Heterologni AZD1222 režim pripreme i pojačanja BNT162b2 efikasnije izaziva neutralizirajuća antitijela, ali ne i memorijske T ćelije, nego homologni režim BNT162b2
Aug 07, 2023
apstraktno
Pozadina: Komparativna analiza SARS-CoV-2-specifičnih imunoloških odgovora izazvanih različitim režimima primarnog pojačanja potrebne su za uspostavljanje efikasnih režima za kontrolu COVID-19. Metoda: U ovoj prospektivnoj opservacijskoj kohortnoj studiji, šik-specifični imunoglobulin G (IgG) i neutralizirajuća antitijela (nAbs) zajedno sa šik-specifičnim T-ćelijskim odgovorima u grupama homolognih BNT162b2/BNT162b2 ili AZD1222/AZ222222222222222222222222, koje odgovaraju starosnoj dobi. Vakcinacija BNT162b2 i prethodna infekcija/vakcinacija divljeg tipa SARS-CoV-2 su procijenjeni. Rezultati: Najveći imuni odgovori postignuti su nakon druge doze vakcine u grupama koje nisu bile vakcinisane i nakon prve doze u grupi koja je prethodila infekciji/cijepljenju. Najveći titri anti-spike IgG i nAb bili su značajno veći u grupama koje su primile AZD1222/BNT162b2 vakcinaciju i prethodne infekcije/vakcinacije nego u grupama koje su primale BNT162b2/BNT162b2 ili AZD1222/AZD1222. Međutim, učestalost CD4 plus T ćelija koje proizvode interferon-c bila je najveća u grupi koja je vakcinisana BNT162b2/BNT162b2. Slični rezultati uočeni su u analizi polifunkcionalnih T ćelija. Kada su analizirani odgovori nAb i CD4 plus T-ćelija protiv Delta varijante, prethodna infekcija/cijepljena grupa je pokazala veće odgovore od grupa drugih homolognih ili heterolognih režima vakcinacije. Zaključak: nAbs se efikasno izazivaju heterolognom vakcinacijom AZD1222/BNT162b2, kao i prethodnom infekcijom/vakcinacijom, dok se spike-specifični CD4 plus T-ćelijski odgovori efikasno izazivaju homolognom BNT162b2 vakcinacijom. Imunitet koji prepoznaje varijante se efikasnije stvara prethodnom infekcijom/cijepljenjem nego drugi homologni ili heterologni režimi vakcinacije.
cistanche tubulosa-poboljšava imuni sistem
1. Uvod
Teški akutni respiratorni sindrom korona virus 2 (SARS-CoV-2) širi se globalno od svog pojavljivanja u decembru 2019. godine, a ubrzan je razvoj efikasnih vakcina protiv bolesti korona virusa 2019 (COVID-19) [1 ]. Uspjeh ovog poduhvata viđen je relativno brzo, a nekoliko vakcina koje koriste spike (S) protein kao antigen vakcine uspješno je pokazalo sigurnost i efikasnost u prevenciji simptomatskog COVID-19. Konkretno, vakcina zasnovana na mRNA BNT162b2 (Comirnaty, Pfifizer-BioNTech) i vakcina bazirana na vektoru adenovirusa AZD1222 (Vaxzevria, AstraZeneca) su inicijalno odobrene i široko primjenjivane kao dvodozni primarni režim za pojačavanje. Dvije doze BNT162b2 imale su 95 posto (95 posto intervala pouzdanosti [CI], 90–98 posto) djelotvornosti protiv simptomatskog COVID-19 [2], a dvije doze AZD1222 imale su 70 posto (95 posto CI, 55–81). procenat ) efikasnost [3]. Zanimljivo je da su heterologni režimi primarnog pojačanja licenciranih vakcina protiv COVID-19 zadobili značajan interes i kasnije su započeli u nekoliko zemalja uprkos nedovoljnim podacima o imunogenosti i sigurnosti. BNT162b2 koji se daje kao pojačana doza kod osoba koje su primamljivo vakcinisane sa AZD1222 induciranim robusnim titrom S-specifičnog imunoglobulina G (IgG) antitijela (Ab), odgovorima neutralizirajućih antitijela (nAb) i interferon-c plus (IFN-c plus) T ćelijama [4 ,5]. Međutim, nekoliko studija je procijenilo efikasnost heterologne AZD1222/BNT162b2 vakcinacije u poređenju sa homolognom BNT162b2/BNT162b2 vakcinacijom [6–8], a ovim studijama je nedostajala sveobuhvatna evaluacija S-specifičnih T-ćelijskih odgovora. Shodno tome, ostaje nejasno da li heterologna AZD1222/BNT162b2 vakcinacija rezultira snažnim unakrsnim varijantnim odgovorima nAb ili T-ćelija. Još jedan primjer heterolognog priming-pojačanja može se vidjeti kod osoba koje su bile zaražene SARS-CoV-2 i kasnije vakcinisane protiv virusa. Nekoliko studija sugerira da se nivoi specifičnih vezanih Ab i nAb detektiraju u visokim razinama kod osoba s prethodnom infekcijom i vakcinacijom, iako nije bilo komparativnih analiza [9,10]. Zdravstveni radnici sa prethodnom infekcijom SARS-CoV-2 imaju veće Ab titre kao odgovor na jednu dozu mRNA vakcine od onih koji prethodno nisu bili zaraženi [11]. Štaviše, osobe s prethodnom infekcijom pokazuju pojačane S-specifične T-ćelijske odgovore i B-ćelije koje izlučuju memoriju nakon prve doze bez pojačane doze [12]. U ovoj studiji, sveobuhvatno smo ispitali humoralnu i ćelijsku imunogenost homolognih i heterolognih režima prime-boost u prospektivnoj opservacionoj kohorti sa uporednim poređenjem S-specifičnog vezujućeg Ab, nAb i specifičnog CD4 plus T-ćelija odgovora. . Također smo procijenili imunološke rezultate kod učesnika koji su bili zaraženi divljim tipom SARS-CoV-2 i primili vakcine protiv COVID-19 kako bismo utvrdili da li prethodna infekcija i vakcinacija efikasno izazivaju imunološki odgovor protiv Delta varijante.
cistanche koristi za muškarce - jača imuni sistem
2. Metode
2.1. Dizajn studija
Multicentrična prospektivna kohorta osnovana je u martu 2021. za proučavanje imunoloških odgovora na vakcinaciju protiv COVID{1}}. Učesnici u ovoj kohorti su dobrovoljno regrutovani među zdravstvenim radnicima i prvobitno su trebali primiti dvije doze BNT162b2 u 3-nedeljnom intervalu ili AZD1222 u 12-nedeljnom intervalu. Međutim, dio pojedinaca prvocijepljenih AZD1222 primio je dopunsku dozu BNT162b2 između maja i juna 2021. i bio je uključen u grupu vakcinacije AZD1222/BNT162b2. Među učesnicima u kohorti, oni koji su imali prethodnu infekciju divljem tipom SARSCoV-2 i primili BNT162b2 ili AZD1222 bili su uključeni kao prethodna infekcija/cijepljena grupa. Svi primaoci vakcine analizirani u ovoj studiji bili su podudarni po godinama među grupama. Uzorci periferne krvi prikupljeni su od svih učesnika u kohorti u svakoj vremenskoj tački (T): prije i 3 sedmice nakon prve doze vakcine (T1 i T2, respektivno), 5 sedmica nakon 1. doze BNT162b2, ili 11 sedmica nakon 1. AZD1222 doza (T3), i 14 sedmica nakon 1. doze vakcine (T4). Šematski prikaz protokola studije dat je na slici 1. Za poređenje, uzorci rekonvalescenta su dobijeni od nevakcinisanih pacijenata zaraženih SARSCoV-2 Delta varijantom potvrđene lančanom reakcijom polimeraze reverzne transkripcije u realnom vremenu korištenjem Seegene Allplex { {38}}NCoV Assay kit (Seegene, Koreja) i Illumina BTSeq SARS-CoV-2 komplet za sekvenciranje cijelog genoma (Celemics Inc, Koreja) na MiSeq sekvenceru (150-bp upareni-end način rada; Illumina, San Diego, Kalifornija, SAD). Bazna sekvenca dobijena putem BTseq upoređena je sa NCBI referentnom sekvencom NC_045512.2 korištenjem softvera IGV 2.10 da se potvrdi Delta varijanta. Studiju su odobrili institucionalni odbori za reviziju svakog instituta koji je učestvovao i sprovedena je u skladu sa principima Helsinške deklaracije. Svi učesnici su dali pismeni informirani pristanak prije upisa.
2.2. Učesnici studije
Ova kohorta se sastojala od 22 učesnika koji su primili homolognu vakcinu BNT162b2/BNT162b2 (srednja starost, 38.0 godina; 31,8 procenata muškaraca), 20 učesnika koji su primili homolognu vakcinu AZD1222/AZD1222 (srednja starost, 39,7 procenata muškaraca) 23,7 procenata. i 9 učesnika koji su primili heterolognu vakcinu protiv AZD1222/BNT162b2 (srednja starost, 38,2 godine; 33,3 odsto muškaraca). Od 11 učesnika sa prethodnom infekcijom divljeg tipa SARS-CoV-2 (prosječna starost, 38,5 godina; 27,3 posto muškaraca), 2 i 9 su vakcinisani sa BNT162b2/BNT162b2 i AZD1222/AZD1222, respektivno. Demografski podaci različitih vakcinisanih grupa su dati u Dodatnoj tabeli 2. Svi učesnici sa prethodnom infekcijom divljem tipom SARS-CoV-2 imali su asimptomatski ili blagi COVID-19, a 3 od njih su imali upalu pluća. Srednje vrijeme od potvrde COVID-19 do prve vakcinacije bilo je 121,5 (interkvartilni raspon [IQR], 102,3–252,5) dana. Demografija učesnika sa prethodnom infekcijom i vakcinacijom divljeg tipa SARS-CoV-2 data je u Dodatnoj tabeli 1. Uzorci rekonvalescenta uzeti su od 17 pacijenata (prosječne starosti 53 godine; 52,9 posto muškaraca) zaraženih SARS-om -CoV-2 Delta varijanta i hospitaliziran zbog umjerenog do kritičnog COVID-19 (umjeren, 17,6 posto; težak, 35,3 posto; kritično bolestan, 47,1 posto). Srednje vrijeme od pojave simptoma povezanih sa COVID{70}}do uzorkovanja je 24 (IQR, 22–32) dana. Demografija učesnika u rekonvalescenciji SARS-CoV-2 Delta data je u Dodatnoj tabeli 2 i Tabeli 3.
2.3. Vezujuća antitela
SARS-CoV-2 S-specifični vezni abs analizirani su korištenjem komercijalnog imunoeseja. Elecsys anti-S proteinski test (Roche Diagnostics, Njemačka) je elektrokemiluminiscentni imunotest koji se koristi za otkrivanje SARS-CoV-2 S-specifičnih antitijela na Cobas e411 analizatoru (Roche Diagnostics, Njemačka), s rasponom mjerenja od { {8}}.4 U/mL do 250 U/mL (do 2500 U/mL sa ugrađenim razblaženjem 1:10 i do 12.500 U/mL sa ugrađenim razblaženjem 1:50). Rekombinantna domena za vezivanje receptora S proteina korišćena je sa principom sendviča sa dvostrukim antigenom. Antigeni u reagensu hvataju pretežno anti-SARSCoV{19}} IgG. Elecsys anti-nukleokapsid proteinski test (Roche Diagnostics, Njemačka) korišten je za otkrivanje prethodnih infekcija SARS-CoV-2, sa graničnim indeksom od 1,0.
prednosti dodatka cistanche-povećavaju imunitet
2.4. Test neutralizacije smanjenja plaka
Testovi neutralizacije smanjenja plaka za divlje tipove SARS-CoV- 2 virusa (BetaCoV/Korea/KCDC03/2020) i Delta varijantni soj YS117 (GenBank pristupni broj MZ798798 i GISAID pristupni broj EPI{ {8}}ISL_3411836) izvedeni su pomoću uzoraka plazme. Virus je uzgajan na Vero E6 ćelijama u laboratoriji nivoa 3 biološke sigurnosti u Avison Biomedical Research Center u Seulu, Koreja. Inaktivirani uzorci plazme (135 lL) inaktiviranih uzoraka plazme 2-putasto su serijski razrijeđeni (1:40 do 1:1280) i dodani u jednaku zapreminu 100 puta većoj od 50 posto infektivne doze kulture tkiva (TCID50) virus. Izolati koji sadrže 100 puta veći TCID50 inkubirani su u pločama 96-jažica 60 minuta na 37 C. Smjese virusa i plazme su inkubirane 60 minuta na 37 C u CO2 inkubatoru. Mješavine virusa i plazme su zatim dodane Vero E6 ćelijama zasijanim u 24-pločicu sa 1x105 ćelija/jažici i inkubirane 1 h na 37 C. Prekrivni medij sastavljen od 2 posto fetalnog goveđeg seruma (FBS) u DMEM-u i 1% agar je dodat u ćelije E6 i inkubiran 3 dana na 37 C u CO2 inkubatoru. Nakon formiranja plaka, 10 posto otopine formaldehida i 0,33 posto neutralne crvene u fiziološkom rastvoru puferiranom s fosfatom (PBS) korišteno je za fiksiranje i bojenje sloja kulture stanica. Neutralizirajuće razrjeđivanje svakog uzorka određeno je identifikacijom jažice s najvećim razrjeđenjem u plazmi bez vidljivog citopatskog efekta. Doze neutralizacije od 50 posto (ND50) izražene su kao recipročno razrjeđenje plazme, što je rezultiralo 50 posto smanjenjem broja plaka u poređenju sa pozitivnom kontrolom virusa. Za izračunavanje titara ND50 korištena je Spearman-Kärberova metoda. U poređenju sa međunarodnim standardnim serumima SZO (NIBSC 20–136; titar nAb: 1000 IU/mL), titri nAb su pretvoreni u međunarodne jedinice po mililitru (IU/mL).
Slika 1. Šematski prikaz kohorti primaoca vakcine. Studijska shema za otkrivanje SARS-CoV-2 šik-specifičnih vezujućih antitijela, neutralizirajućih antitijela i odgovora T-ćelija u uzorcima periferne krvi osoba vakcinisanih za COVID-19. Studija uključuje BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n=9) i prethodni divlji tip SARS-CoV{{20 }} infekcija/vakcinacija (n=11) grupa. Među prethodnim infekcijama/vakcinacijom divljeg tipa SARS-CoV-2, 2 i 9 je vakcinisano sa BNT162b2/BNT162b2 i AZD1222/AZD1222, respektivno. Istorija infekcije SARS-CoV-2 potvrđena je pozitivnim testom na anti-SARS-CoV-2 nukleokapsidna antitijela. T, vremenska tačka; sedmica, sedmica.
2.5. T-ćelijski testovi
Mononuklearne ćelije periferne krvi (PBMC) izolovane su centrifugiranjem u gradijentu gustine koristeći Leucosep epruvete (Greiner Bio-One) koje sadrže medijum za odvajanje limfocita. Nakon centrifugiranja na 800 g u trajanju od 15 minuta sa prekidom, obogaćena ćelijska frakcija koja se sastoji od PBMC je sakupljena i isprana sa 20 mL PBS. Nakon centrifugiranja na 300 g tokom 10 minuta, ćelijska peleta je resuspendirana u 10 mL PBS za brojanje. Nakon centrifugiranja na 300 g tokom 10 minuta, ćelije su kriokonzervirane u FBS sa 10 posto dimetil sulfoksida na 180 C do upotrebe. Za intracelularno bojenje citokina (ICS) IFN-c, interleukina-2 (IL-2) i faktora tumorske nekroze (TNF), koristili smo peptidne grupe 15-mer peptida koji se preklapaju za 11 aminokiseline koje pokrivaju imunodominantne dijelove SARS-CoV-2 Wuhan S proteina (aa 304–338, 421–475, 492–519, 683–707, 741–770, 785–802 i 8385–127; Biotec). Da bismo uporedili odgovore T-ćelija protiv sojeva Wuhan i Delta, koristili smo dva različita skupa skupova S peptida koji sadrže nekonzervirane regione S sekvenci između sojeva Wuhan i Delta (B.1.617.2 loza) (Miltenyi Biotec). Nakon odmrzavanja PBMC-a i mirovanja preko noći, 1 106 PBMC-ovi su stimulirani peptidnim skupovima u konačnoj koncentraciji od 1 mg/mL i anti-humanim CD28/CD49d (1 mg/mL; BD Biosciences) 1 h u { {45}}ploča u RPMI-1640 mediju koji sadrži 1 posto penicilina-streptomicina, 2 mM L-glutamina i 10 posto FBS. PBMC kultura je inkubirana još 5 sati nakon dodavanja brefeldina A i monenzina (BD Biosciences) na 37 C u 5 posto CO2. Nakon stimulacije, ćelije su isprane PBS-om i obojene sa Live/Dead-Aqua (Invitrogen) 20 minuta na sobnoj temperaturi, nakon čega je slijedio koktel površinskih Abs 20 minuta na sobnoj temperaturi, uključujući anti-CD14- BV510, anti-CD19-BV510, anti-CD4- BV650, anti-CD3-BV786 i anti-CD8-APC-Cy7 (BD Bioscience). Stanice su fiksirane i permeabilizirane korištenjem Foxp3/Transcription Factor Staining Buffer Set-a (eBioscience), a zatim obojene koktelom intracelularnih Abs, uključujući anti-TNF-FITC, anti-IL-2-PE (eBioscience) i anti- IFN-c-APC (BD Biosciences) 20 minuta na sobnoj temperaturi. Po završetku bojenja, ćelije su analizirane na LSR II instrumentu sa FACSDiva (BD Biosciences), a podaci su analizirani u softveru FlowJo (FlowJo LLC).
cistanche biljka koja povećava imuni sistem
2.6. Statistička analiza
Podaci ucrtani u linearnoj skali izraženi su kao srednja vrijednost ± standardna devijacija. Podaci ucrtani u logaritamskim skalama izraženi su kao geometrijska sredina ± geometrijska standardna devijacija. Mann-Whitney U ili Wilcoxon testovi su primijenjeni za neparna ili uparena poređenja, respektivno. Statističke analize su bile {{0}}, pri čemu se P < 0.05 smatralo značajnim. Sve analize su obavljene u R studiju ili GraphPad Prism v9.0.
3. Rezultati
3.1. Kinetika imunoloških odgovora izazvanih različitim režimima vakcinacije
Prvo smo ispitali titre anti-S IgG nakon vakcinacije različitim režimima. Kao što se očekivalo, prva doza je značajno povećala titre anti-S IgG (T2), a druga doza dodatno je značajno povećala titre anti-S IgG u homolognoj BNT162b2/BNT162b2 (T3) i AZD1222/AZD1222 vakcinaciji (T4) i heterolognom AZD1222/ BNT162b2 grupe za vakcinaciju (T4) (slika 2A). U grupi sa prethodnom infekcijom/cijepljenjem, prva doza je maksimalno povećala titre anti-S IgG (T3), ali druga doza nije dodatno povećala titre anti-S IgG (T4). Također smo ispitali S-specifične CD4 plus T-ćelijske odgovore nakon direktne ex vivo stimulacije sa peptidnim skupovima koji pokrivaju SARSCoV-2 Wuhan S proteinsku sekvencu divljeg tipa. Na osnovu ICS-a, prva doza je značajno povećala učestalost ćelija koje proizvode IFN-c među CD4 plus T ćelijama, a druga doza dodatno je značajno povećala učestalost u grupama vakcinisanih BNT162b2/BNT162b2 (T3) i AZD1222/BNT162b2 (T4). (slika 2B). U grupama AZD1222/AZD1222 i prethodne infekcije/cijepljenja, prva doza je značajno povećala učestalost IFN-c plus ćelija među CD4 plus T ćelijama, ali druga doza nije dodatno povećala učestalost.
3.2. Poređenje titara Ab među različitim režimima
Zatim smo uporedili vršne titre vezivanja Ab među različitim režimima vakcinacije. Kao vršne titre, odabrali smo titre anti-S IgG nakon druge doze u grupama vakcinacije BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 i AZD1222/BNT162b2 i nakon prve doze u grupi koja je prethodila infekciji/cijepljenju. Najveći titri anti-S IgG bili su značajno veći u grupi vakcinisanoj AZD1222/BNT162b2 nego u grupama vakcinisanih BNT162b2/BNT162b2 ili AZD1222/AZD1222 (slika 3A). Slično tome, vršni titri anti-S IgG bili su značajno viši u grupi koja je prethodila infekciji/cijepljenju nego u grupama vakcinisanih BNT162b2/BNT162b2 ili AZD1222/AZD1222. Nije bilo razlike u titrima anti-S IgG između grupa koje su primale AZD1222/BNT162b2 i prethodne infekcije/cijepljene grupe. Također smo procijenili titre nAb u vršnim vremenskim tačkama: nakon druge doze u grupama vakcinacija BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 i AZD1222/BNT162b2 i nakon prve doze u grupi koja je prethodila infekciji/cijepljenju. Zanimljivo je da su titri nAb bili značajno viši u grupi vakcinisanoj AZD1222/BNT162b2 nego u grupama vakcinisanih BNT162b2/BNT162b2 ili AZD1222/AZD1222 (slika 3B). Pored toga, titri nAb bili su značajno viši u grupi koja je prethodila infekciji/cijepljenju nego u grupama vakcinisanih BNT162b2/BNT162b2 ili AZD1222/AZD1222. Nije bilo razlike u titrima nAb između grupa AZD1222/BNT162b2 i prethodne infekcije/cijepljenja. Nivo humoralnog odgovora izazvan različitim režimima vakcinacije kategoriziran je u jake, umjerene i bez/slabe odgovore na osnovu procentualnog rangiranja. Udio snažnog odgovora bio je najveći u grupi koja je prethodila infekciji/cijepljenju, nakon čega je slijedila grupa vakcinisana AZD1222/BNT162b2 u pogledu analize anti-S IgG (slika 3C) i nAb (slika 3D). Uzeti zajedno, ovi rezultati pokazuju da je heterologna priprema i pojačavanje, uključujući i AZD1222/BNT162b2 vakcinaciju i prethodnu infekciju/vakcinaciju, efikasnije u stvaranju humoralnih odgovora od homolognog prajminga i pojačavanja.
3.3. Poređenje odgovora S-specifičnih CD4 plus T-ćelija između različitih režima
Također smo uporedili S-specifične CD4 plus T-ćelijske odgovore među različitim režimima vakcinacije u vršnim vremenskim tačkama: nakon druge doze u grupama vakcinacije BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 i AZD1222/BNT162b2 i nakon prve doze u prethodnim infekcija/cijepljena grupa. Za razliku od titara anti-S IgG i nAb, učestalost IFN-c plus ćelija među CD4 plus T ćelijama bila je najveća u grupi vakcinisanoj BNT162b2/BNT162b2 (slika 4A). Udio snažnog odgovora također je bio najveći u grupi koja je vakcinisana BNT162b2/BNT162b2, a slijedila je prethodna infekcija/cijepljena grupa (slika 4B). Ovi rezultati pokazuju da imunizacija s drugim homolognim pojačanjem BNT162b2 efikasnije izaziva reakcije T-ćelija memorije nego druga heterologna pojačana vakcinacija ili prva doza vakcinacije nakon prirodne SARS-CoV-2 infekcije. Naprotiv, veća je vjerovatnoća da će heterologni režimi primarnog pojačanja razviti viši nivo humoralnih imunoloških odgovora. Također smo analizirali relativnu učestalost polifunkcionalnih CD4 plus T ćelija koje istovremeno proizvode više citokina (tj. IFN-c, IL-2 i/ili TNF). Grupa vakcinisana BNT162b2/BNT162b2 pokazala je značajno veću učestalost polifunkcionalnih ćelija koje proizvode 2 citokina među S-specifičnim CD4 plus T ćelijama nego vakcinisane grupe AZD1222/AZD1222 ili AZD1222/BNT162b2 (slika 4C). Nije bilo razlike u učestalosti između BNT162b2/BNT162b2 vakcinacije i prethodne infekcije/vakcinacije grupa. Učestalost polifunkcionalnih ćelija bila je značajno veća u grupi vakcinisanoj AZD1222/BNT162b2 nego u grupi vakcinisanoj AZD1222/AZD1222. Pie grafovi koji predstavljaju jedno-, dvostruko- i trostruko pozitivne CD4 plus T ćelije u smislu proizvodnje citokina koji reaguju na S preklapajuće peptidne skupove također su ukazali na relativno visoku učestalost dvostruko ili trostruko pozitivnih ćelija u BNT162b2/BNT162b2 vakcinaciji i prethodnoj infekcije/- vakcinisane grupe (slika 4D).
3.4. Imuni odgovori protiv Delta varijante između različitih režima
Konačno, analizirali smo imune odgovore protiv Delta varijante. U ovu analizu smo uključili rekonvalescente koji su se oporavili od SARS-CoV-2 Delta infekcije radi poređenja. Delta varijantno-specifični titri nAb bili su značajno viši u grupi koja je prethodila infekciji/cijepljenju nego u grupama vakcinisanih BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 ili AZD1222/BNT162b2, a čak su bili i viši od onih u individualnim rekonvalescentima Delta (slika 5A). . Također smo ispitali CD4 plus T-ćelijske odgovore na S protein Delta varijante. U ovoj analizi, izvršili smo ICS IFN-c nakon direktne ex vivo stimulacije koristeći dva različita skupa S peptidnih pulova koji sadrže nekonzervirane regije S sekvenci između Wuhan i Delta sojeva i izračunali smo omjer učestalosti Delta specifičnog IFN-c plus ćelije na frekvenciju Wuhan S-specifičnih IFN-c plus ćelija. Kao što se i očekivalo, taj omjer je bio najveći kod rekonvalescenta Delta. Intrigantno je da je omjer bio veći u grupi koja je prethodila infekciji/cijepljenju nego u grupi koja je vakcinisana BNT162b2/BNT162b2 (slika 5B), iako je Wuhan S-specifični CD4 plus T-ćelijski odgovori bili najveći u grupi vakcinisanoj BNT162b2/BNT162b2 (Sl. 4A). Uzeti zajedno, ovi rezultati pokazuju da su odgovori nAb i CD4 plus T-ćelija koji unakrsno prepoznaju Delta varijantu efikasnije generirani prethodnom infekcijom/cijepljenjem nego homologni ili heterologni režimi vakcinacije.
Slika 2. Odgovori antitela i T-ćelija izazvani različitim prime-boost režimima. Longitudinalni imunološki odgovori prema rasporedu uzorkovanja od prije vakcinacije do 14 sedmica nakon prve vakcinacije. (A) SARS-CoV-2 specifična vezujuća antitijela izmjerena su u BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/ BNT162b2 (n {{ 20}}), i prethodna infekcija/vakcinacija (n=6) grupa. (B) SARS-CoV-2 spike-specifični CD4 plus odgovori T-ćelija su izmjereni u BNT162b2/BNT162b2 (n=19), AZD1222/AZD1222 (n=18), AZD1222/BNT162b2 (n=9), i prethodna infekcija/vakcinacija (n=7) grupe. Podaci su predstavljeni kao geometrijska sredina ± geometrijska SD (A) ili sredina ± SD (B). Statističke analize između vremenskih tačaka unutar svake grupe provedene su korištenjem Wilcoxon signed-rank testa. ns, nije značajno; *P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001.
Slika 3. Humoralni imuni odgovori u vršnim vremenskim tačkama. (A) SARS-CoV-2 antitijela specifična za šiljak su upoređena između BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/ AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n {{ 15}}), i prethodna infekcija/vakcinacija (n=6) grupe u vršnim vremenskim tačkama. (B) Neutralizirajuća antitijela su upoređena između BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n=9) i prethodne infekcije/vakcinacije ( n=11) grupe u vršnom vremenu. Vrhunske vremenske tačke su odabrane na sljedeći način: nakon druge doze u grupama vakcinacije BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 i AZD1222/BNT162b2 i nakon prve doze u grupi s prethodnom infekcijom/cijepljenjem. Podaci su predstavljeni kao geometrijska sredina ± geometrijski SD i analizirani na značajnost koristeći Mann-Whitney test. (C i D) Procenti učesnika sa različitim nivoima humoralnih imunoloških odgovora. Kvantifikacija tipa odgovora (jak, umjeren i nikakav/slab) izražava se kao dio broja primatelja vakcine u svakoj grupi. Tipovi ispitanika koji su odgovorili bili su određeni procentualnim rezultatom izračunatim od svih vakcinisanih učesnika. ns, nije značajno; *P < {{40}}.05, **P < 0.01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001.
4. Diskusija
Trenutno odobrene mRNA vakcine i adenovirusne vektorske vakcine pokazale su izuzetnu efikasnost u prevenciji COVID-19. Međutim, smatra se da heterologna prime-boost vakcinacija poboljšava imunogenost i ublažava povremene nestašice snabdevanja [13]. Osim toga, postavljena su sigurnosna pitanja s vakcinama vektora adenovirusa nakon prepoznavanja teških nuspojava, uključujući životno opasnu vensku trombozu povezanu s vakcinacijom AZD1222, posebno kod mlađih žena [14,15]. Ovo je dovelo do imunizacije heterolognom mRNA za one koji su već primili prvu dozu AZD1222. Iako nisu bili dostupni podaci o efikasnosti, mnoge nacionalne zdravstvene vlasti usvojile su heterologne režime odobrenih vakcina protiv COVID{8}}. Stoga je komparativna studija humoralnih i ćelijskih imunih odgovora izazvanih različitim režimima vakcinacije sa primarnim pojačanjem informativna i pomaže u boljem razumijevanju izazova u stvarnom svijetu. U ovoj studiji, pokazali smo diferencijalnu indukciju humoralnog i ćelijskog imuniteta heterolognim prime-boost vakcinacijama (dodatna tabela 4). Za razliku od nivoa specifičnog vezivanja Ab i titra neutralizacije, koji su bili najviši u vakcinisanoj grupi AZD1222/BNT162b2, S-specifični CD4 plus T-ćelijski odgovori bili su najviši u grupi vakcinisanoj BNT162b2/BNT162b2, a ne u grupi vakcinisanoj AZD1622/BNTvac. grupa. Relativno niski nivoi S-specifičnih odgovora CD4 plus T ćelija kod AZD1222/BNT162b2-cijepljenih učesnika bili su neočekivani i još uvijek mogu dovesti ove osobe u rizik od teške infekcije SARS-CoV-2. Naši nalazi se razlikuju od onih koje su izvijestili Schmidt i kolege, koji su sugerirali da su, nakon heterolognog pojačavanja BNT162b2, titri nAb i odgovori T-ćelija bili značajno povećani kod AZD1222-primiranih osoba [7]. Međutim, apsolutna učestalost CD69 plus IFN-c plus ćelija među CD4 plus T ćelijama je samo neznatno povećana, a ova studija je onemogućila dubinske analize polifunkcionalnosti S-specifičnih T-ćelijskih odgovora. Za osobe koje su prethodno bile zaražene, prva doza vakcine može djelovati kao pojačana imunizacija i snažno inducirati humoralne i ćelijske odgovore [16,17]. Kako se pretpostavlja da je nAb titar ključni faktor zaštite od infekcije SARS-CoV-2 [18], naši rezultati se dobro uklapaju s nedavnim otkrićem o korisnom jačanju imuniteta stečenog infekcijom, uz prilagođenu efikasnost vakcine > 90 posto nakon prve doze kod primalaca vakcine koji su imali prethodnu infekciju SARS-CoV-2 [19]. Nadalje, uprkos značajnom izbjegavanju nAb odgovora protiv Delta varijante među učesnicima studije, primijetili smo najviše nivoe nAb unakrsnog prepoznavanja Delta varijante u grupi učesnika sa prethodnom infekcijom divljeg tipa SARS-CoV-2 i vakcinacija. Međutim, u skladu sa heterolognom grupom vakcinacije AZD1222/BNT162b2, oni sa prethodnom infekcijom koji su vakcinisani imali su slabiji S-specifičan CD4 plus T-ćelijski odgovor od pojedinaca sa homolognom BNT162b2/BNT162b2 vakcinacijom bez prethodne infekcije. Primjetno, naši rezultati pokazuju da dvije doze BNT162b2 dovode do pouzdane i robusne indukcije S-specifičnih CD4 plus T-ćelijskih odgovora, znatno većeg od ostalih režima vakcinacije s primarnim pojačanjem. Ovi nalazi su u skladu s nedavnim izvještajem o četiri različite vakcine protiv COVID-19 [20], dok je naša analiza uključivala heterologne režime primarnog pojačanja i hibridni imunitet od prethodne infekcije i vakcinacije. U skladu s tim, platforme mRNA vakcine mogle bi biti odabrane zbog njihove sposobnosti da induciraju robusne memorijske CD4 plus T ćelijske odgovore. Kako se učestalost prodorne infekcije nakon vakcinacije povećava širom svijeta, sve je veći interes za zaštitu imuniteta od teškog COVID-19. Kako nove SARS-CoV{80}} varijante nastavljaju da se pojavljuju i izbjegavaju humoralnu imunološku odbranu, ćelijski imunitet, koji cilja širok spektar SARS-CoV-2 epitopa koje prepoznaju T ćelije, može pružiti stabilan zaštitni imunitet [21 ], iako determinante ćelijskih odgovora u zaštiti posredovanoj vakcinom još uvijek nisu precizno definirane. Stoga, ostaje nejasno da li se povećana humoralna imunogenost heterologne vakcinacije AZD1222/BNT162b2 dosljedno prevodi u poboljšanu zaštitu, a to zahtijeva dalje istraživanje. Pored toga, treba ispitati da li ljudi koji su razvili slab Tćelijski odgovor nakon vakcinacije, kao što su oni koji su primijenili AZD1222, mogu imati koristi od formulacija T-ćelijske vakcine [22]. Imunitet izazvan infekcijom i vakcinom prirodno slabi tokom vremena; međutim, čini se da se veća zaštita daje osobama koje su prethodno bile zaražene SARS-CoV-2 [23]. Kod vakcinisanih osoba, probojna infekcija varijantom Omicron izaziva manje nAb odgovore od infekcije Delta varijantom [24], a relativno se malo zna o potencijalnim posledicama hibridnog imuniteta izazvanog infekcijom i vakcinacijom različitim sojevima. Ipak, prisustvo polifunkcionalnih S-specifičnih T ćelija u prethodno zaraženim i vakcinisanim učesnicima u našoj studiji je u skladu sa sporijim padom zaštite od teškog COVID-19 u ovoj populaciji i može doprinijeti modificiranju težine bolesti nakon reinfekcije SARS-om. -CoV{100}} varijante [25,26]. Trenutna studija ima nekoliko ograničenja. Prvo, male veličine uzorka u kohorti čine robusnu statističku analizu izazovnom; stoga će naše nalaze trebati dalje potvrditi u većim kohortama. Drugo, nismo bili u mogućnosti testirati uzorke u kasnijim vremenskim tačkama kako bismo utvrdili trajnost i slabljenje humoralnih i ćelijskih imunih odgovora. Treće, naši rezultati mogu potcijeniti utjecaj subdominantnih epitopa T-ćelija izvan dominantnih epitopa. Četvrto, proučavali smo samo cirkulirajuće limfocite, a buduće studije o dreniranju limfnih čvorova nakon vakcinacije mogu biti potrebne da bi se razumjeli mehanizmi koji leže u osnovi diferencijalnih odgovora koji su ovdje uočeni. Ukratko, trenutna studija sa direktnim poređenjima koja se podudaraju sa uzrastom baca svjetlo na neskladnu humoralnu i ćelijsku imunogenost heterolognog pražnjenja i pojačanja u kontekstu izloženosti SARS-CoV-2 antigenu. Naši nalazi naglašavaju kako individualno imunološko iskustvo oblikuje kasniji imunološki odgovor izazvan vakcinacijom protiv COVID{107}}. Dodatni podaci o efektivnosti u stvarnom svijetu i laboratorijska istraživanja dodatno će informirati o najprikladnijoj strategiji vakcinacije za zaštitu od novih varijanti SARS-CoV{110}}, s implikacijama na razvoj platformi za vakcine sljedeće generacije.
Slika 4. Ćelijski imuni odgovori u vršnim vremenskim tačkama. (A) Frekvencije specifičnih IFN-c plus ćelija među CD4 plus T ćelijama su upoređene između BNT162b2/BNT162b2 (n=19), AZD1222/AZD1222 (n=18), AZD1222/BNT162b2 ( n=9), i prethodna infekcija/vakcinacija (n=7) grupe u vršnim vremenskim tačkama. Vrhunske vremenske tačke su odabrane na sljedeći način: nakon druge doze u grupama vakcinacije BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 i AZD1222/BNT162b2 i nakon prve doze u grupi s prethodnom infekcijom/cijepljenjem. (B) Procenat učesnika sa različitim nivoima ćelijskog imunog odgovora. Kvantifikacija tipa odgovora (jak, umjeren i nikakav/slab) izražava se kao dio broja primatelja vakcine u svakoj grupi. Tipovi ispitanika koji su odgovorili bili su određeni procentualnim rezultatom izračunatim od svih vakcinisanih učesnika. (C) Učestalosti polifunkcionalnih CD4 plus T ćelija specifičnih za šiljak koje proizvode bilo koju kombinaciju IFN-c, IL-2 ili TNF u svakoj grupi vakcinisanih učesnika. (D) Frakcija CD4 plus T ćelija specifičnih za šiljak je pozitivna za dati broj citokina. Podaci su predstavljeni kao srednja vrijednost ± SD. Značajnost je analizirana korištenjem Mann-Whitney testa (A i C). ns, nije značajno; *P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001.
Štaviše, sastojak tradicionalne kineske medicinecistanche herbtakođe može poboljšati imunitet, Mehanizam Cistanche deserticola u jačanju imuniteta
Prednosti suplemenata cistanche-kako ojačati imuni sistem
Kliknite ovdje za pregled proizvoda Cistanche Enhance Immunity
【Zatražite više】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Cistanche tubulosapolisaharidi mogu potaknuti proliferaciju T i B limfocita, ali je proliferacijski učinak B limfocita znatno jači od T limfocita. Polisaharidi Cistanche deserticola potiču oslobađanje citokina IL22 iz limfocita, što je povezano sa promocijom proliferacije limfocita slezene. Cistanche deserticola može aktivirati makrofage i regulisati imuni sistem. Polisaharidi Cistanche deserticola, ehinazid i pilozid imaju značajne efekte na formiranje i aktivnost ljudskih limfocita. Može povećati odgovor na proliferaciju limfocita, čime se poboljšava imunološka funkcija tijela.
ekstrakt cistanche
Funkcionalne komponenteCistanche tubulosaukupni glikozidi imaju značajan utjecaj na oporavak stanica nakon oštećenja zračenjem 60Coy, a također mogu poboljšati imunološku funkciju protiv oštećenja radijacijom.
Ekstrakt Cistanche tubulosa ne samo da može nadoknaditi urođeni imuni nedostatak već i poboljšati stečeni imunitet.
Slika 5. Unakrsne varijante imunog odgovora na Delta izazvane različitim prime-boost režimima. (A) Uzorci plazme su analizirani testovima neutralizacije smanjenja plaka za SARS-CoV-2 Delta varijantu u BNT162b2/BNT162b2 (n {{10}}), AZD1222/AZD1222 (n {{ 13}}), AZD1222/BNT162b2 (n=9), prethodna infekcija/vakcinacija (n=11) i Delta-rekonvalescentne (n {{20}}) grupe. Delta-neutralizirajuća antitijela su upoređena među grupama u sljedećim vremenskim tačkama: nakon druge doze u vakcinisanim grupama BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 i AZD1222/BNT162b2 i nakon prve doze u grupi koja je prethodila infekciji/cijepljenju. (B) PBMC su analizirani intracelularnim bojenjem na IFN-c nakon direktne ex vivo stimulacije korištenjem dva različita skupa S peptidnih pulova koji sadrže nekonzervirane regije šiljastih sekvenci između Wuhan i Delta sojeva u BNT162b2/BNT162b2 (n {{37} }), AZD1222/AZD1222 (n {{40}}), AZD1222/BNT162b2 (n=9), prethodna infekcija/cijepljenje (n=7) i Delta-oporavak ( n=17) grupa. Odnos učestalosti CD4 plus T ćelija koje proizvode IFN-c u odnosu na Delta šik prema učestalosti CD4 plus T ćelija koje proizvode IFN-c u odnosu na šiljak iz Wuhana izračunat je u svakoj grupi. Podaci su predstavljeni kao geometrijska sredina ± geometrijska SD (A) ili srednja vrijednost ± SD (B) i analizirani za značajnost korištenjem Mann-Whitney testa. ns, nije značajno; *P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0.001, ****P < 0.0001.
Reference
[1] Bok K, Sitar S, Graham BS, et al. Ubrzani razvoj vakcine protiv COVID-19: prekretnice, lekcije i izgledi. Immunity 2021;54:1636–51. https://doi. org/10.1016/j.immuni.2021.07.017.
[2] Polack FP, Thomas SJ, Kitchin N, et al. Sigurnost i efikasnost BNT162b2 mRNA Covid-19 vakcine. N Engl J Med 2020;383:2603–15. https://doi.org/ 10.1056/NEJMoa2034577.
[3] Falsey AR, Sobieszczyk ME, Hirsch I, et al. Faza 3 Sigurnost i efikasnost AZD1222 (ChAdOx1 nCoV-19) Covid-19 vakcine. N Engl J Med 2021;385:2348–60. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2105290.
[4] Borobia AM, Carcas AJ, Pérez-Olmeda M, et al. Imunogenost i reaktogenost BNT162b2 pojačivača kod ChAdOx1-S-primed učesnika (CombiVacS): multicentrično, otvoreno, randomizirano, kontrolirano ispitivanje faze 2. Lancet 2021;398:121–30. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(21) 01420-3.
[5] Barros-Martins J, Hammerschmidt SI, Cossmann A, et al. Imuni odgovori protiv SARS-CoV-2 varijanti nakon heterologne i homologne vakcinacije ChAdOx1 nCoV-19/BNT162b2. Nat Med 2021;27:1525–9. https://doi.org/ 10.1038/s41591-021-01449-9.
[6] Hillus D, Schwarz T, Tober-Lau P, et al. Sigurnost, reaktogenost i imunogenost homologne i heterologne prime-boost imunizacije sa ChAdOx1 nCoV-19 i BNT162b2: prospektivna kohortna studija. The Lancet Respir Med 2021;9:1255–65. https://doi.org/10.1016/S2213-2600(21)00357- X.
[7] Schmidt T, Klemis V, Schub D, et al. Imunogenost i reaktogenost heterologne vakcinacije ChAdOx1 nCoV-19/mRNA. Nat Med 2021;27:1530–5. https://doi.org/10.1038/s41591-021-01464-w.
[8] Liu X, Shaw RH, Stuart ASV, et al. Sigurnost i imunogenost heterolognih naspram homolognih rasporeda primarnog pojačanja s adenovirusnom vektorskom i mRNA COVID-19 vakcinom (Com-COV): jedno-slijepo, randomizirano ispitivanje neinferiornosti. Lancet 2021;398:856–69. https://doi.org/10.1016/S0140- 6736(21)01694-9.
[9] Krammer F, Srivastava K, Alshammary H, et al. Odgovori antitijela kod seropozitivnih osoba nakon jedne doze SARS-CoV-2 mRNA vakcine. N Engl J Med 2021;384:1372–4. https://doi.org/10.1056/NEJMc2101667.
[10] Bradley T, Grundberg E, Selvarangan R, et al. Odgovori antitijela nakon jedne doze SARS-CoV-2 mRNA vakcine. N Engl J Med 2021;384:1959–61. https:// doi.org/10.1056/NEJMc2102051.
[11] Saadat S, Rikhtegaran Tehrani Z, Logue J, et al. Titar vezivnih i neutralizacijskih antitijela nakon jedne doze vakcine kod zdravstvenih radnika koji su prethodno bili zaraženi SARS-CoV-2. JAMA 2021;325:1467–9. https://doi.org/ 10.1001/jama.2021.3341.
[12] Reynolds CJ, Pade C, Gibbons JM, et al. Prethodna infekcija SARS-CoV-2 spašava odgovore B i T ćelija na varijante nakon prve doze vakcine. Science 2021;372:1418–23. https://doi.org/10.1126/science.abh1282.
[13] Ledford H. Može li miješanje vakcina protiv COVID-a pojačati imuni odgovor? Nature 2021;590:375–6. https://doi.org/10.1038/d41586-021-00315-5.
[14] Schultz NH, Sorvoll IH, Michelsen AE, et al. Tromboza i trombocitopenija nakon vakcinacije protiv ChAdOx1 nCoV-19. N Engl J Med 2021;384:2124–30. https:// doi.org/10.1056/NEJMoa2104882.
[15] Greinacher A, Thiele T, Warkentin TE, et al. Trombotična trombocitopenija nakon vakcinacije ChAdOx1 nCov-19. N Engl J Med 2021;384:2092–101. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2104840.
[16] Mazzoni A, Di Lauria N, Maggi L, et al. Vakcinacija prve doze mRNA dovoljna je da reaktivira imunološku memoriju na SARS-CoV-2 kod subjekata koji su se oporavili od COVID-19. J Clin Invest 2021;131:e149150.
[17] Samanović MI, Cornelius AR, Gray-Gaillard SL, et al. Uočeni su snažni imunološki odgovori nakon jedne doze doze BNT162b2 mRNA vakcine kod osoba sa iskustvom sa SARS-CoV-2-. Sci Transl Med 2022;14:eabi8961.. https://doi.org/ 10.1126/scitranslmed.abi8961.
[18] Khoury DS, Cromer D, Reynaldi A, et al. Nivoi neutralizirajućih antitijela su visoko prediktivni za imunološku zaštitu od simptomatske SARS-CoV-2 infekcije. Nat Med 2021;27:1205–11. https://doi.org/10.1038/s41591-021-01377-8.
[19] Hall V, Foulkes S, Insalata F, et al. Zaštita od SARS-CoV-2 nakon vakcinacije Covid- 19 i prethodne infekcije. N Engl J Med 2022;386:1207–20. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2118691.
[20] Zhang Z, Mateus J, Coelho CH, et al. Humoralna i ćelijska imunološka memorija na četiri COVID-19 vakcine. Cell 2022;185:2434–51. https://doi.org/10.1016/ j.cell.2022.05.022.
[21] Vardhana S, Baldo L, Morice WG, et al. Razumijevanje odgovora T-ćelija na COVID-19 je od suštinskog značaja za informiranje strategija javnog zdravlja. Sci Immunol 2022;7:eabo1303.. https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo1303.
[22] Moss P. Imuni odgovor T ćelija protiv SARS-CoV-2. Nat Immunol 2022;23:186–93. https://doi.org/10.1038/s41590-021-01122-w.
[23] Goldberg Y, Mandel M, Bar-On YM, et al. Zaštita i slabljenje prirodnog i hibridnog imuniteta na SARS-CoV-2.N Engl. J Med 2022;386:2201–12. https://doi. org/10.1056/NEJMoa2118946.
[24] Rossler A, Knabl L, von Laer D, et al. Profil neutralizacije nakon oporavka od infekcije SARS-CoV-2 Omicron. N Engl J Med 2022;386:1764–6. https://doi. org/10.1056/NEJMc2201607.
[25] Guerrera G, Picozza M, D'Orso S, et al. Vakcinacija BNT162b2 indukuje trajne SARS-CoV-2-specifične T ćelije sa fenotipom memorije matičnih ćelija. Sci Immunol 2021; 6 (eabl5344). https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abl5344.
[26] Goldblatt D. SARS-CoV-2: od imuniteta stada do hibridnog imuniteta. Nat Rev Immunol 2022;22:333–4. https://doi.org/10.1038/s41577-022-00725-0.