3,90 posto u 8 sedmici, "Ry" parametar je smanjen 2,66 posto u 4 sedmice i 7,11 posto u 8 sedmici, "Rz" parametar je smanjen za 3,69 posto u 4 sedmice i 6,22 posto u 8 sedmici, dekrement je bio 3,69 procenat ‐7,11 procenata (Slika 4).

4|ZAKLJUČAK

vitamin Cje komercijalno važan, ali nestabilan molekul, pa je poboljšanje njegove stabilnosti od interesa za različite tržišne sektore. Naš rad pokazuje da Aptamin C, DNK aptameri, potencijalno produžava rok trajanja i povećava potenciju takvih proizvoda odlaganjemvitamin C oksidacijau rješenju. Pokazali smo kliničku efikasnost kompleksa Aptamin C u poboljšanju bora i hidrataciji kože. Kompleks aptamina C takođe može pomoći u ublažavanju teške kože.

poboljšati izbjeljivanje kože